病毒的培养方法实验——鸡胚培养法

病毒必须在易感的活细胞内才能增殖,因此,根据不同病毒选择敏感动物,离体组织细胞和鸡胚进行分离培养。实验方法原理鸡胚培养方法操作简便,适用于流感病毒,痘病毒,疱疹病毒和脑炎病毒等的培养。最常用的鸡胚接种方法有四种,即绒毛尿囊膜接种法,羊膜腔(羊水囊)接种法,尿囊腔接种法和卵黄囊接种法。根据不同病毒和不同目的采用适宜的接种方法。实验步骤1. 鸡胚的检查将9~11 日龄鸡胚置于检卵器上,照视观察鸡胚是否生活,根据①小血管是否清晰;②胚胎是否活动,观察小鸡的眼睛黑点是否移动。如果鸡胚不动,血管昏暗模糊,变黑或苍白都表示已死亡。2. 接种用铅笔标明天然气室及鸡胚位置,然后在绒毛尿囊膜发育区〈照视时呈现红色〉近胚位处的气室边缘作一记号,定为注射入口。用碘酒消毒注射入口和天然气室端的蛋壳,再用电钻,口腔科用牙钻和小锉刀,于注射入口和天然气室端的蛋壳上锯一小孔,勿伤及卵膜。用大头针通过火焰消毒后刺穿气室端所开小孔的卵膜,......阅读全文

病毒的培养方法实验——鸡胚培养法

病毒必须在易感的活细胞内才能增殖,因此,根据不同病毒选择敏感动物,离体组织细胞和鸡胚进行分离培养。实验方法原理鸡胚培养方法操作简便,适用于流感病毒,痘病毒,疱疹病毒和脑炎病毒等的培养。最常用的鸡胚接种方法有四种,即绒毛尿囊膜接种法,羊膜腔(羊水囊)接种法,尿囊腔接种法和卵黄囊接种法。根据不同病毒和不

动物病毒的鸡胚培养实验

实验方法原理 本实验用痘苗病毒和鸡新城疫病毒接种鸡胚。痘苗病毒适宜于在绒毛尿囊膜上生长,经培养后,产生肉眼可见的白色痘疱样病变,似小结节或白色小片云翳状。鸡新城疫病毒适宜接种在尿囊腔和羊膜腔内,生长后,鸡胚全身皮肤出现出血点,以脑后最显著。实验材料 痘苗病毒(Vavvinia virus)鸡新城疫病

动物病毒的鸡胚培养实验

实验方法原理本实验用痘苗病毒和鸡新城疫病毒接种鸡胚。痘苗病毒适宜于在绒毛尿囊膜上生长,经培养后,产生肉眼可见的白色痘疱样病变,似小结节或白色小片云翳状。鸡新城疫病毒适宜接种在尿囊腔和羊膜腔内,生长后,鸡胚全身皮肤出现出血点,以脑后最显著。实验材料痘苗病毒(Vavvinia virus)鸡新城疫病毒(

病毒的鸡胚培养

目的意义:了解禽源病毒鸡胚培养的意义及用途掌握病毒鸡胚培养的基本方法基本原理:鸡胚培养是培养某些病毒常用方法,此方法可用于某些病毒的分离、增殖、毒力滴定、中和试验及生产疫苗等。病毒接种鸡胚的途径有多种,主要有卵黄囊接种、绒毛尿囊腔接种、绒毛尿囊膜接种、羊膜腔接种途径等,应根据需要选择适当的途径。器材

病毒的鸡胚培养

实验方法原理 羊膜腔接种主要应用于从临床材料(如患者咳嗽液等)分离流感病毒等。这种接种途径可直接感染羊膜腔的内胚层,也可被鸡胚咽下或吸入,引起全胚胎感染。另外,病毒也可被排泄到尿囊腔中,使尿囊腔中含有大量病毒。因此,在用羊膜腔接种分离病毒时,除可收获羊水以外,还可收获尿囊液。实验材料 鸡胚试剂、试剂

