酵母细胞的观察实验
酵母细胞的直径大约 5 pm，它们的很多重要特征在光学显微镜下都能够观察到。在实验室中，最好定期在相差显微镜下观察酵母培养物，以掌握细胞的生理状态以及污染情况。很多现代酵母细胞生物学研究采用复杂检测方法，用蛋白质特异抗体或特异结合某些细胞器的荧光染料对酵母细胞染色，近来，开始使用绿色荧光蛋白（GFP） 与感兴趣的酵母蛋白进行融合来标记细胞。本实验会提供一些将光学显微镜用于酵母细胞检测的标准类型例子。......阅读全文
酵母细胞中质粒的加工实验_穿梭质粒
实验材料带有一个非URA3选择标记YCp载体试剂、试剂盒缺失成分平板+Ura含有5-FOAYCp质粒选择性培养基的平板YPD平板YIP5载体仪器、耗材培养皿实验步骤1) 构建染色体上重要基因被破坏的单倍体菌株以及含有完整重要基因和URA3选择标 记的YEp或YCp质粒。2) 对于诱发突变，将重要基因
细胞器的观察实验——光镜切片
仪器、耗材光学显微镜镊子平皿载片实验步骤一、高尔基复合体（Golgi Complex）1. 用镀银法染色的豚鼠脊神经节光镜切片：神经细胞因合成运输大量的蛋白质而含有发达的内质网和高尔基复合体，在低倍镜下观察，神经节的假单极细胞体被神经束分隔成群。2. 神经细胞的胞体呈圆形或椭圆形。3. 转换高
细胞分裂的形态观察实验——有丝分裂
实验方法原理细胞有丝分裂(Mitosis)的现象是分别由弗勒明(Flemming，1882)在动物细胞和施特拉斯布格(Strasburger，1880)在植物细胞中发现。有丝分裂过程包括一系列复杂的核变化，染包体和纺锤体的出现，以及它们平均分配到每个子细胞的过程。 实验材料马蛔虫洋葱试剂、试剂盒Ca
酵母转化实验
实验材料酵母菌株质粒仪器、耗材YPD 平板SC-ura平板产孢子平板实验步骤展开
酵母转化实验
实验材料 酵母试剂、试剂盒 YPDYPAD腺嘌呤半硫酸TE乙酸锂仪器、耗材 摇床水浴锅转子离心机培养箱实验步骤 1. 在开始实验前2天，接种待转化的酵母菌株的单菌落于5 ml YPD培养基中，于30℃恒温摇床，培养过夜。 2. 转化的前一天晚上，往1 L 无菌烧瓶中加入300 ml YPAD
细菌、放线菌、酵母菌、霉菌的菌落观察和细菌菌落制片实验
实验方法原理 利用血液培养基富有营养及粘性等特性来培养细菌，在此培养基上生长的菌落在固定时粘性很大，能够牢固地附着在载玻片或盖玻片上，便于制片和观察。另外，血液培养基又是较好的保存菌种用培养基，故由此培养基所制的菌落制片能保存较长时间。实验材料 圆褐固氮菌枯草芽孢杆菌灰色链霉菌酿酒酵母白色葡萄球菌试
细菌、放线菌、酵母菌、霉菌的菌落观察和细菌菌落制片实验
实验方法原理利用血液培养基富有营养及粘性等特性来培养细菌，在此培养基上生长的菌落在固定时粘性很大，能够牢固地附着在载玻片或盖玻片上，便于制片和观察。另外，血液培养基又是较好的保存菌种用培养基，故由此培养基所制的菌落制片能保存较长时间。实验材料圆褐固氮菌枯草芽孢杆菌灰色链霉菌酿酒酵母白色葡萄球菌试剂、
昆虫体内酵母类共生菌的形态观察
实验概要本试验利用新近引入的国外冷冻切片机和显微摄像系统，开展对昆虫体内酵母类共生菌的形态学研究，以明确该类共生菌的个体形态特征以及在寄主虫体内的存在状态。主要试剂1. 样品包埋剂选用Leica CM1900 冷冻切片机配套包埋剂(OCT-compound)2. 结晶紫，组织染色选用常规染色剂3.
