从拟南芥菜中分离叶绿体实验
实验材料 叶组织试剂、试剂盒 研磨悬浮缓冲液仪器、耗材 烧杯Polytron 匀浆器实验步骤 1. 组织匀浆(1) 收集 10 g 叶组织,放进一 400 ml 的烧杯中。(2) 加入 200 ml 冰冷的研磨悬浮缓冲液。在 4℃ 的房间中,用 Polytron 匀浆器进行 6~7 个 3 秒钟脉冲匀浆叶组织。研磨重悬缓冲液:10 mmol/L EDTA50 mmol/L HEPES-KOH,pH 8.00.33 mol/L 甘露醇0.5 g/L BSA ( 无脂肪酸)5 mmol/L 抗坏血酸盐(用前添加)(3) 用网层米拉布(Calbiochem) 过滤匀浆,滤液倒进 4 个 50 ml 离心管中。2. 匀浆在 8000 g(Sorvall HB-4 转头,7000 r/min)离心一分钟。3. 小心地倾去上清。加 1 ml 1x SH。用驼毛刷重新悬浮叶绿体,动作要轻。4. 吸 2 ml 含 35% Pecoll 的 1x......阅读全文
从拟南芥菜中分离叶绿体实验
实验材料叶组织试剂、试剂盒研磨悬浮缓冲液仪器、耗材烧杯Polytron 匀浆器实验步骤1. 组织匀浆(1) 收集 10 g 叶组织,放进一 400 ml 的烧杯中。(2) 加入 200 ml 冰冷的研磨悬浮缓冲液。在 4℃ 的房间中,用 Polytron 匀浆器进行 6~7 个 3 秒钟脉冲匀浆叶组
从拟南芥菜中分离叶绿体实验
实验材料 叶组织试剂、试剂盒 研磨悬浮缓冲液仪器、耗材 烧杯Polytron 匀浆器实验步骤 1. 组织匀浆(1) 收集 10 g 叶组织,放进一 400 ml 的烧杯中。(2) 加入 200 ml 冰冷的研磨悬浮缓冲液。在 4℃ 的房间中,用 Polytron 匀浆器进行 6~7 个 3 秒钟脉冲
从拟南芥菜中分离叶绿体实验
实验材料 叶组织 试剂、试剂盒 研磨悬浮缓冲液 仪器、耗材
从拟南芥菜中分离叶绿体实验
实验材料叶组织 试剂、试剂盒研磨悬浮缓冲液 仪器、耗材烧杯
从豌豆组织分离叶绿体实验_叶绿体分离
实验材料叶子组织试剂、试剂盒PBF-Percoll 溶液山梨醇BSAHEPES-KOHEDTA仪器、耗材聚碳酸酯离心管实验步骤1. 制备 Percoll 梯度(1) 两个 50 ml 的聚碳酸酯离心管中分别加入 25 ml 50% 的 PBF-Percoll 溶液。50% PBF-Percoll0.
从豌豆组织分离叶绿体实验
叶绿体分离实验材料叶子组织 试剂、试剂盒PBF-Percoll 溶液
从豌豆组织分离叶绿体实验
叶绿体分离 实验材料 叶子组织 试剂、试剂盒
拟南芥叶绿体蛋白质组学分析实验
试剂、试剂盒HEPES-KOH 山梨醇
拟南芥叶绿体蛋白质组学分析实验
试剂、试剂盒 HEPES-KOH山梨醇抗坏血酸维生素 C半胱氨酸PF-Percoll仪器、耗材 浓缩离心设备实验步骤 建议在短日照条件下培养材料以诱导营养生长,并在照光的早期收取材料以提高获得完整叶绿体的产率。所以试剂应在收集材料之前准备好,并连同其他一些设备,如离心机转头及离心管等在冰箱或冰上冷却
拟南芥叶绿体蛋白质组学分析实验
试剂、试剂盒HEPES-KOH山梨醇抗坏血酸维生素 C半胱氨酸PF-Percoll仪器、耗材浓缩离心设备实验步骤建议在短日照条件下培养材料以诱导营养生长,并在照光的早期收取材料以提高获得完整叶绿体的产率。所以试剂应在收集材料之前准备好,并连同其他一些设备,如离心机转头及离心管等在冰箱或冰上冷却至 0