病毒的鸡胚培养_卵黄囊接种

实验方法原理卵黄囊接种法主要用于虫媒病毒、衣原体及立克次体等的分离和繁殖。这些大的病原体主要在卵黄囊的内皮细胞生长,且生长速度很快,立克次体在染色后也可看到。实验材料鸡胚试剂、试剂盒消毒剂 (2. 5% 碘酒和 75% 酒精)仪器、耗材检卵灯照明灯卵杯卵盘鸡胚开孔器等实验步骤1. 接种步骤与方法(1

病毒的鸡胚培养_羊膜腔接种

病毒的鸡胚培养可用于:(1)某些病毒分离、增殖;(2)病毒的毒力测定、中和试验;(3)生产疫苗等。实验方法原理 羊膜腔接种主要应用于从临床材料(如患者咳嗽液等)分离流感病毒等。这种接种途径可直接感染羊膜腔的内胚层,也可被鸡胚咽下或吸入,引起全胚胎感染。另外,病毒也可被排泄到尿囊腔中,使尿囊腔中含有大

病毒的鸡胚培养法的注意事项有哪些

注意事项有:  (1)防止污染:接种全过程要求无菌操作。为减少污染,要求方法简单、操作迅速 。  (2)温度要适宜在室温较低 的冬季要采取保温措施才能进行鸡胚接种,以减少死亡。接种过的鸡胚,要根据所接种的病原体生长增殖所需要的温度,置温箱中孵育。1、接种前的准备(1)鸡胚的准备接种前用检卵灯观察鸡胚

病毒的鸡胚培养法的注意事项有哪些

注意事项有:  (1)防止污染:接种全过程要求无菌操作。为减少污染,要求方法简单、操作迅速 。  (2)温度要适宜在室温较低 的冬季要采取保温措施才能进行鸡胚接种,以减少死亡。接种过的鸡胚,要根据所接种的病原体生长增殖所需要的温度,置温箱中孵育。1、接种前的准备(1)鸡胚的准备接种前用检卵灯观察鸡胚

病毒的鸡胚培养_尿囊腔接种

实验方法原理尿囊腔接种法广泛应用于流感病毒、流行性腮腺炎病毒和新城疫病毒的适应和传代培养,这些病毒被注射到尿囊腔后,可在内皮细胞中复制,复制的病毒被释放到尿囊液中,因此,在尿囊液中含有大量的病毒。实验材料鸡胚试剂、试剂盒消毒剂 (2. 5% 碘酒和 75% 酒精)仪器、耗材检卵灯照明灯卵杯卵盘鸡胚开

病毒的鸡胚培养_绒毛尿囊膜接种

实验方法原理绒毛尿囊膜接种常用于牛痘病毒、天花病毒、单纯疱疹病毒的分离,因为这些病毒在绒毛尿囊膜上可形成肉眼可见的斑点状或痘疱状病灶。另外,病毒可在绒毛尿囊膜上进行滴定,因为感染性病毒颗粒的数目可以通过产生的斑和痘的数目来计算。该方法还可用于抗病毒血清的滴定试验,即在有抗体存在的情况下,痘疱形成受到

微生物学技术:病毒的鸡胚培养

一、目的要求掌握鸡胚尿囊腔接种培养新城疫病毒的操作技术。二、器材1.鸡胚 应选用健康鸡群的受精蛋,接种鸡的鸡胚应无母源抗体,以免影响病毒在胚胎中的增殖。实验用的鸡胚多采用9—10日龄的活胚。2.接种材料 新城疫I系疫苗3.各种器械 孵卵器、照蛋箱、蛋架、打孔器、1ml结核菌素注射器、41/2号注射针

衣原体培养基-鸡胚培养基的配制

[用途]培养增殖和分离鹦鹉热、性病淋巴肉芽肿和沙眼等衣原体。 [配法] 7日龄鸡胚3~5只。 精选产后10天内并10℃左右保存的受精鸡卵孵育,置38~39℃、相对湿度40%~60%的孵卵箱中孵育,4天后用检卵灯检视发育情况,挑出未受精及死亡者。生活鸡胚检视时可见清晰血管小团或花纹,其中有

