稀释法平板法分离土壤中的微生物!
稀释法平板法分离土壤中的微生物! 一、目的 ⒈了解稀释法分离土壤微生物的原理。 ⒉学习并掌握由土壤分离细菌和真菌的方法。 ⒊掌握有目的分离有益微生物的原理和技术。 二、原理 土壤是微生物栖居的大本营,各种各样的微生物都杂居在一起。当我们需要某种微生物时,即可通过提供适宜的营养条件,或添加只利于所需菌生长而抑制其它菌生长的抑制剂,有选择地将所需菌分离出来,这种技术即称为微生物的分离与纯化。稀释法常用于分离土壤、各种水域及基物表面的微生物。其原理是:先将土壤样品进行一系列倍比稀释,然后将几个适当浓度的稀释液均匀涂布于分离培养基表面。经培养后,土壤中的单个微生物细胞或孢子即可在培养基表面形成肉眼可见的菌落。再将所需菌落转入试管斜面,然后经平板划线再次取得单菌落后,即可得到所需菌种的纯菌株。因此,本方法的最大特点是可以对土壤样品进行活菌计数,同时,如果采用选择性培养基,可以分离到目的菌株。其......阅读全文
土壤的稀释分离、纯化微生物及无菌操作技术
一、目的和内容 目的:学习从土壤中分离微生物的方法,学习无菌操作技术. 内容: 1.用稀释法分离细菌、放线菌和霉菌. 2.用平板划线方法分离微生物. 3.学习斜面接种及穿刺接种等无菌操作技术. 二、材料和用具 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和普
土壤的稀释分离、纯化微生物及无菌操作技术
一、目的和内容 目的:学习从土壤中别离微生物的办法,学习无菌操作技术. 内容: 1.用稀释法别离细菌、放线菌和霉菌. 2.用平板划线办法别离微生物. 3.学习斜面接种及穿刺接种等无菌操作技术. 二、资料和用具 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus
土壤的稀释分离、纯化微生物及无菌操作技术
一、目的和内容目的:学习从土壤中分离微生物的方法,学习无菌操作技术.内容:1.用稀释法分离细菌、放线菌和霉菌.2.用平板划线方法分离微生物.3.学习斜面接种及穿刺接种等无菌操作技术. 二、材料和用具金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和普通变形菌(Proteus vulgar
微生物学技术:微生物的分离纯化及稀释平板菌落计数
实验原理稀释平板测数是根据微生物在高度稀释条件下固体培养基上所形成的单个菌落是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法,即一个菌落代表一个单细胞。计数时,首先将待测样品制成均匀的繁殖稀释液,尽量使样品中的微生物细胞分散开,使其成单个细胞存在,否则一个菌落就不只是代表一个细胞,再取一定稀释度、一
关于平板菌落计数法的样品的处理和稀释的介绍
1.平板菌落计数法的样品的处理和稀释— 操作方法:以无菌操作取检样25g(或25ml),放于225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨制成1:10的均匀稀释液。 固体检样在加入稀释液后,最好置灭菌均质器中以8000~10000r/
微生物固体培养实验——连续稀释法
按照培养基的成分来分培养基按其所含成分,可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类。按照培养基的物理状态分 培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。实验材料细菌试剂、试剂盒胰化蛋白胨酵母提取物氯化钠NaOH仪器、耗材培养瓶玻璃棒离心管摇床实验步骤1. 在3个无菌培养试
微生物固体培养实验——平板划线法
实验材料细菌仪器、耗材接种环培养皿实验步骤一、实验准备 1. 接种环 (1)灭菌,将接种环置于本生灯火焰中灼烧直至变红。 (2)冷却,将接种环触碰无菌琼脂平板的表面直至其不发出咝咝声。二、实验步骤1. 采用无菌操作技术,用接种环将接种物从平板的一侧开始划线。 2. 重新消毒接种环,从第一划线处
测定微生物数量实验_平板菌落计数法
实验方法原理平板菌落计数法是根据微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的现象进行的,也就是说一个菌落即代表一个单细胞。计数时,先将待测样品作一系列稀释,再取一定量的稀释菌液接种到培养皿中,使其均匀分布于平皿中的培养基内,经培养后,由单个细胞生长繁殖形成菌落,统计菌落数目,即可换算
