正常关节软骨细胞的短期培养
实验材料:1. 软骨细胞来源:动物材料可选用未成年兔的膝关节、鸡胚胸软骨。人体材料可取自引产胎儿或成年人手术切除的软骨标本;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 消化液:0.2%胶原酶Ⅱ溶液,用PBS液配制,过滤除菌;4. 培养液:RPMI1640或Ham F12、DMEM培养基,一般在培养液中加20%—30%的小牛血清;5. 筛网:200目铜网; 实验方法:1. 用手术刀片从关节表面削下软骨组织片,收集在PBS中。反复清洗除去软骨片表面的血液以及可能误带的滑膜组织。新鲜软骨呈乳白浅蓝色、半透明状,略具弹性;2. &......阅读全文
正常关节软骨细胞的短期培养
实验材料:1. 软骨细胞来源:动物材料可选用未成年兔的膝关节、鸡胚胸软骨。人体材料可取自引产胎儿或成年人手术切除的软骨标本;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 消化液:0.2%胶原酶Ⅱ溶液,用PBS
正常关节软骨细胞的短期培养
实验材料:1. 软骨细胞来源:动物材料可选用未成年兔的膝关节、鸡胚胸软骨。人体材料可取自引产胎儿或成年人手术切除的软骨标本;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 消化液:0.2%胶原酶Ⅱ溶液,用液配制,过滤除菌;4. 培养液
正常人关节软骨细胞的长期培养
实验材料:1. 软骨细胞来源:20—24周自然流产胎儿的股骨和胫骨;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 消化液Ⅰ:2mg/ml胰蛋白酶和2mg/ml胶原酶混合消化液,用PBS液配制;4. 消化
正常人关节软骨细胞的长期培养
实验材料:1. 软骨细胞来源:20—24周自然流产胎儿的股骨和胫骨;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1&time,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 消化液Ⅰ:2mg/ml胰蛋白酶和2mg/ml胶原酶混合消化液,用液配制;4. 消化液Ⅱ:0.5mg/ml胶原酶
人关节软骨细胞培养操作
人关节软骨细胞培养操作:1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,
从正常人和骨关节炎患者的关节软骨中分离软骨祖细胞
从人关节软骨中分离软骨祖细胞 从人滑膜中分离软骨祖细胞、培养、分化 人软骨祖细胞的分化 实验方法原理 实
从正常人和骨关节炎患者的关节软骨中分离软骨祖细胞...
从正常人和骨关节炎患者的关节软骨中分离软骨祖细胞实验实验方法原理 实验材料 人关节软骨试剂、试剂盒 胰蛋白酶 EDTA:胰蛋白酶(0.05%)和EDTA(0.53 mmol L)PBSA配制胎牛血清牛血清白蛋白(BSA)10μg ml和1 mg ml PBSC配制血清纤连蛋白 10μg m1 PBS
从正常人和骨关节炎患者关节软骨分离软骨祖细胞实验1
从人关节软骨中分离软骨祖细胞实验材料人关节软骨试剂、试剂盒胰蛋白酶 EDTA:胰蛋白酶(0.05%)和EDTA(0.53 mmol L)PBSA配制胎牛血清牛血清白蛋白(BSA)10μg ml和1 mg ml PBSC配制血清纤连蛋白 10μg m1 PBSC配制仪器、耗材尼龙膜40μm筛孔(“细胞
从正常人和骨关节炎患者关节软骨分离软骨祖细胞实验3
人软骨祖细胞的分化实验材料人软骨试剂、试剂盒灭菌分化培养基PBSA胰蛋白酶 EDTA:胰蛋白酶(0.05%)和EDTA(0.53mmol L)PBSA配制仪器、耗材离心管 15ml圆锥底的离心管(50 ml)血细胞计数板微量离心器实验步骤(a)从培养瓶中吸出生长培养基弃之。(b)PBSA润洗后弃去洗
从正常人和骨关节炎患者关节软骨分离软骨祖细胞实验2
