植物组织制备基因组DNA实验

实验方法原理 加入一定量的异丙醇或乙醇,基因组的大分子DNA即沉淀形成纤维状絮团飘浮其中, 可用玻棒将其取出,而小分子DNA则只形成颗粒状沉淀附于壁上及底部, 从而达到提取的目的。实验材料 植物组织试剂、试剂盒 抽提缓冲液十二烷基肌氨酸钠TE异丙醇溴化乙锭氯化铯仪器、耗材 离心机实验步骤 收取10~50 g 新鲜的植物组织。2. 植物组织用冷的无菌水洗涤、吸干,放人液氮中冻结,用研钵和研杵研成细粉。3. 将冻结的细粉放入250 ml 的离心瓶中,立即加入抽提缓冲液约每克植物5~10 ml,轻轻搅拌混匀。4. 加入十二烷基肌氨酸钠使终浓度达1%,于温育1~2 h。5. 用JA-14转子4℃,5 500 g 离心10min 保留上清,必要时重复此歩骤以除去残渣。6. 加人0.6体积异丙醇,混合,如果看不见沉淀,于-20℃......阅读全文

质粒DNA的大量制备实验

实验方法原理 大量碱裂解方法不仅相当快捷可靠,而且可获得相当纯净的粗制DNA。煮沸法的大量制备也简单易行,但得到的DNA比较粗制。高纯度的质粒DNA可通过氯化铯/溴化乙锭平衡离心法或层析法进一步纯化粗制DNA得到。实验材料 培养基菌株试剂、试剂盒 EDTASDS乙醇乙酸钾异丙醇仪器、耗材 离心管实验

植物组织培养法制备阿魏酸

采用植物组织培养法是获得阿魏酸的一条重要途径。一些研究表明,对某些植物组织培养能使之产生较高产量的阿魏酸衍生物。如对糖甜菜、玉米进行细胞悬浮培养能获得水溶性的阿魏酸葡萄糖酯、阿魏酸蔗糖酯等,含量可高达20.0 μmol/g愈伤组织(干重)。直接提取物中,阿魏酸的含量比较低,需要进一步的纯化。

植物组织水势的测定实验

实验方法原理水势表示水分的化学势。象电流是由高电位向低电位处移动一样,水从水势高处流向水势低处。植物体细胞之间以及植物体有环境间的水分移动方向都由水势差决定。当植物细胞或组织放在溶液中时,如果植物细胞的水势小于溶液的渗透势(溶质势),则组织吸水而使溶液浓度变大,反之,则植物细胞内水分外流而使溶液浓度

植物成熟组织观察实验(四)

四、输导组织 1.  木质部中的输导组织取南瓜茎纵切片置低倍镜下观察,切片中央两侧有一些细胞壁被染成红色具有各种加厚花纹的成中管状细胞,它们是多种类型的导管(组织)。每个导管分子,均以端壁形成的穿孔相互连接,上下贯通。仔细观察,臂径较小,其壁具有螺旋形加厚并木质化的为螺纹导管,管径较大,具有网状加厚

植物组织水势的测定实验

实验方法原理 水势表示水分的化学势。象电流是由高电位向低电位处移动一样,水从水势高处流向水势低处。植物体细胞之间以及植物体有环境间的水分移动方向都由水势差决定。当植物细胞或组织放在溶液中时,如果植物细胞的水势小于溶液的渗透势(溶质势),则组织吸水而使溶液浓度变大,反之,则植物细胞内水分外流而使溶液浓

植物成熟组织观察实验(二)

二、薄壁组织1.  吸收组织取萝卜根尖制作压片,置显微镜下观察根毛的形态和结构特点。2.  贮藏组织取马铃薯块茎一小块,用双面刀片进行徒手切片,选取较薄的切片放在载玻片上,加1滴蒸馏水后盖上盖玻片置显微镜下观察淀粉贮藏细胞的结构特点。3.  同化组织取夹竹桃叶片做徒手横切片,制成临时切片标本,置显微

植物成熟组织观察实验(一)

实验方法原理 1.  掌握植物各种成熟组织的形态、位置、结构及功能。2.  了解不同组织间的相互联系,维管束的结构与类型,植物组织离析法。实验材料 番薯叶片楝树枝条萝卜根尖马铃薯块茎横切片南瓜茎纵横切片椴树茎切片梨果实玉米茎横切片试剂、试剂盒 蒸馏水番红间苯三酚盐酸仪器、耗材 显微镜载玻片盖玻片镊子

