高通量、低成本SNP、突变和甲基化检测方法——HRM技术应用
HRM介绍 HRM技术是 high-resolution melting analysis即高分辨熔解曲线分析技术，是近年国外兴起的一种全新的突变扫描和基因分型的遗传分析方法。基于高效稳健的 PCR技术，HRM不受突变碱基位点与类型局限，无需序列特异性探针，在 PCR结束后直接运行高分辨熔解，即可完成对样品突变、单核苷酸多态性 -SNP、甲基化、 HLA配型等的分析。 因操作简便快速，使用成本低，结果准确，实现了真正的闭管操作， HRM技术受到普遍关注。HRM原理 HRM的主要原理是根据 DNA序列的长度， GC含量以及碱基互补性差异，应用高分辨率的熔解曲线对样品进行分析，极高的温度均一性和温度分辨率使分辨精度达到对单个碱基差异的区分。随着高精度 PCR仪（ LightCycler® 480和 Ro......阅读全文
高通量、低成本－SNP、突变和甲基化检测方法－——HRM技术应用
HRM介绍 HRM技术是 high-resolution melting analysis即高分辨熔解曲线分析技术，是近年国外兴起的一种全新的突变扫描和基因分型的遗传分析方法。基于高效稳健的 PCR技术，HRM不受突变碱基位点与类型局限，无需序列特异性探针，在 PCR结束后直接运行高分
高通量、低成本－SNP、突变和甲基化检测方法－——HRM技术应用
HRM介绍 HRM技术是 high-resolution melting analysis即高分辨熔解曲线分析技术，是近年国外兴起的一种全新的突变扫描和基因分型的遗传分析方法。基于高效稳健的 PCR技术，HRM不受突变碱基位点与类型局限，无需序列特异性探针，在 PCR结束后直接运行高
高通量、低成本SNP、突变或甲基化检测方法—HRM－技术应用
HRM 介绍HRM 技术是high-resolution melting analysis 即高分辨熔解曲线分析技术，是近年国外兴起的一种全新的突变扫描和基因分型的遗传分析方法。基于高效稳健的PCR 技术，HRM 不受突变碱基位点与类型局限，无需序列特异性探针，在PCR 结束后直接运行高分辨熔解，即
SNP检测——HRM技术应用
单核苷酸多态性（Single Nucleotide Polymorphisms，SNPs），指单个核苷酸碱基的改变，包括置换、颠换、缺失和插入，导致的核酸序列的多态性。在不同个体的同一条染色体或同一位点的核苷酸序列中，绝大多数核苷酸序列一致而只有一个碱基不同的现象，这就是SNP。SNP在人类
SNP检测——HRM技术应用
HRM技术服务之SNP检测（snp检测的最佳方案） 单核苷酸多态性（Single Nucleotide Polymorphisms，SNPs），指单个核苷酸碱基的改变，包括置换、颠换、缺失和插入，导致的核酸序列的多态性。在不同个体的同一条染色体或同一位点的核苷酸序列中，绝大多数核苷酸序列一
甲基化检测——MSHRM技术
HRM技术服务之甲基化检测（MS-HRM技术） DNA甲基化是发生在DNA碱基序列上的一种共价修饰。在哺乳动物中，DNA甲基化主要发生在5'-CpG-3'双核苷酸序列的胞嘧啶上。在人类基因组中，大约有60%～70%的CpG胞嘧啶是甲基化的，其程度因不同的物种和细胞类型而异。DNA甲基化状
甲基化检测——MSHRM技术
DNA甲基化是发生在DNA碱基序列上的一种共价修饰。在哺乳动物中，DNA甲基化主要发生在5'-CpG-3'双核苷酸序列的胞嘧啶上。在人类基因组中，大约有60%～70%的CpG胞嘧啶是甲基化的，其程度因不同的物种和细胞类型而异。DNA甲基化状态在基因组中呈现出一定的分布模式，90％的甲
高分辨率熔解曲线(HRM)分析预混Mix(PCR)，能基因筛查吗？
高分辨率熔解曲线(high-resolution melting，HRM)是一种基于单核苷酸熔解温度不同而形成不同形态熔解曲线的基因分析新技术，具有极高的敏感性，可以检测出单个碱基的差异。 作为一种高效稳健的"post－PCR"技术，它不受突变碱基位置与类型的限制，无需序列特异性探针，在PCR结
SNP检测技术（测序、taqman探针和snp芯片）
