关于肽指纹图谱测定的相关介绍

质谱技术作为蛋白质组研究的三大支撑技术之一,除了用于多肽,蛋白质的分子量测定外,还广泛的应用与肽指纹图谱测定及氨基酸序列测定。 肽指纹图谱(Peptide Mass Fingerprinting PMF)测定是对蛋白酶解或降解后所得多肽混合物进行质谱分析的方法。质谱分析所得肽断与多肽蛋白数据库中蛋白质的理论肽断进行比较,判断出所测蛋白是已知还是未知。由于不同的蛋白质具有不同的氨基酸序列,不同蛋白质所得肽断具有指纹特征。采用肽指纹谱的方法已对酵母、大肠杆菌、人心肌等多种蛋白质组进行了研究。对肽序列的测定往往要应用串联质谱技术,采用不同的技术选择特定质核比的离子,并对其进行碰撞诱导解离,通过分析肽断的断裂情况推导出肽序列。 目前生物质谱被认为是大规模、高通量进行蛋白结构鉴定的首选工具。由于通过LC-MS/MS可直接鉴定蛋白混合物,因此将来有望不通过2-D就能研究蛋白质组。生物质谱的优势在于它能帮助我们研究蛋白-蛋白间相互作用......阅读全文

关于肽指纹图谱测定的相关介绍

  质谱技术作为蛋白质组研究的三大支撑技术之一,除了用于多肽,蛋白质的分子量测定外,还广泛的应用与肽指纹图谱测定及氨基酸序列测定。  肽指纹图谱(Peptide Mass Fingerprinting PMF)测定是对蛋白酶解或降解后所得多肽混合物进行质谱分析的方法。质谱分析所得肽断与多肽蛋白数据库

一文了解肽质量指纹图谱原理

  肽质量指纹谱分析也称肽指纹图谱,是目前蛋白质组研究中鉴定蛋白较为常用的方法。  由于每种蛋白质的氨基酸序列(一级结构)都不同,蛋白质被酶水解后,产生的肽片段序列也各不相同,其肽混合物质量数亦具特征性,所以称为指纹谱,可用于蛋白质的鉴定,即用实验测得的蛋白质酶解肽段质量数在蛋白质数据库中检索,寻找

DNA-指纹的图谱相关内容

  取决于所用探针的核心序列(即重复序列中的重复单位)。目前所用的探针有两种,即探针33.15 。其核心序列为AGAGGTGGGCAGGTGG, 和33.6 ,即AGGGCTGGAGG 。这就是说这两种序列在人体基因组中不同的位置上分别重复不同的次数,而在不同个体的基因组中,对应位置上这两种核心序列

乳制品指纹图谱技术介绍

乳制品指纹图谱技术应用情况对于食品行业来说,什么问题都不如安全来得重要。而如果想要知道食用的东西是否安全,产品的来源追溯就显得特别关键。一种可以追溯奶源的新技术——牛奶指纹图谱识别受到了广泛的关注。牛奶指纹图谱识别技术通过光谱分析和精密计算快速准确获取牛奶成分的异常信息,并通过先进的质谱分析准确获取

中药指纹图谱的分类

狭义的中药指纹图谱是指中药化学(成分)指纹图谱,广义的中药指纹图谱则可按应用对象、测定手段进行不同的分类。 中药指纹图谱按测定手段可分为中药化学(成分)指纹图谱和中药生物指纹图谱。中药生物指纹图谱主要是测定各种中药材的DNA图谱,由于每个物种基因的唯一性和遗传性,中药材DNA指纹图谱可用于对中药材的

肽质量指纹图谱—MALDITOF-法鉴定蛋白质实验

实验材料测序级猪胰蛋白酶试剂、试剂盒碳酸氢铵碳酸氢铵缓冲液乙腈 碳酸氢铵缓冲液消化缓冲液仪器、耗材真空离心机烤箱实验步骤许多凝胶染色方法适用于后续的 MALDI-TOF 肽质量指纹图谱(PMF ) 分析。在第 14 章已经比较讨论了一些染色方法的性能和兼容性。3.1 胶内消化凝胶消化方法改编自 Je

肽质量指纹图谱—MALDITOF-法鉴定蛋白质实验

实验材料测序级猪胰蛋白酶                                                          试剂、试剂盒碳酸氢铵                                                                  碳酸氢铵

关于C肽测定方法的C肽检查和测定介绍

  1、C肽测定检查:  当病友在接受外来胰岛素治疗时,如果仍检查血中的胰岛素水平来评价机体产生胰岛素的能力,显然要受到注射胰岛素的影响,结果不准确。此时通过 C 肽检查能准确的反映机体自己产生胰岛素的量,而不受外来胰岛素的影响。测定方法与胰岛素相同,也是抽空腹及餐后血,正常情况下也是餐后比空腹高

肽质量指纹图谱—MALDITOF-法鉴定蛋白质实验(一)