病毒的培养方法实验——传代细胞培养法

实验方法原理从人及动物某些组织,特别是肿瘤组织,经多次传代可建立传代细胞系,这种细胞能无限地传代,某些传代细胞对病毒敏感范围较广,可用作病毒的分离鉴定,如HeLa 细胞,Hep-2 细胞及KB 细胞。三种细胞均来自人肿瘤组织细胞,HeLa 细胞来自子宫颈癌,Hep-2 细胞来自喉癌而KB 细胞来自上

病毒的培养方法实验—组织培养法原代细胞单层培养

实验方法原理组织培养是目前培养病毒应用最广的一种培养方法,其优点是①经济适用,结果正确且敏感;②较实验动物易于控制。原代细胞单层培养法,是指动物(包括脊椎动物和无脊椎动物)的组织自机体取出后,经胰酶或其他细胞分散剂消化处理,得到单个细胞悬液。以一定量接种到特定容器中,加入细胞生长所必需的营养液,置合

天然培养基配制实验_鸡胚浸出液的制备

实验方法原理鸡胚浸出液内含有生长因子、大分子核蛋白和小分子氨基酸等,有刺激细胞生长作用,为早年培养使用的培养用液,现已被合成培养液所代替,但在某些研究中仍有一定应用价值。实验材料鸡卵试剂、试剂盒酒精碘酒BSS仪器、耗材孵化箱烧杯注射器离心机实验步骤1.  孵化选健康受精鸡卵,置入37 ℃温箱孵化;箱

病毒的培养方法实验——动物接种法

实验方法原理注意选择动物种类,年龄。按病毒侵袭部位的不同,选择适宜的接种途径,例如脑炎病毒以注射脑内最敏感。接种后经一定潜伏期,动物发病或死亡即进行解剖。根据动物的症状表现,器官病理改变,受染脏器组织悬液能在同种动物进行连续传代,并排除其他微生物污染的可能性等,即可证明有病毒的增殖。实验材料小白鼠实

鸡胚分离实验

实验方法原理 无菌操作从蛋中取出鸡胚放入培养皿中。实验步骤 材料:无菌材料DBSS: 取材用 BSS(含有高浓度抗生素的 BSS,见附录 I),装在 25〜50 ml 的螺口试管或通用容器内BSS:50 ml 盛于无菌烧杯中,用于冷却烧过的器械20〜50 ml 小烧杯或蛋杯直头和弯头镊子9 cm 皮

鸡胚分离实验

            实验方法原理 无菌操作从蛋中取出鸡胚放入培养皿中。 实验步骤 材料:无菌材料DBSS: 取材用 BSS(含有高浓度抗生素的 BSS,见附录 I),装在 25

鸡胚分离实验

实验方法原理无菌操作从蛋中取出鸡胚放入培养皿中。实验步骤材料:无菌材料DBSS: 取材用 BSS(含有高浓度抗生素的 BSS,见附录 I),装在 25〜50 ml 的螺口试管或通用容器内BSS:50 ml 盛于无菌烧杯中,用于冷却烧过的器械20〜50 ml 小烧杯或蛋杯直头和弯头镊子9 cm 皮氏培

病毒的培养方法实验

实验方法原理 鸡胚培养方法操作简便,适用于流感病毒,痘病毒,疱疹病毒和脑炎病毒等的培养。最常用的鸡胚接种方法有四种,即绒毛尿囊膜接种法,羊膜腔(羊水囊)接种法,尿囊腔接种法和卵黄囊接种法。根据不同病毒和不同目的采用适宜的接种方法。实验步骤 1.  鸡胚的检查将9~11 日龄鸡胚置于检卵器上,照视观察

