全血基因组提取操作步骤
操作步骤((200ul全血))* 第一次使用前请先在15ml漂洗液WB中加入60ml无水乙醇! 1. 取200ul新鲜、冷冻或加入各种抗凝剂的血液,放入1.5ml离心管。对如果全血起始量小于200μl,则用缓冲液BB补足到200μl。如果起始量介于200μl-300μl之间,则后续操作需要按照比例增加试剂用量。如果起始量介于300μl-1毫升之间,则需要先进行红细胞裂解操作(见本说明书后附录)。2. 加入200μl 结合液CB,立刻剧烈颠倒轻摇,充分混匀,再加入20μl蛋白酶K (20mg/ml)溶液,颠倒轻摇充分混匀,70℃放置10分钟,溶液应变清亮(但颜色偏黑色)。3. 加入100μl 异丙醇,剧烈颠倒轻摇,充分混匀,此时可能会出现絮状沉淀。上述各操作步骤中适当力度充分混匀非常重要,混匀不充分严重降低产量,必要时如样品粘稠不易混匀时可以涡旋振荡15秒混匀,但不可用手剧烈振荡,以免剪切DNA。4. 将上一步所得溶液和絮状沉淀都......阅读全文
流式细胞仪检测全血的人淋巴细胞
基本方案材 料(打 V 项 目 见 附 录 1)全血,通 常 用 E D T A 抗凝P B S ,有 或 无 0.1% (m /V ) 叠氮钠,过滤除菌单 克 隆 抗 体(标记的,未标记的或生物素化的),通过滴定确定最佳工作浓度间 标 二 抗(仅用于未标记的一抗)F T T C 标记的链霉亲和素或
正常细胞常规核型的标本制备实验_微量全血培养
正常细胞常规核型的标本制备可应用于:(1)进行核型分析;(2)与肿瘤核型进行对比研究。实验方法原理采用微量全血培养人体外周血中淋巴细胞,在淋巴母细胞分裂高峰时加入秋水仙素,破坏细胞纺锤体的形成,使细胞停止在分裂中期。然后收集细胞,低渗处理,使细胞胀大,染色体伸展。接着进行固定并除去中期分裂相中残存的
什么叫新鲜全血?给病人输“热血”有好处吗?
(1)新鲜全血的新鲜度难下定义,目前尚缺乏公认的标准;(2)输血目的不同,新鲜全血的含义就不一样:输血目的是为了补充红细胞,保存期内的全血可视为新鲜血;补充粒细胞,8小时之内的血视为新鲜血; 补充血小板,12小时之内的血视为新鲜血;补充凝血因子24小时之内的血视为新鲜血;(3)即使是“热血”,除红细
流式细胞仪检测全血的人淋巴细胞
实验步骤基本方案材 料(打 V 项 目 见 附 录 1)全血,通 常 用 E D T A 抗凝P B S ,有 或 无 0.1% (m /V ) 叠氮钠,过滤除菌单 克 隆 抗 体(标记的,未标记的或生物素化的),通过滴定确定最佳工作浓度间 标 二 抗(仅用于未标记的一抗)F T T C 标记的链霉
[实验步骤]-由全血直接分选-CD3+-T-细胞
Fab-TACS® Gravity column 细胞分选重力柱应用实例Fab-TACS 技术简介Fabs-TACS 无痕亲和细胞分选技术(traceless affinity cell selection, Fab-TACS),以 Fab 片段为基础,基于 IBA Lifesciences 独家的
从全血里纯化单个核细胞(人、大鼠和小鼠)
所需仪器:XL03RH型控温离心机(低速冷冻离心机,可使用24*15ml离心管,水平转子);抽血注射器(大小与抽血体积相一致)试剂:Optiprep;Tricine-缓冲盐溶液(TBS,仅小鼠血)0.85%(质量浓度)NaCl,10mmol/L Tricine-NaOH(ph = 7.4)。 方法:
全血血细胞沉降率测定SOP文件(魏氏法)
1. 实验原理 离体抗凝置于特制刻度测定管(魏氏法血沉管)内,垂直立于室温中,一定时间时观察上层血浆高度的毫米数值报告之。 2. 标本采集 2.1 标本采集前病人准备:无需特殊准备。 2.2 标本种类:静脉抗凝血(109mmol/L枸橼酸钠溶液抗凝)。 2.3 标本要求:标本采集
生化分析仪检测样本的选择血清or全血?
什么是生化分析仪生化分析仪主要用来测定人体血清中的各种化学成分,测量肝功,肾功,心肌酶,血糖,血脂,离子等,是医院的必检项目。生化分析仪的具体检测项目肝功7项:谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(T.BIL)、直接胆红素(D.BIL)、总蛋白(TP)、白蛋白(
为什么现在不提倡输全血,而提倡成分输血?