肝细胞癌形态学观察实验
实验材料 大体标本组织切片实验步骤 1. 大体标本（1）巨块型；肝脏显著肿大，切面见有一巨大肿块(多数在右叶)直径大于10cm，肿块灰白色，中央部有出血(红色)及坏死(灰黄色)。周围肝组织受压萎缩，但无明确包膜存在。巨块周围常可见多个小癌结节(肝内转移)。其余肝组织有肝硬化改变。（2）结节型：肝脏显
肝细胞癌形态学观察实验
实验材料大体标本组织切片实验步骤1. 大体标本（1）巨块型；肝脏显著肿大，切面见有一巨大肿块(多数在右叶)直径大于10cm，肿块灰白色，中央部有出血(红色)及坏死(灰黄色)。周围肝组织受压萎缩，但无明确包膜存在。巨块周围常可见多个小癌结节(肝内转移)。其余肝组织有肝硬化改变。（2）结节型：肝脏显著肿
酵母菌细胞的诱变实验——甲乙硫醚诱变
实验材料酵母试剂、试剂盒YPD磷酸钠缓冲液甲乙硫醚刀豆氨酸硫代硫酸钠仪器、耗材试管摇床离心机平板实验步骤1. 将过夜培养的待诱变酵母菌株转接于5 ml YPD培养基，于30℃继续培养。检查细胞密度，记录并调整到2×108细胞/ml。2. 转移1 ml 的菌悬液到无菌的离心管中。高速离心5~10
酵母菌细胞的诱变实验——紫外光诱变
实验材料酵母试剂、试剂盒YPD刀豆氨酸仪器、耗材紫外光杀菌灯紫外光放射量测定器实验步骤1. 将过夜培养的酵母菌培养液接种到5 ml YPD培养基中，于30℃培养。离心5~10 s，用1 ml 无菌水重悬沉淀细胞，重复洗涤1次，再用1 ml 无菌水重悬。 2. 检查细胞密度，记录数据后将细胞密度调
细胞形态的观察实验——成纤维细胞微丝的染色
实验方法原理微丝普遍存在于多种细胞，对细胞的形状和运动有一定作用。细胞松驰素B可与微丝的亚单位肌动蛋白结合，从而破坏微丝，改变细胞的形状实验材料成纤维细胞试剂、试剂盒PBSTriton X-100M-缓冲液戊二醛固定液考马斯亮兰染液细胞松驰素BDMEM仪器、耗材光学显微镜镊子平皿载片吸水纸恒温箱实验
细胞分裂的形态观察实验——无丝分裂
实验方法原理无丝分裂不仅是原核生物增殖的方式，而且雷马克(Remak)于1841年最早在鸡胚血细胞中也发现此现象，因为此过程没有出现纺锤丝和染色体的变化，故称无丝分裂(Ami- tosis)。其后无丝分裂又在各种动植物中陆续发现，尤其在分裂旺盛的细胞中更多见，但遗传物质平均分配否及其分裂的机制尚不十
植物细胞的质壁分离与复原观察实验
一 质壁分离原理 当外界溶液浓度大于细胞液浓度时，根据扩散作用原理，水分会由细胞液中渗出到外界溶液中，通过渗透作用失水，使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。由于原生质层比细胞壁的伸缩性大，当细胞不断失水时，原生质层就会与细胞壁逐渐分离开来，也就是逐渐发生了质壁分离。 反之，外界溶液
将DNA导入酵母细胞实验_乙酸锂转化
实验材料待转化的酵母菌株试剂、试剂盒YPD培养基YPAD培养基：添加30 mg L腺嘌呤半硫酸的YPD培养基高纯无菌水l0×TE缓冲液pH 7.5无菌10×乙酸锂储液：1 mol L乙酸锂pH 7.5 (用稀乙酸调pH)过滤除菌DNA ：高分子质量单链载体DNA和待转化DNA50% (m V) PE
将DNA导入酵母细胞实验_电穿孔转化
实验材料待转化的酵母菌株试剂、试剂盒 1 mol L 二硫苏糖醇（DTT过滤除菌并储存在-20℃)1 mol L山梨醇山梨醇选择平板仪器、耗材电穿孔仪：如Bio-Rad公司的带脉冲控制器的Gene Pulser或GIBCO BRL公司的 Cell-Porator 0. 2 cm间隙的一次性电穿孔槽（
酵母细胞破碎实验——玻璃珠破碎法
实验材料酵母菌试剂、试剂盒玻璃珠破菌缓冲液仪器、耗材玻璃珠拍打器实验步骤1. 培养并收集酵母菌细胞，在酵母消解酶缓冲液重悬菌体沉淀之前，测定压紧细胞的体积，以下所有步骤均在4℃进行。2. 用1体积的玻璃珠破菌缓冲液重悬细胞。 3. 用2体积的玻璃珠破菌缓沖液与细胞混合，加4体积冰冷的酸洗玻璃珠
啤酒酵母培养生产单细胞蛋白实验
实验方法原理 单细胞蛋白是通过培养单细胞微生物获得的菌体蛋白质。酵母菌、丝状真菌、微型藻类及非病源细菌等单细胞微生物均可用于生产单细胞蛋白，其中酵母菌是生产单细胞蛋白的主要单细胞微生物。多种原料可用于生产单细胞蛋白，如秸秆、薯干、石油、甲烷等，特别是一些工业废水、废渣可用来生产单细胞蛋白饲料，废物利