从人滑膜中分离软骨祖细胞、培养、分化实验材料骨关节炎患者全关节置换得到的胫骨滑膜;需要正常组织时使用新鲜的尸体组织试剂、试剂盒DMEM(包含4.5 g L葡萄糖和4 mmol L L-谷氨酰胺)黏附培养基:含100μg ml庆大霉素的DMEM克隆生长培养基:DMEM10% FBS和100μg ml庆
从人关节软骨中分离软骨祖细胞
试剂和材料:1. 骨关节炎患者行膝盖关节半切开手术时未累及的部分;2. 链霉蛋白酶消化培养基:DMEM/F12(1:1)、5%的FBS、抗坏血酸 50μg/ml、葡萄糖 1mg/ml、庆大霉素(50mg/ml),0.2%(终浓度100μg/ml)、链霉蛋白酶 70U/ml、HEPES 10mmol/
从人关节软骨中分离软骨祖细胞
试剂和材料: 1.骨关节炎患者行膝盖关节半切开手术时未累及的部分; 2.链霉蛋白酶消化培养基:DMEM/F12(1:1)、5%的F、抗坏血酸 50μg/ml、葡萄糖 1mg/ml、庆大霉素(50mg/ml),0.2%(终浓度100μg/ml)、链霉蛋白酶 70U/ml、HEPES 10mmo
正常兔骨髓间充质前体细胞的体外成软骨培养
正常兔骨髓间充质前体细胞的体外成软骨培养 实验材料: 1.实验动物:5月龄兔; 2.清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1&time,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2; 3.完全培养液:DMEM培养液,补充10%胎牛血清、青霉素100
原代软骨细胞分离培养
1、一般根据实验要求,选取不同年龄组的兔子,实际上兔子的年龄越小越好,毕竟幼体组织的活力要高于成体组织的活力,耳静脉空气注射法处死后,无菌条件下分离后肢关节软骨和肋软骨,剥离包裹软骨组织的筋膜和软骨膜,放入盛有PBS液的培养皿中。2、将分离得到的软骨组织剁碎成0.3-0.5mm的组织块,移入25cm
正常大兔骨间充质前体细胞的体外成软骨培养
实验材料:1. 实验动物:5月龄兔;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1&time,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 完全培养基:DMEM培养液,补充10%胎牛血清、青霉素100IU/ml、链霉素100μg/ml4. 化学限定性培养液:基础培养基为DMEM
关节炎中软骨破坏方向的细胞模型
借用医疗百科的描述“关节炎泛指发生在人体关节及其周围组织的炎性疾病,可分为数十种。我国的关节炎患者有1亿以上,且人数在不断增加。临床表现为关节的红、肿、热、痛、功能障碍及关节畸形,严重者导致关节残疾、影响患者生活质量。” 关节炎以慢性炎症为起始,但最终是导致功能障碍及关键畸形。从病理改变来
关节炎中软骨破坏方向的细胞模型
借用医疗百科的描述“关节炎泛指发生在人体关节及其周围组织的炎性疾病,可分为数十种。我国的关节炎患者有1亿以上,且人数在不断增加。临床表现为关节的红、肿、热、痛、功能障碍及关节畸形,严重者导致关节残疾、影响患者生活质量。”关节炎以慢性炎症为起始,但最终是导致功能障碍及关键畸形。从病理改变来说,软骨层消
骨关节炎软骨实现无需干细胞负载的软骨缺损修复再生
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2024/1/515331.shtm近日,西安交通大学化学学院成一龙课题组和口腔医院杨宇轩博士通过聚加成反应构建了一种分别负载生物活性因子单宁酸和软骨分化因子Kartogenin的多重氢键交联水凝胶,作为体内软骨再生的无
微流控软骨芯片在软骨细胞培养的应用
由于人口老龄化,骨关节炎(osteoarthritis,OA)这一常见疾病所造成的社会影响预计将急剧增加,其常见的治疗方式为缓解疼痛或手术治疗。OA治疗药物匮乏,主要源于缺乏准确的临床前OA模型,在传统2D培养和3D培养中,二者均不能准确的模拟软骨细胞的动态培养微环境,以及在关节活动时,软骨细胞所受
