磷酸化多肽及其修饰方法
蛋白质磷酸化是生物界最普遍，也是最重要的一种蛋白质翻译后修饰，20世纪50年代以来一直被生物学家看作是一种动态的生物调节过程。在细胞中，大概有1/3的的蛋白质被认为是通过磷酸化修饰的。蛋白质的磷酸化修饰与多种生物学过程密切相关，如DNA损伤修复、转录调节、信号传导、细胞凋亡的调节等。磷酸化蛋白质及多肽的研究可以帮助人们阐述上述过程的机理，进一步认识生命活动的本质。近年来随着蛋白质组技术的不断发展，蛋白质磷酸化的研究越来越受到广泛的关注。 蛋白质磷酸化在细胞信号转导中的作用 磷酸化多肽主要指肽链中的Ser、Tyr和Thr残基的侧链羟基被修饰成酸式磷酸酯多肽。磷酸化多肽是研究蛋白质磷酸化过程的必不可少的工具，因此研究蛋白质及多肽的磷酸化反应并确定成熟简便的合成路线就变得非常重要。目前为止，多肽的磷酸化修饰主要有后磷酸化法和单体法两种合成方法。后磷酸化法是多肽序列在树脂上合成完后，再对其中的Ser、Tyr或Thr的侧......阅读全文
识别特异性酪氨酸磷酸化多肽抗体的制备
实验步骤基 本 方 案 1 多克隆抗磷酸肽抗体的制备材料B S A -琼 脂 糖 亲 和 基 质（Sigma) 填 装（如辅助方案 2 ) 于柱床体积IOml的层析柱磷酸化酪氨酸亲和基质层析柱（IOml 柱床体积；见辅助方案3)磷酸肽-B S A 偶联物免疫家兔的粗制血清PB S /叠氮钠.•含有0
胰蛋白酶切磷酸化多肽作图实验—样品制备
实验材料蛋白质试剂、试剂盒甲醇电泳缓冲液仪器、耗材凝胶电泳实验步骤1. 用单向或者双向凝胶电泳将 32P 标记的目的蛋白质与其他不需要的成分分开。2. 电泳结束后，用 50% 甲醇清洗三次，时间控制在 6 小时，去处 SDS 和电泳缓冲液将凝胶放在两张塞热玢膜（Bio-Rad) 之间吸干。用放射性墨
聚乙二醇修饰剂（PEG修饰剂）及其他衍生物（一）
一、聚乙二醇修饰剂 近年来，蛋白质多肽等生物大分子药物和天然产物药物分子被越来越多的应用于疾病治疗领域，极大地推动了医药事业的发展。然而，生物大分子在药用过程中的作用却由于其半衰期短、容易产生免疫原性抗原性、易被酶解、有一定药理毒性等问题被大大限制。为有效解决该问题，国家生化工程技术研
聚聚乙二醇修饰剂（PEG修饰剂）及其他衍生物
一、聚乙二醇修饰剂 近年来，蛋白质多肽等生物大分子药物和天然产物药物分子被越来越多的应用于疾病治疗领域，极大地推动了医药事业的发展。然而，生物大分子在药用过程中的作用却由于其半衰期短、容易产生免疫原性抗原性、易被酶解、有一定药理毒性等问题被大大限制。为有效解决该问题，国家生化
聚乙二醇修饰剂（PEG修饰剂）及其他衍生物（二）
分枝型PEG修饰G-CSF 、直链型PEG修饰G-CSF及未修饰G-CSF 的药代动力学比较，分枝型PEG修饰产物半衰期可提高5倍以上。PEG-PTS修饰G-CSF的HPSEC检测，证明其具有高的修饰选择性，且活性保持60%以上 mPEG-hydrazide修
纳米线表面修饰研究及其应用取得进展
生物传感器是分析生物体内各项生理活动指标的重要工具，在面向重大疾病的高效检测方面具有重要的研究价值和应用前景。目前，金属氧化物纳米材料在生物传感器的应用中表现出了突出的优势，然而它们的表面性质极大地影响着生物传感器的关键性能，如选择性、灵敏度、响应时间等。研究自组装单层膜能够方便地调控金属氧化物
关于多肽链的一级结构加工修饰介绍