酵母感受态细胞制备实验——化学法
酵母感受态细胞制备可应用于：（1）建立酵母转化体系；（2）酵母表达系统构建；（3）酵母其他分子生物学研究。实验方法原理感受态是受体最容易接受外源DNA片段并实现转化的一种生理状态，用对应化学物质处理细胞后，细胞逐渐形成感受态细胞并进行转化。化学法简单，快速，稳定，重复性好，广泛用于外源基因的转化。实
酵母细胞核制备实验——差速离心法
细胞核（nucleus）是细胞中最大、最重要的细胞器（初中老教材认为细胞核不是细胞器，大学细胞生物学则认为是细胞器，这里以大学教材为准），它是由核膜（nuclear membrane）、核骨架（nuclear scaffold）、核仁(nucleolus) 几部分组成。实验材料酵母菌试剂、试剂盒细胞
酿酒酵母培养条件实验_酵母培养物的储存
实验方法原理酵母在琼脂或液体培养基中的理想培养温度是30℃，培养皿平板应倒置放入塑料盒中，于孵箱或培养室内进行培养。当孵育时间超过2或3天时，塑料盒可防止平板上的琼脂干裂。当使用液体培养基培养时，要使用旋转式或往复式摇床，至少每分钟200转，以保证充分通气；进行大体积液体培养时使用锥形瓶，培养基为瓶
细胞凋亡的观察
1、HE染色、光镜观察：凋亡细胞呈圆形，胞核深染，胞质浓缩，染色质成团块状，细胞表面有“出芽”现象。2、丫啶橙（AO）染色，荧光显微镜观察：活细胞核呈黄绿色荧光，胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧，可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。3、台盼蓝染色：如果细胞膜不完整、破裂，台盼蓝染料
细胞凋亡的观察
1、HE染色、光镜观察：凋亡细胞呈圆形，胞核深染，胞质浓缩，染色质成团块状，细胞表面有“出芽”现象。 2、丫啶橙（AO）染色，荧光显微镜观察：活细胞核呈黄绿色荧光，胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧，可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。 3、台盼蓝染色：如果细胞膜不完整、破裂，台盼
大葱花粉母细胞涂片及观察实验
实验方法原理 减数分裂是配子形成过程中发生的一种特殊方式的细胞分裂，在减数分裂过程中染色体只复制一次，而细胞却连续分裂两次，因此一个二倍体的性母细胞便形成为四个单倍体的性细胞。实验材料 大葱蚕豆试剂、试剂盒 卡诺氏固定液苯酚品红染色液乙醇仪器、耗材 显微镜载玻片盖玻片实验步骤 一、材料和方法 1.
酵母功能互补实验
实验概要本实验将在构建了大蒜重金属抗性基因表达载体并转入大肠杆菌DH5α的基础上，选择鉴定准确的质粒转化酵母细胞，对转化子进行了PCR鉴定和RT-PCR分析，及重金属抗性实验。主要试剂YPD培养基，醋酸锂，PEG(50%)，乙醇，少量酵母菌总RNA快速抽提试剂盒主要设备摇床，离心机，水浴锅，PCR仪
酵母双杂交实验
实验概要本实验构建了Bait载体和prey载体，酵母双杂交后，应用CPRG法定量测试了蛋白质相互作用。实验步骤1. Bait载体的构建将高保真PCR扩增的OsCCTlb(引物为OsCCT1bEcoRI5'和OsCCTlbXhoI3')和OsCNTlb(引物为OsCNTlb Eco
酵母活细胞染色
实验步骤展
培养细胞的电子显微镜观察实验
实验方法原理 做透射电镜观察需进行切片、固定和包埋细胞过程，与一般组织切片法大体相似，其最大的难题是如何把细胞完整无损地从培养瓶皿壁上包埋下来。自从定型产品塑料薄膜问世后，这一困难已被克服。应用无菌塑料薄膜是极其理想的支持物，比用盖玻片、微孔滤纸、云母和卵壳膜等支持物都好。把细胞直接培养在塑料薄膜上
培养细胞的电子显微镜观察实验
一、透射观察法透射观察必须切片，根据培养细胞种类和培养方法不同分原位切片和消化分离切片两种。 1. 在用玻璃瓶培养细胞做透射观察时，做原位切片非常复杂。只能采用消化法把细胞制成悬液才能进行包埋和切片。其过程为：消化分离细胞、固定、包埋、切片和观察几