1. 全血中除红细胞外,其余成分浓度低,有的已丧失功能或活性,起不到治疗作用; 2. 全血中主要有效成分是红细胞,其疗效与红细胞相似,而不良反应却比红细胞多; 3. 成分输血有很多优点,最主要的优点是浓度高,针对性强,疗效好,不良反应少。
全血乳酸测定的临床意义及注意事项
临床意义 检查结果为乳酸过量 休克状况的评估 血乳酸升高常见于循环性休克的患者,循环性休克(严重低血压)可由血容量的减少(失血或脱水),心输出量减少或脓毒血症(脓毒性休克)性血流紊乱等引起。 冠状动脉分流术 主动脉内球囊起博器植入术 主动脉内球囊起博器植入术(IABP)有时作为在心
全血乳酸测定的正常值及临床意义
正常值 全血乳酸0.5―1.7mmol/L(5―15mg/dl)。 临床意义 异常结果 检查结果为乳酸过量 休克状况的评估 血乳酸升高常见于循环性休克的患者,循环性休克(严重低血压)可由血容量的减少(失血或脱水),心输出量减少或脓毒血症(脓毒性休克)性血流紊乱等引起。 冠状动脉分流
全血乳酸测定的注意事项及检查过程
注意事项 检查前禁忌:检查前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。体检前一天的晚八时以后,应禁食。 检查时要求:抽血时应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩、增加采血的困难。血乳酸测定时取样时间非常重要,安静值应在早晨起床前安静时采样;运动后血乳酸的测
脑癌细胞系全基因组测序首次完成
其所揭示的新分子靶标将有助于开发出更具效力和更少毒性的药物 美国加州大学洛杉矶分校琼森综合癌症研究中心的科学家在1月29日的《公共科学图书馆·遗传学》(PLoS Genetics)专刊上发表论文指出,他们首次完成了脑癌细胞系全基因组测序,这也是截至目前对单个癌症细胞系所做的最为彻底的测序分析。
我国科学家率先完成枣全基因组测序
日前,河北农业大学教授刘孟军团队与深圳华大基因科技服务有限公司合作,在世界上率先完成枣树的高质量全基因组测序,使枣树成为世界鼠李科植物和我国干果树种中第一个完成基因组测序的物种。《自然—通讯》10月29日在线发表了该成果。 刘孟军说,其团队自2010年启动枣基因组计划,从枣基因组大小
科学家绘制褐牙鲆全基因组精细图谱
近日,中国水产研究院黄海水产研究所研究员陈松林领导的研究组与上海海洋大学、德国维尔茨堡大学、葡萄牙阿尔加夫大学、深圳华大基因研究院等单位合作,破译了褐牙鲆全基因组序列,通过与半滑舌鳎全基因组比较分析,初步揭示了比目鱼变态发育的分子机制。该研究成果发表于《自然—遗传学》。 通过与半滑舌鳎全基因组
益生乳酸菌全基因组序列测定完成
内蒙古农业大学正式公布,益生乳酸菌的全基因组序列测定分析全部完成,这是我国第一个完成的乳酸菌基因全序列测定。 由内蒙古农业大学“乳品生物技术与工程”教育部重点实验室主持进行的益生乳酸菌的全基因组序列测定Lb.casei Zhang科技项目是经过6年分离、筛选,并进行系统研究开发的具有完全自主知识产
香港中大破解鼻咽癌全基因组图谱
香港中文大学7日宣布,该校医学院研究人员成功破解鼻咽癌的全基因组图谱,这一突破性发现有助评估鼻咽癌病人的预后情况,并向鼻咽癌的个人化治疗迈出一大步。 鼻咽癌是华南地区常见的癌症,也是一种极具侵略性的头颈癌。据介绍,鼻咽癌大多与感染EB病毒相关。由于缺乏早期病征,60%至70%患者于确诊时已届晚
谢晓亮:单细胞全基因组测序曙光初现
谢晓亮 12月21日出版的美国《科学》杂志发表了题为《单细胞全基因组测序探索精子重组规律和遗传缺陷》的论文。同时,该期《科学》杂志也将单细胞全基因测序列为2013年六大值得关注的科学领域之一。 该论文由美国科学院院士、哈佛大学教授谢晓亮课题组与北京大学生物动态光学成像中心(
科学家绘制褐牙鲆全基因组精细图谱
近日,中国水产研究院黄海水产研究所研究员陈松林领导的研究组与上海海洋大学、德国维尔茨堡大学、葡萄牙阿尔加夫大学、深圳华大基因研究院等单位合作,破译了褐牙鲆全基因组序列,通过与半滑舌鳎全基因组比较分析,初步揭示了比目鱼变态发育的分子机制。该研究成果发表于《自然—遗传学》。 通过与半滑舌鳎全基因组
我国首次完成寨卡病毒全基因组序列测定