实验材料 测序级猪胰蛋白酶试剂、试剂盒 碳酸氢铵碳酸氢铵缓冲液乙腈 碳酸氢铵缓冲液消化缓冲液仪器、耗材 真空离心机烤箱实验步骤 许多凝胶染色方法适用于后续的 MALDI-TOF 肽质量指纹图谱(PMF ) 分析。在第 14 章已经比较讨论了一些染色方法的性能和兼容性。3.1 胶内消化凝胶消化方法改编

肽质量指纹图谱—MALDITOF-法鉴定蛋白质实验(二)

1. 目标样本沉积 1 ) 经典干燥液滴法( 1 ) 半饱和氰基-4-羟基肉桂酸(约 5 mg/ml) 的配制:将 α-氰基-4-羟基苯甲酸溶解在 300 μl 1 : 1 乙腈/ TFA 溶 液(超声 10 min) 。离心几秒钟得到上清液。取 200 μl 上清液加到微量离心管中,并加入相同

方案13-利用化学印刷法进行肽质量指纹图谱分析实验

实验材料细胞或所研究的蛋白质试剂、试剂盒ACTH 肽段样品变性缓冲液直接蓝-71等电聚焦平衡缓冲液碘乙酰胺基质缓冲液辛基-吡喃葡萄糖修饰的猪胰蛋白酶三丁基膦仪器、耗材离心机化学打印仪导电胶带湿盒固定化pH梯度胶条MALDI 板质谱仪NuPAGE离线扫描仪PVDF 膜实验步骤一、样品的 2DPAGE

“指纹图谱”解开灵芝“密码”

    全球权威药学专业期刊《美国质谱学杂志》日前公布了中国科学院上海中药现代化研究中心一项最新研究成果:科学家们从上海绿谷集团的灵芝产品中分离鉴定出5 大类32种灵芝三萜,其中6种是首次发现的新活性物质。与此同时,绿谷集团自主研发的灵芝、丹参、枸杞等5大系列、10余种创新中药先后拿到12个国家的

关于C肽测定方法的测定方法介绍

  1、血清C肽测定  正常人用放射免疫测定法测C肽,一般为0.3~0.6pmoL/mL,均值为0.56±0.29pmoL/mL,葡萄糖负荷试验后,高峰出现的时间与胰岛素一致,比空腹时高5~6倍  2、24小时尿C肽测定  近年来国外已开展了24小时尿测定C肽水平的方法。这种方法不仅标本留取方便,病

关于信号肽的结构相关介绍

  信号肽位于分泌蛋白的N端。一般由15~30个氨基酸组成。包括三个区:一个带正电的N末端,称为碱性氨基末端:一个中间疏水序列.以中性氨基酸为主,能够形成一段d螺旋结构,它是信号肽的主要功能区;一个较长的带负电荷的C末端,含小分子氨基酸,是信号序列切割位点.也称加工区。当信号肽序列合成后,被信号识别

关于矿物元素结合肽的相关介绍

  多数矿物元素结合肽中心位置含有磷酸化的丝氨酸基团和谷氨酰残基,与矿物元素结合的位点存在于这些氨基酸带负电荷的侧链一侧,其最明显的特征是含有磷酸基团。与钙结合需要含丝氨酸的磷酸基团以及谷氨酸的自由羧基基团,这种结合可增强矿物质-肽复合物的可溶性。酪蛋白磷酸肽(简称CPP)是目前研究最多的矿物元素结

含量测定和中药指纹图谱——通用型质控方案

  中药质量标志物测定,结合中药指纹图谱分析仍然是目前中药及其制剂质量评价的重要策略。赛默飞除了提供常规HPLC和UHPLC的技术手段外,还能提供独家的双三元液相技术(DGLC)和电雾式检测器(CAD),以及高压离子色谱系统,可以为中药中多组分定量的“一法多用,一测多评”等新颖的分析策略提供强有力支

DNA指纹图谱分析(图)

一. 实验目的1. 掌握DNA指纹图谱技术的概念、原理和基本操作过程2. 学习DNA的限制性酶切的基本技术3. 掌握琼脂糖凝胶电泳的基本操作技术,学习利用琼脂糖凝胶电泳测定DNA片段的长度,并能对实验结果进行分析。二. 实验原理1984年英国莱斯特大学的遗传学家Jefferys及其合作者首次将分离的

关于胸腺五肽的鉴别测定介绍

  1、取胸腺五肽1mg,加水1mL溶解后,加双缩脲试液(取硫酸铜0.15g,加酒石酸钾钠0.6g,加水50mL,搅拌下加 入10%氢氧化钠溶液30mL,加水至100mL,即得)1mL,即显蓝紫色或紫红色。  2、在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致

关于脑钠肽的测定基本介绍

  测定血浆BNP浓度可以为临床提供许多有用的信息,常用的方法主要有:放射免疫法(IRA)、免疫放射测量法(IRMA)、电化学发光法(ECLA)。IRA法测定批间及批内的变异系数(CV)分别为14.8%、9.9%;IRMA法不经提取血浆BNP直接测量,使用Shionoria BNP放免试剂盒测定,此

