人颗粒酶B酶点检测
酶点(ELISPOT)技术是最近几年发展起来应用于抗病毒免疫和抗肿瘤免疫的一种新型测定方法。Sanquin 提供的颗粒酶-B酶点检测试剂盒应用最新技术,灵敏度高,仅一个阳性细胞即可测到存在的颗粒酶-B。特异性强,结果重复性好。为抗病毒和抗肿瘤研究提供新型强有力的检测工具。酶点技术与酶标技术比较1、酶点技术明显的特点是灵敏度增加2、酶点技术仅需要1 个阳性细胞 / 孔即可,灵敏度达到1 :1,000,000的阳性准确分析3、酶标技术需要至少要有400 细胞 / 孔才可达到有意义的检测水平4、能在单细胞水平上分析产生细胞因子的T细胞颗粒酶-B介绍颗粒酶是外切丝氨酸蛋白酶,来自细胞毒T淋巴细胞(CTLs)和自然杀伤细胞(NK)释放的细胞浆颗粒。这些颗粒含有颗粒酶原及其它蛋白酶原,包括穿孔蛋白。由于CTL细胞与靶细胞结合(经CTL受体和靶细胞表面的抗原肽-MHCⅠ类分子复合物结合),通过颗粒的胞吐过程,颗粒酶进入了靶细胞,穿孔......阅读全文
酶的活性位点的作用
酶的活性位点通常是蛋白质表面一个能够让底物结合和嵌入的凹陷或裂隙,底物通常通过不同的相互反应结合位点上与现存的氨基酸结合,如:氢键、离子键、范德华力相互作用或偶极-偶极相互作用。例如,底物可能通过氢键结合在丝氨酸残基上,也可通过离子键结合在天冬氨酸残基上,或通过范德华力结合在苯丙氨酸残基上。这些结合
酶的活性位点的定义
酶的活性位点通常是蛋白质表面一个能够让底物结合和嵌入的凹陷或裂隙,底物通常通过不同的相互反应结合位点上与现存的氨基酸结合,如:氢键、离子键、范德华力相互作用或偶极-偶极相互作用。例如,底物可能通过氢键结合在丝氨酸残基上,也可通过离子键结合在天冬氨酸残基上,或通过范德华力结合在苯丙氨酸残基上。这些结合
DNA-酶-I-超敏感位点作图
DNA 酶 I 超敏感位点作图法经常用于定位真核基因的调控区。由于还未被理解的原因,基因带有对 DNA 酶 I 切割敏感的分开的序列,而且这些所谓超敏感位点图谱是随基因的激活状态而变化的(Weintrauband Gmudine1976)。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J.
DNA-酶-I-超敏感位点作图
实验材料 真核细胞 试剂、试剂盒 缓冲液 A EDTA 乙醇 裂解缓冲液
蛋白酶应用的关注点
未来对饲用蛋白酶的研究应关注以下几个方面:(1)单胃动物对蛋白质的消化主要在胃和小肠中进行,因此理想的外源添加蛋白酶应该是在两个消化部位都可以发挥活性,这就需要酸性蛋白酶和中性、碱性的蛋白酶共同作用(如果是中碱性蛋白酶还需要考虑胃酸的影响);(2)考虑各种原料中蛋白质结构的不同,如大豆球蛋白和高粱醇
DNA-酶-I-超敏感位点作图
实验材料 真核细胞试剂、试剂盒 缓冲液 AEDTA乙醇裂解缓冲液磷酸盐缓冲液台盼蓝染料DNA 酶 I 稀释缓冲液DNA 酶 I 溶液蛋白酶 K 溶液RNA 酶溶液酚:氯仿SDS 缓冲液TE仪器、耗材 Sorvall H1000B 转头或等价物带螺帽的试管振荡水浴锅实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存液、缓
凝血酶切割位点的定义
中文名称凝血酶切割位点英文名称thrombin cleavage site定 义基因工程表达系统中融合蛋白常用的连接序列,凝血酶处理可将融合蛋白中目的蛋白与非目的蛋白的肽段分离,最适切割位点是:P4-P3-P2-Arg↓-P1′-P2′,式中P4和P3为疏水氨基酸,P1′和P2′为非酸性氨基酸,↓
蛋白酶的分类及作用位点
蛋白酶分类作用位点已知抑制物氨基肽酶金属蛋白酶带有自由氨基的L-氨基酸氨基末端;不能分解由X-Pro、·D或·Q组成的肽键2,2,双吡啶,1.1()-菲咯啉菠萝蛋白酶巯基蛋白酶无特异性α2巨球蛋白,TPCK,TLCK,烷化羧肽酶A锌金属蛋白酶带有自由氨基酸的L—氨基酸羧基端;不能分解R、P或羟脯氨酸
蛋白酶的分类及作用位点
蛋白酶分类作用位点已知抑制物氨基肽酶金属蛋白酶带有自由氨基的L-氨基酸氨基末端;不能分解由X-Pro、·D或·Q组成的肽键2,2,双吡啶,1.1()-菲咯啉菠萝蛋白酶巯基蛋白酶无特异性α2巨球蛋白,TPCK,TLCK,烷化羧肽酶A锌金属蛋白酶带有自由氨基酸的L—氨基酸羧基端;不能分解R、P或羟脯氨