科学家发现可高效再生关节软骨的干细胞
同济大学生命科学与技术学院、附属东方医院再生医学研究所教授岳锐课题组联合海南医科大学教授邹卫国课题组,首次发现了对力学刺激敏感的Procr+软骨干细胞,并证明其不仅对关节软骨稳态维持至关重要,而且在关节损伤后能显著促进软骨细胞再生,有望成为治疗骨性关节炎等退行性骨关节病的新一代种子细胞。相关研究
软骨细胞的原代培养和传代培养
软骨细胞的原代培养龄新西兰乳兔(雌雄不限,共18只,分6次处理),溺死,置于75%酒精溶液中10分钟,拿入超净工作台,自眼外眦至耳屏前剪开皮肤暴露皮下组织,再次严格消毒,自外眦外将颧弓由根部剪断,暴露髁状突,去净髁状突表面软组织及软骨膜,以眼科剪剪取髁状突表面的透明软骨,以磷酸缓冲液(PBS含青霉素
用藻酸盐微珠培养软骨细胞
实验方法原理 藻酸盐微珠培养基于在软骨细胞藻酸盐悬液中氯化钙的胶凝作用。试剂、试剂盒 软骨切除培养液生长培养液分离软骨细胞的酶液胰蛋白酶和EDTA混合液藻酸钠溶液胶凝液溶解液仪器、耗材 无菌磁铁实验步骤 切除软骨1. 自膝关节、肩关节和髋关节取软骨。由于胚胎或幼年供体的软骨比成年供体获得较多
用藻酸盐微珠培养软骨细胞
简介藻酸盐微珠培养基于在软骨细胞藻酸盐悬液中氯化钙的胶凝作用。 原理藻酸盐微珠培养基于在软骨细胞藻酸盐悬液中氯化钙的胶凝作用。 操作方法材料与仪器软骨切除培养液生长培养液分离软骨细胞的酶液胰蛋白酶和EDTA混合液藻酸钠溶液胶凝液溶解液无菌磁铁 步骤切除软骨1.自膝关节、肩关节和髋关节取软骨。由于胚胎
用藻酸盐微珠培养软骨细胞
实验方法原理藻酸盐微珠培养基于在软骨细胞藻酸盐悬液中氯化钙的胶凝作用。试剂、试剂盒软骨切除培养液 生长培养液
用藻酸盐微珠培养软骨细胞
实验方法原理藻酸盐微珠培养基于在软骨细胞藻酸盐悬液中氯化钙的胶凝作用。试剂、试剂盒软骨切除培养液生长培养液分离软骨细胞的酶液胰蛋白酶和EDTA混合液藻酸钠溶液胶凝液溶解液仪器、耗材无菌磁铁实验步骤切除软骨1. 自膝关节、肩关节和髋关节取软骨。由于胚胎或幼年供体的软骨比成年供体获得较多细胞,较长时间后
正常大鼠施旺细胞的培养
实验材料:1. 生后2d大鼠的坐骨神经;2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;3. 消化液:0.25%胰蛋白酶和0.03%胶原酶的混合消化液;4. 培养液a:DMEM培养液,加入0.02—0.025mol/L HEPES,pH7.
正常大鼠小胶质细胞的培养
实验材料:1. 新生大鼠或小鼠;2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;3. 培养用液:含10%的胎牛血清的MEM培养液,补加5μg/ml牛胰岛素、2%葡萄糖及抗生素;4. CFS-Ⅰ刺激因子:小胶质细胞在体外培养条件下一般不分裂,
提取动物关节软骨组织总RNA
实验目的 研磨破碎软骨组织(大鼠膝关节软骨),提取其总RNA。 实验原理 充分磨碎软骨样品(大鼠膝关节软骨),再用相关试剂提取其总RNA。 实验材料和器具样品:大鼠膝关节软骨仪器:多样品组织研磨仪(上海净信,Tissuelyser-24)耗材:研磨罐(上海净信,***ml),
正常小梁细胞原代培养
实验材料:1. 材料来源:人眼、兔眼或者猪眼等;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 器械:小梁剪与无齿镊等;4. 消毒液:200IU/ml的庆大霉素生理盐水;5. 培养液:基础液由DME
一例关节镜下组织工程软骨移植治疗膝关节软骨损伤...
一例关节镜下组织工程软骨移植治疗膝关节软骨损伤病例分析临床资料患者男性,23岁,因“右膝疼痛3个月”来院就诊。现病史:3个月前因体育训练不慎扭伤右膝,当时出现右膝疼痛,上下楼感觉膝关节无力,无弹响,无绞锁,无静息痛,症状进行性加重,上楼和蹲起时疼痛明显。体格检查:右膝浮髌试验阴性,髌骨研磨试验阳性,