snp现有检测技术有主要的3大类别1、测序 主要发现新的snp位点和比较集中的snp位点，如hla区域，但成本较高，工作量大，不适合大样本做疾病关联分析。 2、taqman探针 结果比较可靠，国外文章也大量应用，不过对于国内成本偏高，同类还有snpshot技术，abi和贝克曼
浅谈核酸与飞行时间质谱的“完美邂逅”
先声诊断的实验室近期很是忙碌，除了最近火遍全球的第四代测序—牛津纳米孔测序平台和大家熟悉的高通量测序等在如火如荼的运转之外，据说他们又引进了一个新的技术平台——MassARRAY®核酸质谱分析系统。先声小编表示核酸？质谱？它俩居然能是一对儿？质谱在小编的印象里不是做蛋白和代谢的吗？它居然还能做核酸？
SNP检测方法、前景和问题
SNP 是指基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA 序列多态性，在群体中的发生频率不小于1 %。包括单个碱基的转换、颠换、插入和缺失等。所谓转换是指同型碱基之间的转换，如嘌呤与嘌呤( G2A) 、嘧啶与嘧啶( T2C) 间的替换；所谓颠换是指发生在嘌呤与嘧啶(A2T、A2C、C2G、G
高分辨率熔点分析技术进行冻存组织样本甲基化的检测
1 前言 启动子高度甲基化是恶性肿瘤基因转录中的一种很常见的现象，被视为细胞恶性转化的标志之一。DNA甲基化分析是一种基因检测工具，用于早期癌症检测、风险评估与治疗疗效评估，具有非常诱人的前景。 DNA甲基化检测最常用的方法主要依赖于亚硫酸氢钠对基因组 DNA 的处理，将胞嘧
MD应用文章下载:SNP基因分型高通量检测方法新思路
MD应用文章下载:SNP基因分型高通量检测方法新思路SNP基因分型高通量检测方法新思路单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNP），主要指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性。它是人类可遗传的变异中最常见的一种，占所有已知多态性的90%以
SNP检测技术对比
1. SNP检测方法分类1.1. 根据检测原理分类根据检测原理进行分类，目前来说，基于杂交原理的检测方法应用更为广泛。1.2. 根据检测通量分类根据检测通量进行分类，可以分为高通量、中通量和低通量方法。目前中通量方法和高通量总的基因芯片法（包括beadschip）应用更为广泛。除此之外，基于Ta
Rotorgene－Q－一款独具创新的荧光定量PCR仪
荧光定量PCR检测在中国的应用已经有超过10年的历史，也是目前分子诊断领域最主要的技术方法。随着该项检测的广泛开展，临床对于检测的敏感性、重复性、通量和速度等都提出了更高的要求。作为该方法的重要检测平台，荧光定量PCR仪器也在不断推陈出新。过去的10年中，国内外先后有10多个品牌，推出了几十种型号的
高通量SNP分子分型技术(KASP技术)经验分享
KASP技术经验分享 KASP技术经验分享 KASP技术经验分享 重要的事情说三遍，终于可以开始实验了,但在实验前或实验中乃在实验后,根据小编多年的经验,您可能会遇到以下问题,不用担心,待小编为您一一解答. 1.引物设计提交序列时的注意事项有哪些？ 我们要求所提交的
高通量SNP分子分型技术(KASP技术)经验分享
重要的事情说三遍，终于可以开始实验了,但在实验前或实验中乃在实验后,根据小编多年的经验,您可能会遇到以下问题,不用担心,待小编为您一一解答.1.引物设计提交序列时的注意事项有哪些？我们要求所提交的序列长度至少为目标位点上下游各50bp。请注意序列来源，尽量保证序列准确，多态性位点BLAST结果证明为
高通量SNP分子分型技术(KASP技术)经验分享
重要的事情说三遍，终于可以开始实验了,但在实验前或实验中乃在实验后,根据小编多年的经验,您可能会遇到以下问题,不用担心,待小编为您一一解答. 1.引物设计提交序列时的注意事项有哪些？ 我们要求所提交的序列长度至少为目标位点上下游各50bp。请注意序列来源，尽量保证序列准确，多态性位点
高分辨熔解曲线法HRM实现基因分型
HRM实现基因分型基因分型在动物、植物、微生物的物种、菌种筛查、筛选、缺陷、突变基因的检测，根据个体基因类型实现对诸如癌症治疗、监测等的精准用药，以及消费类基因检测如酒精代谢能力基因检测等等领域有很多应用。通常，基因分型SNP采用荧光探针终点法，检测一个位点需要两个荧光探针，如一个探针的荧光报告基团