关于胸腺五肽的含量测定介绍

  一、胸腺五肽的含量测定:照高效液相色谱法(通则0512)测定。  二、胸腺五肽的供试品溶液:取本品适量,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1mL中含0.5mg的溶液。  三、对照品溶液:取胸腺五肽对照品适量,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1mL中含0.5mg的溶液。  四、色谱条件与

关于胃肠肽的功能分析相关介绍

  由胃肠道合成的肽类激素包括促胃泌素(34肽)、肠促胰液素(27肽)、缩胆囊素(8肽)、胃动素(22肽)、血管活性肠肽(28肽)、神经降压肽(13肽)等。现已证明,许多胃肠道肽类激素在大脑和外周神经系统中也有发现,称为脑肠肽。这些肽类物质不断调整机体的反应性,以适应内外环境的变化,保证机体的健康状

枸杞的高效液相色谱指纹图谱

摘要:采用高效液相色谱-二极管阵列检测器联用仪(HPLC-DAD)对中药枸杞的甜菜碱、类胡萝卜 素提取液进行了指纹图谱研究。研究结果表明:用于枸杞质量控制的液相色谱指纹图谱对提取方法具有很强的依赖性,用枸杞甜菜碱提取液的液相色谱指纹图谱对品 种进行识别效果较好,而采用类胡萝卜素提取液

牧草DNA指纹图谱应用前景看好

  牧草品种的真假和种子质量的优劣直接关系到草业生产安全、农民增收和农(牧)区社会稳定。随着农牧业生产对优良牧草品种需求的提高,每年进入市场的育成牧草新品种数量也在快速增加,各种优良牧草品种越来越受到青睐,种植面积越来越大。而一些不法商家在利益驱动下,在种子生产经营过程中以假乱真、以次充好,坑农害农

DNA指纹图谱分析(图)(二)

DNA指纹图谱法的基本操作:从生物样品中提取DNA(DNA一般都有部分的降解),可运用PCR技术扩增出高可变位点(如VNTR系统,串联重复的小卫星DNA等)或者完整的基因组DNA,然后将扩增出的DNA酶切成DNA片断,经琼脂糖凝胶电泳,按分子量大小分离后,转移至尼龙滤膜上,然后将已标记的小卫星DNA

DNA指纹图谱分析[DNA-Fingerprinting-]

一. 实验目的1. 掌握DNA指纹图谱技术的概念、原理和基本操作过程2. 学习DNA的限制性酶切的基本技术3. 掌握琼脂糖凝胶电泳的基本操作技术,学习利用琼脂糖凝胶电泳测定DNA片段的长度,并能对实验结果进行分析。二. 实验原理1984年英国莱斯特大学的遗传学家Jefferys及其合作者首次将分离的

关于DNA指纹的技术原理介绍

  DNA指纹的图像在X光胶片中呈一系列条纹,很像商品上的条形码。各种分析方法均以DNA的多态性为基础,产生具有高度个体特异性的DNA指纹图谱,由于DNA指纹图谱具有高度的变异性和稳定的遗传性,且仍按简单的孟德尔方式遗传,成为最具吸引力的遗传标记。  DNA指纹图谱,开创了检测DNA多态性(生物的不

人体活性肽的相关介绍

  活性肽(Active Peptide)又称生物活性肽或生物活性多肽,是一千多种肽的总称(如大豆肽、深海鱼皮肽、海参肽等是活性肽中的一种)。  肽是两个或两个以上的氨基酸以肽键相连的化合物,具有活性的多肽称为活性肽,其在人体内起重要生理作用。  它在人的生长发育,新陈代谢,疾病以及衰老,死亡的过程

蛋白指纹图谱临床应用的指导原则(二)

四、关于蛋白指纹图谱随访的推荐方案对治疗后的癌症患者,应用蛋白指纹图谱检测,可监控癌症的复发和转移,检测的时间可参照关于蛋白指纹图谱随访的推荐方案:术后或放、化疗结束后第6周开始第1次复查;3年间每3个月一次;3到5年间每半年1次;5到7年间每年1次;7年后可停止复查;期间如发现升高,1月内再复检1

蛋白指纹图谱临床应用的指导原则(一)

一、蛋白指纹图谱在肿瘤早期筛查中的应用临床上有肿瘤家族史或症象可疑者,特别是至少出现下述症状之一者都应立即进行蛋白指纹图谱检测,以期尽早发现癌症。☆ 原因不明的疼痛及体重减轻;☆ 伤口长期不愈;☆ 疣或黑痣发生明显变化;☆ 持续性消化不良、便血、血尿;☆ 持续性嘶哑、干咳及吞咽困难;☆ 月经期异常大

蛋白指纹图谱临床应用的指导原则(三)

案例1国际著名医学杂志《柳叶刀》:蛋白指纹图谱(SELDI)以前所未有的精确度来诊断卵巢癌从手指取少量血液,应用目前全球最先进的蛋白指纹图谱SELDI蛋白质芯片,在30分钟之内就可以知道是否患有卵巢癌。国际著名医学杂志《柳叶刀》发表了美国FDA和国立癌症研究所(NCI)的这一研究结果。专家指出,通过