生物酶学基础蛋白酶的分类及作用位点
蛋白酶分类作用位点已知抑制物氨基肽酶金属蛋白酶带有自由氨基的L-氨基酸氨基末端;不能分解由X-Pro、·D或·Q组成的肽键2,2,双吡啶,1.1()-菲咯啉菠萝蛋白酶巯基蛋白酶无特异性α2巨球蛋白,TPCK,TLCK,烷化羧肽酶A锌金属蛋白酶带有自由氨基酸的L—氨基酸羧基端;不能分解R、P或羟脯氨酸
酶免疫技术常用的底物知识点小结
1.HRP的底物 作为供氢体的底物化合物较多,常用的有以下几种: (1)邻苯二胺(OPD):OPD被认为是HRP最为敏感的色原底物之一。0PD在HRP的作用下显橙黄色,加强酸如硫酸或盐酸终止反应后呈棕黄色,最大吸收峰在492nm波长。OPD是ELISA中应用最早的底物,但其应用液稳定性差,易
酶免疫技术常用的底物知识点小结
1.HRP的底物 作为供氢体的底物化合物较多,常用的有以下几种: (1)邻苯二胺(OPD):OPD被认为是HRP最为敏感的色原底物之一。0PD在HRP的作用下显橙黄色,加强酸如硫酸或盐酸终止反应后呈棕黄色,最大吸收峰在492nm波长。OPD是ELISA中应用最早的底物,但其应用液稳定性差,易
限制[性酶切]位点的定义和应用
中文名称限制[性酶切]位点英文名称restriction site定 义限制性内切酶在DNA双链上所识别的一些特殊序列。在分子生物学和基因工程中常用的Ⅱ型限制性内切酶识别的多为4、6或8对核苷酸的双链回文序列。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
酶免疫技术常用的底物知识点小结
1.HRP的底物 作为供氢体的底物化合物较多,常用的有以下几种:(1)邻苯二胺(OPD):OPD被认为是HRP最为敏感的色原底物之一。0PD在HRP的作用下显橙黄色,加强酸如硫酸或盐酸终止反应后呈棕黄色,最大吸收峰在492nm波长。OPD是ELISA中应用最早的底物,但其应用液稳定性差,易变色,需新
酶标记抗体免疫组化染色知识点
(一)直接法:将酶直接标记在特异性抗体上,与组织细胞内相应的抗原进行特异性反应,形成抗原-抗体-酶复合物,最后用酶底物显色。直接法的优点在于操作简便及特异性强,缺点是敏感性低,制备的抗体种类有限。 (二)间接法:将酶标记在第二抗体上,先将第一抗体(特异性抗体)与相应的组织抗原结合,形成抗原抗体
采用酶法提取胶原蛋白时要注意的点
首先,酶作用时间必须适当。如果时间过短,胶原蛋白就不能充分释放到提取液中,影响提取率;如果酶作用时间过长,胶原蛋白会水解过度,产生过多的苦味小分子低聚肽,不仅会增加分离纯化的难度,也会影响胶原蛋白的功能特性和生物活性。 其次,酶解温度要适宜。温度过低,酶的作用效果不明显;温度过高会引起酶的失活
醛缩酶B:肾癌治疗的潜在新靶点
研究发现醛缩酶B(ALDOB),一种在肾透明细胞癌(ccRCC)中普遍缺失的糖酵解酶,能通过非酶活性的方式抑制肾透明细胞癌的增殖。关键在于,醛缩酶B与核心转录抑制因子CtBP2相互作用,阻止了CtBP2介导的肿瘤相关基因转录抑制,进而抑制肾透明细胞癌细胞的增殖和迁移。上海交通大学医学院上海市第一人民
亚甲基四氢叶酸还原酶相关SNP位点
(1)MTHFR C677T rs1801133; (2)MTHFR A1298C rs1801131; (3)MTRR A66G rs1801394; 研究认为,以上位点多态性与多种疾病相关: (1)妇幼保健类:神经管缺陷、先天性心脏病、唇腭裂、妊娠期高血压疾病,自发性流产; (2)
限制[性酶切]位点保护试验的方法和应用
中文名称限制[性酶切]位点保护试验英文名称restriction site protection experiment定 义当一段DNA被某些蛋白质(如转录因子、组蛋白等)结合后,这段DNA上的限制性酶切位点就不会被相应的限制性酶切开。因此将待研究的DNA与蛋白质一起保温,再用该DNA链上已知的限
氯霉素乙酰转移酶的活性位点的介绍