SNP－的检测方法
SNP 的分型技术可分为两个时代，一为凝胶时代，二为高通量时代。凝胶时代的主要技术和方法包括限制性酶切片段长度多态性分析（RFLP）、寡核苷酸连接分析（OLA）、等位基因特异聚合酶链反应分析（AS2PCR）、单链构象多态性分析（SSCP）、变性梯度凝胶电泳分析（DGGE），虽然这些技术与高通量时代的
高分辨熔解曲线突变检测
高分辨熔解曲线（High Resolution Melting）技术是近年来兴起的一种全新的突变扫描和基因分型的遗传分析方法。HRM不受突变碱基位点与类型局限，无需序列特异性探针，在PCR结束后直接运行高分辨熔解，即可完成对样品的分析。该方法与其他遗传分型技术相比具有灵敏度高、特异性好、成本低廉
LightCycler应用：甲基化分析
主要应用:应用实时荧光PCR技术进行快速准确的DNA甲基化分析DNA甲基化是表观遗传学的重要研究内容之一，它可以在转录水平抑制基因的表达。具体的过程是在胞嘧啶－鸟嘧啶（CpG二核苷酸）的5位碳原子上添加了一个额外的甲基团，形成5－甲基胞嘧啶。CpG二核苷酸密度较高的区域在人体基因组中呈非随机分布于，
HRM甲基化位点检测的灵敏性（一）
引言DNA甲基化是一种重要的表观遗传CpG二核苷酸修饰形式，异常的DNA甲基化模式发生在许多基因启动子的CpG岛，这会增加患癌症的风险。CpG岛高甲基化常导致基因沉默，与癌症、老化、基因印记、X-染色体失活密切相关，此外，全基因组CpG高甲基化中也证实了发生在肿瘤形成的早期。传统的检测甲基化位点的方
HRM甲基化位点检测的灵敏性（二）
两个不同的病人的CpG位点见下表图4：miR-195 CpG岛的150bp扩增区 图5：从4个CLL患者中克隆miR-195可能调控区，使用Qiagen EpiTect Kit进行重亚硫酸盐处理，之后PCR扩增，Lightscanner检测，测序。不同的患者采取不同的甲基化模式扩增（0-8
COLDPCR和HRM结合应用于癌症基因低水平未知突变
研究背景：癌症中体细胞分子层面的突变，常常需要在大量野生型DNA中辨识低浓度的DNA突变。但是，突变检测方法的选择率和灵敏度常常限制了鉴定低浓度突变的可靠性。最近开发的COLD-PCR（低变性温度下的复合扩增，李等人。2008）解决了低含量基因突变检测的一些局限性，在PCR扩增过程中利用关键变性温度
快速便宜的CRISPR/Cas9突变体筛选方法
新的基因组编辑工具——如ZFNs、TALENs以及最近的CRISPR/Cas9系统，已经大大提高了在不同动物模型中敲除基因的能力，包括斑马鱼。然而，对数量庞大的动物进行筛选，所需的时间和成本，仍然是一个瓶颈。 最近，意大利多恩动物研究所（Stazione zoologica Anton Doh
甲基化敏感性高分辨率熔解(MSHRM)
DNA 甲基化是发生在DNA碱基序列上的一种共价修饰。在哺乳动物中，DNA甲基化主要发生在5'-CpG-3‘双核苷酸序列的胞嘧啶上。在人类基因组中，大约有60%~70%的CpG胞嘧啶是甲基化的，其程度因不同的物种和细胞类型而异。DNA甲基化状态在基因组中呈现出一定的分布模式，90%的甲基
甲基化敏感性高分辨率熔解(MSHRM)
DNA 甲基化是发生在DNA碱基序列上的一种共价修饰。在哺乳动物中，DNA甲基化主要发生在5'-CpG-3‘双核苷酸序列的胞嘧啶上。在人类基因组中，大约有60%~70%的CpG胞嘧啶是甲基化的，其程度因不同的物种和细胞类型而异。DNA甲基化状态在基因组中呈现出一定的分布模式，90%的甲基胞嘧
甲基化敏感性高分辨率熔解(MSHRM)
DNA 甲基化是发生在DNA碱基序列上的一种共价修饰。在哺乳动物中，DNA甲基化主要发生在5'-CpG-3‘双核苷酸序列的胞嘧啶上。在人类基因组中，大约有60%~70%的CpG胞嘧啶是甲基化的，其程度因不同的物种和细胞类型而异。DNA甲基化状态在基因组中呈现出一定的分布模式，90%的甲基胞嘧
荧光定量PCR技术的的应用范围
荧光定量PCR的应用范围有哪些，自从荧光定量PCR被发明以后，其应用对生物科学发展所起的作用非常重要，荧光定量PCR的应用的应用大概有下面的这些领域。 1、核酸定量分析。 对传染性疾病进行定量定性分析，病原微生物或病毒含量的检测 , 比如近期流行的甲型H1N1流感， 转基因动植物基因拷贝数的检