抗药性突变株的分离实验——梯度平板法
实验方法原理生物的抗药性突变是 DNA 分子的某一特定位置的结构改变所致,与药物的存在无关,某种药物的存在只是作为分离某种抗药性菌株的一种手段,而不是作为引发突变的诱导物,因而在含有一定抑制生长药物浓度的平板上涂布大量的细胞群体,极个别抗性突变的细胞会在平板上长成菌落。将这些菌落挑取纯化,进一步进行
土壤中微生物分离纯化培养
一、实验原理从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。常用的分离、纯化方法:单细胞挑取法,稀释涂布平板法,稀释混合平板法,平板划线法。稀释涂布平板法步骤:倒平板-制备土壤污水稀释液-涂布-培养-挑菌落。平板划线法步骤:倒平板-标记培养基名称-划线。二、试剂与器材
土壤中微生物分离纯化培养
一、实验目的掌握倒平板的方法和几种常用的分离纯化微生物 的基本操作技术;了解不同的微生物菌落在斜面上、半固体培养基和液体培养基中的生长特征;进一步熟练和掌握微生物无菌操作技术;掌握微生物培养方法。 二、实验原理:从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。常用的
稀释法克隆培养
实验方法原理低密度接种细胞,培养至集落形成,细胞染色(用于克隆形成率和存活检测 ) 或用于筛选时分离细胞、然后扩增为细胞株。实验材料CHO细胞胰蛋白酶仪器、耗材培养基吸管培养皿血细胞计数器实验步骤1. 细胞用胰蛋白酶(胰蛋白酶,0.25 %,1 : 250或相当活性)消化制备单细胞悬液。消化不充分会
稀释法克隆培养
实验方法原理低密度接种细胞,培养至集落形成,细胞染色(用于克隆形成率和存活检测 ) 或用于筛选时分离细胞、然后扩增为细胞株。实验材料CHO细胞 胰蛋白酶
稀释法克隆培养
实验方法原理 低密度接种细胞,培养至集落形成,细胞染色(用于克隆形成率和存活检测 ) 或用于筛选时分离细胞、然后扩增为细胞株。 实验材料 CHO细胞
cems稀释法原理
完全抽取法是先将烟气从烟道抽取出来,然后送进分析仪器进行分析。一般采用较为成熟的分析法为红外吸收法,可实现多组分的同时测量。根据抽取过程的不同,又可分为冷抽取法和热抽取法,两种抽取方法均需把样气进行加热,然后经过滤器滤除烟尘。不同的是,热抽取法是直接把高温样气送入分析仪的光学腔内进行分析;冷抽取法则
平板菌落计数法
平板菌落计数法,是种统计物品含菌数的有效方法。方法如下:将待测样品经适当稀释之后,其中的微生物充分分散成单个细胞,取一定量的稀释样液涂布到平板上,经过培养,由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落,即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞;统计菌落数,根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数
平板菌落计数法
实验概要学习平板菌落计数的基本原理和方法。实验原理 平板菌落计数法是根据微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的现象进行的,也就是说一个菌落即代表一个单细胞。计数时,先将待测样品作一系列稀释,再取一定量的稀释菌液接种到培养皿中,使其均匀分布于平皿中的培养基内,经培养后,由单个细
倾注平板法原理
样品中的微生物细胞充分分散开,使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后,单个细胞及聚在一起的细胞可以生长繁殖,形成一个肉眼可见的菌落,统计菌落数目,即可用以评价样品中的微生物的数量。水中细菌菌落总数是指1ml水样在营养琼脂培养基中,37℃经24h培养后所生长的菌落数。用平板菌落计数测定水中细菌菌落总
倾注平板法的要点
测定牛乳、饮水和尿液等标本细菌数时常用此方法。将标本经适当稀释后,取一定量加入已灭菌的平皿内,倾入已溶化并冷却至45℃左右的定量培养基,混匀,待凝固后倒置、培养。根据培养基内的菌落数和稀释倍数,即可计算出标本的细菌数。