2月22日,记者从军事医学科学院获悉,该院与广州市第八人民医院、出入境检验检疫系统相关单位密切合作,在获得从委内瑞拉归国患者临床标本后,采用高通量测序技术,于2月21日直接从尿液中获得病毒全基因组序列。 寨卡病毒属黄病毒科,是一种主要由伊蚊传播的虫媒病毒。1947年首次在乌干达寨卡丛林中的恒河
首个中国地区古人全基因组数据被测序
近日,《当代生物学》发表了首次针对中国地区古人类的全基因组研究成果。该项目由中国科学院古脊椎动物与古人类研究所和德国马普进化人类研究所等团队合作完成,研究分析了距今4万年前出土于北京房山田园洞的一具男性个体基因组,发现东亚早期人群组成十分复杂。 虽然欧洲和西伯利亚地区都有古人类样本基因组被测序
云南怒江草果全基因组精细图谱绘制成功
从20世纪70年代开始,云南省怒江州就开始种植草果,到2020年,种植面积已达111万亩,不仅是全国草果的核心产区,也是当地群众脱贫致富的重要经济作物。 为了加快提高草果遗传改良效率,培育高产、抗病、优质、安全新品种,对从源头创新保障草果产业健康可持续发展,2019年9月,怒江州联合华南农业
黄瓜变异组研究奠定全基因组设计育种基础
中国农业科学院蔬菜花卉研究所领导的国际黄瓜变异组研究团队,对115个黄瓜品系进行深度重测序,构建了包含360多万个位点的全基因组遗传变异图谱,为全面了解黄瓜进化及多样性提供了新思路,并为全基因组设计育种打下了基础。相关成果10月20日在线发表于《自然·遗传学》杂志。 据国际黄瓜基因组计划首
玉米全基因组选择育种973项目启动
2月18日,由中国农业科学院作物科学研究所牵头的973项目“玉米产量和品质性状全基因组选择育种的基础研究”启动会在京召开。科技部基础司副处长钱万强、农业部科教司巡视员石燕泉、中国农科院副院长刘旭、中国农科院科技局局长梅旭荣等领导出席了会议。中国农科院作科所所长万建民致欢迎辞,对各级领导及各位专家
《PLoS生物学》:老鼠全基因组测序图公布
最新一期的开放存取的《公共科学图书馆·生物学》(PLoS Biology)杂志上,美国、英国和瑞典的研究人员公布了老鼠的全基因组测序图。老鼠成为继人类之后第二个完成全基因组测序的哺乳动物。 在对人类和老鼠的基因测序图进行综合性比较后,研究人员发现两者之间的遗传差异要比人们预想的大得多。老鼠
我国首获濒危物种白头叶猴全基因组序列
广西林业局11日提供的信息显示,中国首次获得濒危物种白头叶猴全基因组序列,揭示了白头叶猴能够在富含矿物离子的高碱性喀斯特山地长久生存的基因组遗传特征秘密。 白头叶猴是中国特有的生物物种,其体毛以黑色为主,与黑叶猴不同的是头部高耸着一撮直立的白毛。白头叶猴仅分布在广西崇左左江和明江间不足200平
中国科学家PNAS发布辣椒全基因组测序
辣椒(Capsicum annuum)是一种重要的经济作物,它在满足人们口腹之欲的同时,还是世界上广为使用的药物。辣椒富含维生素和营养,可以用来生产许多药物、天然染色剂和化妆品。 为了更好的理解辣椒属的进化、驯化和特化,四川农业大学玉米研究所、遵义农科院辣椒研究所、华南农业大学园艺学院
Science新闻:英国公布大型全基因组测序计划
基因分析技术在快速发展,昨日英国首相宣布了一项大型计划,将对患有癌症及罕见疾病的十万英国人进行全基因组测序。现在许多国家都在为治疗疾病而努力解码国民的DNA,而英国这一新项目的不同之处在于,其测序的是全基因组而非基因组个别区域。 英国首相David Cameron在声明中称,英国国民医
定位全基因组范围DNA修复的新方法
北卡罗来纳大学的研究人员近日开发出一种全基因组范围的测序分析,可定位DNA切除修复。这种被称为切除修复测序(XR-seq)的方法发表在新一期的《Genes & Development》杂志上。 这项研究的通讯作者是北卡罗来纳大学医学院生物化学及生物物理系的Aziz Sancar以及芝加哥大学人
遗传发育所等解析盐芥全基因组序列
盐芥是十字花科盐芥属的一种盐生植物,与双子叶植物研究中所常用的模式植物拟南芥亲缘关系较近。盐芥具有作为模式植物的一系列良好特征,如个体较小、生活周期短、自花授粉、种子量大、基因组较小,而且易于转化。最重要的是,盐芥具有对高盐、干旱和低温等非生物胁迫极高的耐受能力,这使其成为研究植物耐受非生物胁迫