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用藻酸盐微珠培养软骨细胞

实验方法原理 藻酸盐微珠培养基于在软骨细胞藻酸盐悬液中氯化钙的胶凝作用。试剂、试剂盒 软骨切除培养液生长培养液分离软骨细胞的酶液胰蛋白酶和EDTA混合液藻酸钠溶液胶凝液溶解液仪器、耗材 无菌磁铁实验步骤 切除软骨1. 自膝关节、肩关节和髋关节取软骨。由于胚胎或幼年供体的软骨比成年供体获得较多细胞，较长时间后才衰老，故胚胎或幼年供体的软骨优于成年供体。生后一个月的 Fauve de Bourgogne 兔或新西兰兔较理想。然而，成年人手术切除的髋关节也是软骨细胞的合适来源。2. 切除软骨之前，用 CDM （软骨切除培养液（cartilage dissection medium，CDM）：Ham’s F12 培养液（In-vitrogen），添加 20 μg/ml 蔡替米星（Sigma）、10 μg/ml 万古霉素（Sigma）和30 μg/ml 头孢他啶（Sigma）。CDM 用于切开关节和切取软骨，也......阅读全文