1、氯霉素结合位点 氯霉素结合与定位在亚基交界面的一个深深的袋子结构中。尽管形成袋子结构的大多数氨基酸位于形成交界面的其中的一个亚基中,在催化中起关键作用的195位的组氨酸却位于另外的一个亚基。氯霉素的苯环与29位亮氨酸,31位半胱氨酸,160亮氨酸,172位异亮氨酸的侧链结合,其二氯基团和1
位点特异性重组的整合酶和IHF的介绍
在att上都有特定的结合位点,体外实验也证明这两种蛋白质结合在attDNA的特定位点上。每一次重组过程需要20-40个整合酶分子及约70个IHF分子。故可能这两种蛋白质不仅是作为酶(发挥催化作用),而且在每次重组中都要形成某种复合物结构。通过缺失实验,证明attP至少要约250bp长,太短将使其
石油产品倾点、凝点、浊点、冷滤点测定器
本仪器主要适用于检测石油产品的冷滤点、倾点、凝固点、浊点。技术参数1、适用标准:SH/T0248 ASTM D6371 IP306 GB/T3535 GB/T5102、控温方式:进口PID数显温控器3、控温精度:常温~-40±0.1℃4、制冷方式:压缩机制冷5、计时方式:数显计时器6、整机功
关于基因扩增技术—聚合酶链反应的点杂交的介绍
当扩增产物是多条带时,用点杂交更合适。这种方法的基本过程是,首先将扩增的DNA固定到尼龙膜或硝酸纤维素滤膜上,再用放射性或非放射性标记物标记的探针杂交。点杂交还有助于检测突变DNA的突变类型,用于人类遗传病诊断和某些基因的分型。放射性同位素32P标记的寡核苷酸探针检测的敏感性、特异性和方法的可靠
西安交大碳点纳米酶生物医学应用方面获系列进展
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/3/495152.shtm 纳米酶是一类蕴含酶学特性的纳米材料,能够在生理或极端条件下催化酶的底物,具有类似于天然酶的酶促反应动力学,并且可以作为酶的替代品用于人类健康。自从2007年首次报道以来,全球已经
石油倾点与凝点
石油倾点与凝点 倾点是指油品在规定的试验条件下,被冷却的试样能够流动的zui低温度。凝点是指油品在规定的试验条件下,被冷却的试样油面不再移动时的zui高温度,都以oC表示。是用来衡量油品温流动性的常规指标,同一油品的倾点比凝点略高几度,过去常用凝点,现在国际通用倾点。是用来衡量润滑油低温流
凝点倾点冷滤点测定仪介绍
【仪器概述】SC-510B石油产品凝点倾点冷滤点测定仪是根据中华人们民共和国国家标准GB/T510 、GB/T3535、SH/T0248 标准设计制造的。具有结构精巧、设计合理、制造工艺独到的特点。适用于测定石油产品的凝点,也可用于其它低温试验。本仪器采用先进的复叠式压缩机制冷技术,节约能源,操作简
恢复端粒酶“年轻”水平——激活关键分子靶点可逆转衰老特征
美国得克萨斯大学安德森癌症中心研究人员证明,在临床前模型上进行的试验中,通过治疗手段恢复端粒酶特定亚基的“年轻”水平,可以显著减少衰老的迹象和相关症状。如果这些发现在临床研究中得到证实,可能对治疗阿尔茨海默病、帕金森病、心脏病和癌症等与衰老相关的疾病具有重要意义。相关论文发表于新一期《细胞》杂志。研
新的色氨酸代谢酶,为肿瘤免疫治疗提供潜在靶点
根据顶尖学术杂志《细胞》上最近刊登的一项新研究,来自德国癌症研究中心(German Cancer Research Center,DKFZ)和柏林健康研究所(Berlin Institute of Health,BIH)的科学家在多种类型的癌症中发现,肿瘤细胞大量产生一种名为IL4I1(Inte
带您了解胃蛋白酶测定试剂盒的知识点
胃蛋白酶原由胃底主细胞分泌,在PH 1.5-5.0条件下,被活化成胃蛋白酶,将蛋白质分解为胨,一部分被分解为酷氨酸、苯丙酸等氨基酸。胃液胃蛋白酶测定可用于鉴别神经性低酸症和胃性低酸症,当胃酸过少或缺乏时,前者胃蛋白酶的含量有时正常而后者盐酸与胃蛋白酶同时缺乏。一般认为胃性低酸症是由于胃粘膜的重症
卫计委解读:药物代谢酶和药物作用靶点基因检测技术指南
近年来,随着人类基因组学的发展,药物基因组学领域得到了迅猛发展,越来越多的药物基因组生物标记物及其检测方法相继涌现。 药物基因组学已成为指导临床个体化用药、评估严重药物不良反应发生风险、指导新药研发和评价新药的重要工具,部分上市的新药仅限于特定基因型的适应症患者。 药物体内代谢、转运及药物作