植物组织水势的测定实验

实验方法原理水势表示水分的化学势。象电流是由高电位向低电位处移动一样,水从水势高处流向水势低处。植物体细胞之间以及植物体有环境间的水分移动方向都由水势差决定。当植物细胞或组织放在溶液中时,如果植物细胞的水势小于溶液的渗透势(溶质势),则组织吸水而使溶液浓度变大,反之,则植物细胞内水分外流而使溶液浓度

植物成熟组织观察实验(三)

三、机械组织1.  厚角组织取南瓜(或薄荷、苹果、椴树)茎横切片,先在低倍镜下观察,找到棱角处,再换高倍镜由外而内观察,最外一层排列整齐的扁平细胞为表皮,其上具多细胞表皮毛,紧靠表皮内方的皮层中,有几层染成绿色的细胞,其细胞壁在角隅处加厚、是生活细胞,有时还可看到细胞内的叶绿体,为厚角组织。2.  

植物成熟组织观察实验(五)

五、维管束结构和类型1.  双子叶植物的的无限维管束(开放维管束)取南瓜(或其他双于叶植物)茎横切片对光肉眼观察,可见南瓜茎切片中央为星状的髓腔,围绕髓腔的薄壁组织内有五个较大和五个较小的维管束彼此相间排列。在低倍镜下选一个大而清晰的维管束观察,可见维管束由外(靠茎外方)到内分为外韧皮部、形成层、木

酵母基因组DNA的玻珠制备法

实验概要本实验利用玻珠制备法制备了酵母基因组DNA。主要试剂无菌水,裂解缓冲液,5mol/L NaCl,苯酚,氯仿:已戊醇(24:1),乙醇,TE缓冲液,EDTA-Sark,蛋白酶K,5mol/L醋酸铵主要设备摇床,玻璃离心管,台式离心机,玻珠,振荡器,P-1000移液器,1.5ml离心管实验步骤1

血基因组DNA提取实验

            实验方法原理 采用特殊的细胞裂解和蛋白去除液(包括蛋白酶K 裂解)从抗凝全血中得到基因组DNA。 实验材料 抗凝全血

细菌基因组DNA提取实验

细菌基因组DNA提取可应用于:(1)获得细菌基因组DNA;(2)作为PCR模板;(3)用于测序、遗传信息分析等。实验方法原理本试剂盒采用独特的细胞裂解和相分离技术,结合DNA 制备膜选择性地吸附DNA 的方法达到纯化基因组DNA 的目的。适合于从1.0x109 细菌中获得多至20 ug 的基因组DN

细菌基因组DNA提取实验

            实验方法原理 本试剂盒采用独特的细胞裂解和相分离技术,结合DNA 制备膜选择性地吸附DNA 的方法达到纯化基因组DNA 的目的。适合于从1.0x109 细菌中获得多至20 ug 的基因组DNA。用于PCR、Southern 印迹分析、RAPD

细菌基因组DNA提取实验

实验方法原理 本试剂盒采用独特的细胞裂解和相分离技术,结合DNA 制备膜选择性地吸附DNA 的方法达到纯化基因组DNA 的目的。适合于从1.0×109 细菌中获得多至20 μg 的基因组DNA。用于PCR、Southern 印迹分析、RAPD、RFLD 等分子生物学实验。实验材料 细菌培养物

血基因组DNA提取实验

实验方法原理 本试剂盒采用特殊的细胞裂解和蛋白去除液(包括蛋白酶K 裂解)从抗凝全血中得到基因组DNA。适用于从冻全血、血浆、血清、骨髓、其他体液、淋巴细胞、培养细胞、病毒和线粒体中提取DNA。实验材料 抗凝全血试剂、试剂盒 血基因组DNA 试剂盒仪器、耗材 96孔深孔板96圆孔板96孔DNA制备板

纯化DNA实验_基因组DNA的快速纯化

试剂、试剂盒尾部缓冲液蛋白酶 K仪器、耗材离心管玻璃棒实验步骤第 1 天1. 大约 1.5 cm 长的尾部活检样品放在一个 1.5 ml 盛有 0.7 ml 尾部缓冲液的小离心管中,加 35 ul 10 mg/ml 蛋白酶 K,在 55℃ 振摇温育过夜。尾部缓冲液(配 25 ml)50 mmol/L

植物DNA提取实验——机械法

植物DNA提取实验用于:(1)获得较纯的真核细胞基因组DNA;(2)后续PCR分析,RFLP分析,基因文库的构建,基因探测等的研究。实验方法原理这是一种快速简便提取植物总DNA的方法。先将新鲜的叶片在液氮中研磨,以机械力破碎细胞壁,然后加入十六烷三甲基溴化铵分离缓冲液,使细胞膜破裂。同时将核酸与植物