用活鸡胚培养病毒的原理

物病毒(见脊椎物病毒)培养自宿主、实验物、鸡胚或细胞培养进行死亡、发病或病变等作病毒繁殖直接指标或血细胞凝集、抗原测定等作间接指标收获发病物组织磨悬液或病变细胞培养液即粗制病毒测定病毒数量采用空斑其原理与噬斑相同易物单层细胞代替细菌接种适稀释病毒用含培养液性红琼脂覆盖使病毒染局限面积内形病变区衬底健

生化培养箱对鸡胚背根神经节组织块的培养

 主要用于神经生长因子(NGF)等神经营养因子的生物活性测定。在差倒置显微镜下观察以神经突起的生长长度和密度为指标半定量评估NGF的活性。1、材料和方法(1)选正常受精的鸡蛋,置于37℃生化培养箱内孵化,每日翻动鸡蛋一次。(2)取孵化8-12 d 的鸡蛋, 用70% 酒精消毒蛋壳,从气室端敲开蛋壳,

昆虫病毒的培养实验

实验方法原理培养昆虫病毒主要采取组织培养和感染宿主两种方法,后者比较容易成功,使用更为广泛。本实验以斜纹夜蛾(Prodenialitura)核型多角体感染宿主来培养病毒。斜纹夜蛾能危害棉花、蔬菜等多种作物。核型多角体病毒是多角体病毒侵入宿主细胞后,在细胞核内形成多角体,多角体内包含着很多病毒粒子。斜

昆虫病毒的培养实验

实验方法原理 培养昆虫病毒主要采取组织培养和感染宿主两种方法,后者比较容易成功,使用更为广泛。本实验以斜纹夜蛾(Prodenialitura)核型多角体感染宿主来培养病毒。斜纹夜蛾能危害棉花、蔬菜等多种作物。核型多角体病毒是多角体病毒侵入宿主细胞后,在细胞核内形成多角体,多角体内包含着很多病毒粒子。

鸡胚器官原基

经验交流(0)实验方法原理切出单一器官或组织,整个置于冷的胰蛋白酶中过夜,去除胰蛋白酶,短暂孵育器官或组织,于培养基中分散细胞,稀释并接种培养物。实验材料受精卵                                                                  DBSS

鸡胚器官原基

实验方法原理切出单一器官或组织,整个置于冷的胰蛋白酶中过夜,去除胰蛋白酶,短暂孵育器官或组织,于培养基中分散细胞,稀释并接种培养物。实验材料受精卵DBSS粗制胰蛋白酶试剂、试剂盒培养基皮氏平皿仪器、耗材镊子虹膜刀移液器试管培养瓶手术刀实验步骤1. 如前所述(见方案 12.2 ) 取出胚胎(孵化10~

鸡胚器官原基

            实验方法原理 切出单一器官或组织,整个置于冷的胰蛋白酶中过夜,去除胰蛋白酶,短暂孵育器官或组织,于培养基中分散细胞,稀释并接种培养物。 实验材料 受精卵

鸡胚成纤维细胞制备实验

实验方法原理 用鸡胚制备培养鸡胚成纤维细胞。实验材料 9 日龄鸡胚试剂、试剂盒 70% 乙醇胰酶/EDTA无添加 MEM 培养基完全 MEM-10 培养基仪器、耗材 无菌解剖剪无菌镊子100 cm2 无菌培养皿10 ml 注射器无菌胰酶消化瓶(带磁力搅拌棒)CO2 培养箱500 ml 烧杯纱布 So

鸡胚成纤维细胞制备实验

实验方法原理用鸡胚制备培养鸡胚成纤维细胞。实验材料9 日龄鸡胚试剂、试剂盒70% 乙醇胰酶/EDTA无添加 MEM 培养基完全 MEM-10 培养基仪器、耗材无菌解剖剪无菌镊子100 cm2 无菌培养皿10 ml 注射器无菌胰酶消化瓶(带磁力搅拌棒)CO2 培养箱500 ml 烧杯纱布Sorvall