双向扩散法—平板法的相关信息介绍
平板法是鉴定抗原抗体的最基本、最常见的方法之一。平板法的基本步骤是:先在平板玻璃上倾注一均匀的琼脂薄层,凝固后在琼脂板上打孔,孔径一般为3mm,孔间距通常在3~5mm,孔的排列可呈梅花形、双排形或三角形等。在相对的孔中加入抗原或抗体,放置湿盒37~C18—24h后,琼脂中各自扩散的抗原和相对应的
土壤中微生物怎样分离纯化培养
1、土样采集:取10cm左右深层土壤10g备用。 2、制备土壤稀释液:称取土壤1g,放入有99mL无菌水的三角瓶中,振荡均匀,即为稀释10-2的土壤悬液。然后进行十倍梯度稀释,依次制备 10-3、10-4、10-5、10-6 、10-7 稀释度的土壤稀释液。
微生物检查中的MPN-法和CFU-法
MPN (most probable number)法即最近似数法,也称为最大可能数法,是食品检验中常用的方法.其生化反应基础为乳糖发酵,革兰阴性菌的无芽胞杆菌,如大肠菌群,一般在 37℃、24h 发酵乳糖、产酸产气.利用此原理,将供试液加到发酵培养基中,37℃培养24h.若不产气,则报告控制菌
微生物检查中的MPN-法和CFU-法
MPN (most probable number)法即最近似数法,也称为最大可能数法,是食品检验中常用的方法.其生化反应基础为乳糖发酵,革兰阴性菌的无芽胞杆菌,如大肠菌群,一般在 37℃、24h 发酵乳糖、产酸产气.利用此原理,将供试液加到发酵培养基中,37℃培养24h.若不产气,则报
涂布平板法flash演示
涂布平板法是平板计数的一种重要方法,不会影响某些热敏感菌和严格好氧菌的生长,因此在微生物学研究中也是很常用的纯种分离方法。 (1)样品稀释液的制备,按照样品需要稀释成相应浓度的菌液。 (2)先将培养基熔化后趁热倒入无菌平板中,待凝固后编号,然后用无菌吸管吸取0.1ml菌液对号接种在不同稀释度编号的琼
标准平板菌落计数法
检测食品中微生物数量,一般采用标准平板菌落计数法(SPC)对食品中的活的微生物进行菌落形成单位(CFU)数量的检测,即将部分样品取出混合均匀,用适当的稀释液进行梯度稀释,取一定量的稀释液涂布或倾注琼脂平板,在合适的温度下培养一定的时间,然后通过肉眼观察或电子计数器对所有可见菌落进行计数。虽然日常
平板划线分离法是连续划线还是分区划线?
平板划线分离法包括连续划线和分区划线。平板划线分离法:在被检标本中,常混杂有多种细菌,平板划线分离法可使这多种细菌在培养基表面分散生长,各自形成菌落,以便根据菌落的形态及特征,挑选单个菌落进行纯培养。常用的平板划线分离法有以下两种:(1)连续划线分离法:此法主要用于杂菌不多的标本。用接种环取标本少许
病毒的滴定实验——稀释法
实验步骤1. 以维持液(0.5% 水解乳蛋白Hank's 液)将病毒作连续10 倍稀释(每一稀释度换一新吸管)。2. 如选择滴定的稀释度为l0-6~10-8,则于试管架上排列8 支试管。l0-1~10-5共5 支管,每管如入1.8 毫升维持液;l0-6~10-8共3 管,每支加入4.5
有限稀释法的基本介绍
有限稀释法是一种常用的克隆方法,是指将需要再克隆的细胞株自培养孔内吸出并作细胞计数,计出1mL的细胞数。常用来筛选融合的动物细胞。 用HT培养液稀释, 使细胞浓度为50~60个/mL,于96孔培养板中每孔加0.1mL(5.5个细胞/孔)。接种2排,剩余细胞悬液用HT培养液作倍比稀释,再接种2排
平板菌落计数法的介绍
菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物,它是由数以万计相同的细菌集合而成。当样品被稀释到一定程度,与培养基混合,在一定培养条件下,每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。 菌落总数就是指在一定条件下(如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等)每克
平板菌落计数法的说明
1.操作方法:以无菌操作取检样25g(或25ml),放于225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨制成1:10的均匀稀释液。固体检样在加入稀释液后,最好置灭菌均质器中以8000~10000r/min的速度处理1min,制成1:10的均匀