使用离心机提取植物基因组DNA

植物基因组DNA提取使用什么样的离心机做?具体步骤怎么样?植物组织提取基因组DNA 一、材料 幼嫩叶子。 二、设备 移液器,冷冻高速离心机,台式高速离心机,水浴锅,陶瓷研钵,50ml离心管(有盖)及5ml和1.5ml离心管,弯成钩状的小玻棒。(这时选择设备的时候注意选择那种通用性强的,可以一机配多种

植物基因组总DNA的分离———SDS法

实验方法原理SDS(十二烷基磺酸钠)是一种强去污剂,可使细胞膜及核膜破裂,因此被用来分离DNA。该分离过程的第一步是用热的去污剂(SDS)进行抽提,然后将抽提物置于0℃并加入高摩尔浓度的乙酸钾,离心去除不溶物,以去除蛋白和多糖类杂质。实验材料植物新鲜叶片试剂、试剂盒液氮提取缓冲液(用前加入)20%S

植物基因组总DNA的分离———SDS法

实验方法原理 SDS(十二烷基磺酸钠)是一种强去污剂,可使细胞膜及核膜破裂,因此被用来分离DNA。该分离过程的第一步是用热的去污剂(SDS)进行抽提,然后将抽提物置于0℃并加入高摩尔浓度的乙酸钾,离心去除不溶物,以去除蛋白和多糖类杂质。实验材料 植物新鲜叶片试剂、试剂盒 液氮提取缓冲液(用前加入)2

用于基因组文库的真核DNA的部分酶切(制备反应)实验

通过限制酶部分酶切可将高分子质量 DNA 片段化。在预实验中,建立了适宜的部分酶切条件。对于将用于克隆的基因组 DNA 来说,预实验的结果确定了对其进行制备的三个大规模反应的条件,这将在本方案叙述。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理通过限制酶部分酶切可将高分子质量 DNA

用于基因组文库的真核DNA的部分酶切(制备反应)实验

            实验方法原理 通过限制酶部分酶切可将高分子质量 DNA 片段化。在预实验中,建立了适宜的部分酶切条件。对于将用于克隆的基因组 DNA 来说,预实验的结果确定了对其进行制备的三个大规模反应的条件,这将在本方案叙述。

用于基因组文库的真核DNA的部分酶切(制备反应)实验

实验方法原理 通过限制酶部分酶切可将高分子质量 DNA 片段化。在预实验中,建立了适宜的部分酶切条件。对于将用于克隆的基因组 DNA 来说,预实验的结果确定了对其进行制备的三个大规模反应的条件,这将在本方案叙述。实验材料 限制性内切核酸酶基因组 DNAλ 噬菌体 DNA质粒寡聚体试剂、试剂盒 乙酸铵

包被组织培养板制备实验

基本方案             实验方法原理 实验材料 刀豆蛋白A

包被组织培养板制备实验

实验材料刀豆蛋白A试剂、试剂盒磷酸缓冲液(PBS)仪器、耗材6 孔 35 mm 组织培养板无菌塑料袋(用于保存包被板)实验步骤1. 将 12 mg 刀豆蛋白 A 加入 120 ml 无菌的 PBS 中,至终浓度为 100 μg/ml。2. 在组织培养板的每孔中加入 1 ml PBS/刀豆蛋白 A 混

包被组织培养板制备实验

基本方案             实验方法原理 实验材料 刀豆蛋白A

实验动物组织标本的制备实验_解剖法

通常选用家兔、豚鼠、大白鼠或小白鼠等动物,禁食24 小时。击头致昏,以避免麻醉或失血对胃肠道机能的影响。立即打开腹腔,取出所需的胃、肠、胆囊等。去除附着的系膜或脂肪等组织。迅速放入充氧(或95%O2+5%CO2 )保温(37 ℃)的营养液中,并以注射器用营养液将管腔内的食物残渣清洗干净。实验材料家兔

质粒DNA的小量制备实验——煮沸小量制备法

实验方法原理当菌体在NaOH和 SDS溶液中裂解时,蛋白质与DNA发生变性,当加入中和液后,质粒DNA分子能够迅速复性,呈溶解状态,离心时留在上清中;蛋白质与染色体DNA不变性而呈絮状,离心时可沉淀下来。推荐采用本方案从1-24个菌落培养液中制备少量的质粒DNA,尽管该方案十分快捷,但制备的DNA的

酵母菌DNA制备实验1

实验材料酵母试剂、试剂盒YPD破菌缓冲液酚氯仿异戊醇LB仪器、耗材玻璃珠试管摇床培养箱离心机实验步骤1.  注盛于一个13 mm×100 mm 无菌玻璃试管中的2 ml 培养基接种含有带目的基因的质粒的酵母单菌落,在转动或摇动培养箱中30℃过夜培养到静止期。 2.  将1.5 ml 的过夜培养物转移