叶绿体分离的实验原理是什么
分离叶绿体色素的原理是类胡萝卜素中,胡萝卜素是不饱和的碳氢化合物,β—胡萝卜素水解可生成2分子维生素A,叶黄素是由胡萝卜素衍生的二元醇,不能与碱发生皂化反应,根据这一点,可以将叶绿素和类胡萝卜素分开。提取光合色素过程中,关键是速度。提取光合色素过程中,因为光合色素都是脂溶性的,因此用丙酮这种有机溶剂
叶绿体DNA分离
设备:Hitachi CS-150GXL或CS-120GXL微量超速离心机,S100AT6 转头,5PA 密封管(如果用4PC管,可接比例减少各层液量)溶液配制:A液:0.35Msorbitol(山梨醇),50mM Tris—Hcl (PH8.0) 25mM EDTA—Na2B液:5%(w/w)So
叶绿体(chloroplast)分离
设备:Hitachi CF—7D2离心机,T5SS或T4SS或T7A转头50ml PP 离心管CP—MX ,CP—WX超速离心机,R28S转头,40ml PA管。(或其他品牌离心机,同类转头)溶液配置:A液:0.35M Sorbitol,(山梨醇),50mM Tris—HCL (PH8.0) 5mM
拓展:叶绿体中色素的提取和分离
色素的提取和分离是现在的考试模式中处于重要的地位的实验,有一次考试中出现了教材没有的答案“纸层析法”,所以,在教学中还需要适当拓展,甚至需要实验改进。 例如,有一次,学生问到定量测定色素含量实验如何进行,要回答这个问题,需要选修教材中学到的方法的灵活应用,如光密度值的定量测定,得到色素的含量情
叶绿体色素的分离纸层析法实验
实验方法原理叶绿体色素中的各种色素化学结构不同,因而它们的物理化学性质如极性、吸收光谱、溶解度等也不同。叶绿素和类胡萝卜素是酯类化合物,不溶于水仅溶于已烷、石油醚等非极性溶剂中,可利用不同色素在各种有机溶剂中的分配系数以及在吸附剂上被吸附程度的不同而将叶绿体色素分离开。仪器、耗材色层分析用滤纸
叶绿体色素的分离纸层析法实验
叶绿体色素中的各种色素化学结构不同,因而它们的物理化学性质如极性、吸收光谱、溶解度等也不同。叶绿素和类胡萝卜素是酯类化合物,不溶于水仅溶于已烷、石油醚等非极性溶剂中,可利用不同色素在各种有机溶剂中的分配系数以及在吸附剂上被吸附程度的不同而将叶绿体色素分离开。实验方法原理叶绿体色素中的各种色素化学结构
叶绿体色素的分离纸层析法实验
实验方法原理 叶绿体色素中的各种色素化学结构不同,因而它们的物理化学性质如极性、吸收光谱、溶解度等也不同。叶绿素和类胡萝卜素是酯类化合物,不溶于水仅溶于已烷、石油醚等非极性溶剂中,可利用不同色素在各种有机溶剂中的分配系数以及在吸附剂上被吸附程度的不同而将叶绿体色素分离开。仪器、耗材 色层分析用滤纸培
叶绿体的分离与观察实验原理和实验操作
实验原理将植物组织匀浆后悬浮在等渗介质中进行差速离心,是分离细胞器的常用方法。一个颗粒在离心场中的沉降速率取决于颗粒的大小、形状、稠密度,也与离心力以及悬浮介质的粘度有关。在一给定的离心场中,同一时间内,密度和大小不同的颗粒其沉降速率不同。依次增加离心力和离心时间,就能够使非均一悬浮液中的颗粒按其大
叶绿体中色素的提取和分离知识总结!
“叶绿体中色素的提取和分离”是高中生物教材中的一个关键实验,理解和记忆内容较多,尤其是其中的一些注意事项是考试中的一个热点,好的知识和大家一起分享。 一、 为什么要选新鲜绿色的幼嫩叶片? 因为叶绿色含N﹑Mg,而老叶中这两种矿质元素很多已经分解转移,所以鲜绿色的幼叶中叶绿素的含量高,适合于实
机械法分离叶绿体
一、原理研磨叶片得到的匀浆,经过滤、离心可制备叶绿体。叶绿体的被膜比较脆弱,分离叶绿体应在等渗的缓冲溶液中,0~4℃温度下进行。叶绿体活力会随着离体时间延长而不断下降,因此,分离工作尽可能在短时间内完成。二、仪器与用具冰箱;离心机;扭力天平;显微镜;pH计;研钵;量筒;移液管;离心管;脱脂纱布等。分
叶绿体色素的提取、分离、性质和定量测定实验
实验方法原理1. 溶解性:叶绿素和类胡萝卜素均不溶于水而溶于有机溶剂,常用乙醇或丙酮提取。2. 分离色素的方法有多种,如纸层析. 柱层析等。纸层析是其中较简单的一种。当溶剂不断地从层析滤纸上流过时由于混合色素中各种成分在两相中(即流动相和固定相)间有不同的分配系数,它们的移动速度不同,使样品中的各种
叶绿体色素的提取、分离、性质和定量测定实验
实验方法原理 1. 溶解性:叶绿素和类胡萝卜素均不溶于水而溶于有机溶剂,常用乙醇或丙酮提取。2. 分离色素的方法有多种,如纸层析. 柱层析等。纸层析是其中较简单的一种。当溶剂不断地从层析滤纸上流过时由于混合色素中各种成分在两相中(即流动相和固定相)间有不同的分配系数,它们的移动速度不同,使样品中的各
叶绿体色素的提取、分离、性质和定量测定实验
实验方法原理1. 溶解性:叶绿素和类胡萝卜素均不溶于水而溶于有机溶剂,常用乙醇或丙酮提取。2. 分离色素的方法有多种,如纸层析. 柱层析等。纸层析是其中较简单的一种。当溶剂不断地从层析滤纸上流过时由于混合色素中各种成分在两相中(即流动相和固定相)间有不同的分配系数,它们的移动速度不同,使样品中的各种
线粒体分离实验—从组织中分离线粒体
实验材料肝脏试剂、试剂盒MS仪器、耗材匀浆器实验步骤1. 取出肝脏,注意不要弄破胆囊。放进一置于冰上的烧杯中,剪去任何结缔组织。称其质量后放回烧杯中。用锋利的剪刀、手术刀或剃须刀片将之切成 1~2 mmol/L 的薄片,用匀浆缓冲液(1x MS) 冲洗两次以去除大部分的血。转移至匀浆器中。加入足够的
cDNA宏阵列方法分离拟南芥的臭氧应答基因实验
实验步骤 ##一、 cDNA 宏阵列的样品制备培养基: I : 2 (V7 V ) Gamborg B5 培 养 基(GibcoBRL, Rockville, MD), I : 1000(V /V ) Hyponex肥 料(Hypon
叶绿体的分离与荧光观察实验方法与步骤
叶绿体 足植物细胞所特有的能量转换细胞器,光合作川就是在叶绿体中进行的。由于具有这一重要功能,所以它一直是细胞生物学、遗传学和分子生物学的重要研究对象。叶绿体是植物细胞中较大的一种细胞器,利用低速离心即可分离集中进行各种研究。 实验目的 一、通过植物细胞叶绿体 的分离。了解细胞器分离
cDNA宏阵列方法分离拟南芥的臭氧应答基因实验(一)
实验步骤 ##一、 cDNA 宏阵列的样品制备培养基: I : 2 (V7 V ) Gamborg B5 培 养 基(GibcoBRL, Rockville, MD), I : 1000(V /V ) Hyponex肥 料(Hyponex 10 : 5 : 10; Hyponex Japan
cDNA宏阵列方法分离拟南芥的臭氧应答基因实验(一)
除 cDNA 微阵列外,基于尼龙膜支持物的 cDNA 宏阵列方法是又一被广泛应用的大规模基因表达数据的收集方法。从新基因的发现到基因表达谱的分析, cDNA 宏阵列被应用于分子生物学研究领域的各个方面。尽 管 cDNA 宏阵列的点阵密度低于微阵列,但由于应用灵敏度较高的同位素标记的 cDNA 探针,
cDNA宏阵列方法分离拟南芥的臭氧应答基因实验(二)
11.用 mRNA 纯 化 试 剂 盒(Amersham Biosciences, Piscataway, NJ) 将 Poly.(A )+ RNA从总R N A 中分离出来(见注释5)。####(2) c D N A 文 库 的 构 建1.取1. 5 〜7. 5 μg poly (A )+ R
cDNA宏阵列方法分离拟南芥的臭氧应答基因实验(二)
注意事项1.所有的试剂必须用电阻高于 17. 6 的双蒸水配制。2.提取 RNA 所用的玻璃器具必须于 180°C 烘烤至少 8 h 以灭活 RNase。除缓冲液外的所有溶液都要用 0 •1 % DEPC水 配 制(见注释 3)。 RNase 的污染主要来源于实验人员的手,所以进行 RN A 实验时