⑴N端甲酰蛋氨酸或蛋氨酸的切除：N端甲酰蛋氨酸是多肽链合成的起始氨基酸,必须在多肽链折迭成一定的空间结构之前被切除。 其过程是： ① 去甲酰化； ② 去蛋氨酰基。 ⑵氨基酸的修饰：由专一性的酶催化进行修饰,包括糖基化、羟基化、磷酸化、甲酰化等。 ⑶二硫键的形成：由专一性的氧化酶催化,将
定制多肽、氨基酸和蛋白等表面修饰脂质体
主动靶向药物传递是指利用特定的生物过程如特异性的配体-受体识别和相互作用来提高特定部位的药物浓度。主动靶向系统以抗体、多肽、糖类、维生素、糖蛋白等作为配体与靶细胞受体进行专属性作用。其中多肽分子是机体内一类重要的生物活性物质。具有良好的生物相容性、靶向性、无免疫原性、低毒性等优点将其作为配体应用于靶
用ETD线性离子阱质谱成功鉴定蛋白和翻译后修饰
By Andreas Huhmer, Director of Proteomics Marketing, Thermo Fisher Scientific 在翻译后修饰和/或极碱肽的序列分析方面，电子转移裂解（ ETD ）线性离子阱质谱是很有优势的工具。传统的诱导活化裂解（CAD）常用
多肽合成方法
1.酰基叠氮物法 早在1902年，Theodor Curtius就将酰基叠氮物法引入到肽化学中，因此它是最古老的缩合方法之一。在碱性水溶液中，除了与酰基叠氨缩合的游离氨基酸和肽以外，氨基酸酯可用于有机溶剂中。与其他许多缩合方法不同的是，它不需要增加辅助碱或另一等当量的氨基组分来捕获腙酸。
简述组蛋白修饰种类、位点及其意义
1、种类：染色质的共价修饰主要是组蛋白的修饰。2、组成核小体的组蛋白八聚体的组蛋白H3和H4是蛋白酶修饰的主要位点。3、意义：Mi22NHRD由核心(HDAC1、HDAC2、RBAP46öRBAP48)+Mi2、MTA1öMTA2、MBD3组成,其中MBD3含有MBD样序列,与甲基化DNA有低亲和力
团队探究发现不同干燥方法对富硒多肽结构及其消化特性的影响
近日，中国农业科学院农产品加工所食物营养与功能性食品创新团队探究了不同干燥方法对富硒多肽结构及其消化特性的影响，相关研究成果发表于国际食品期刊《Food Chemistry》 （JCR一区，IF=8.5）。加工所2021级硕士研究生熊杨洋为论文第一作者，王凤忠研究员和黄亚涛副研究员为共同通讯作者。该
NLRP3磷酸化修饰与炎症小体通路激活的调控机制
9月21日，Molecular Cell在线发表了国家生物医学分析中心李涛研究员和周涛研究员合作的题为“NLRP3 phosphorylation is an essential priming event for inflammasome activation”的最新研究成果。该文报道了磷
方案1－用带有－Fe(Ⅲ)－和－Ga(Ⅲ)的－IMAC－纯化磷酸化多肽
实验材料胶内或溶液分离的目标蛋白试剂、试剂盒乙酸EDTAFeCl3甲酸甲醇蛋白裂解酶溶剂仪器、耗材台式离心机去盐树脂IMAC 树脂MALDI 探针质谱仪加样吸头加样器实验步骤一、IMAC 树脂的制备二、多肽样品的制备三、用 NanoscaleIMAC 纯化磷酸化多肽展开
方案3－固定化金属离子亲和介质对磷酸化多肽进行分析
实验材料牛小肠碱性磷酸酶羧肽酶Y目标磷酸化蛋白TPCK 修饰的膜蛋白酶试剂、试剂盒乙酸EDTAFeCl3NH4HCO3MALDI 基质镍-次氨基三乙酸（Ni-NTA)树脂柠檬酸钠仪器、耗材致密的反应柱子（CRC)过滤器孵育器MALDI 质谱仪MALDI 靶板微量离心管实验步骤一、固定化金属离子亲和柱
方案5－用－μLCESIMS/MS－对磷酸化多肽进行分析
实验材料IMAC 柱子上洗脱下来的多肽试剂、试剂盒乙酸七氯丁酸乙腈仪器、耗材HPLC 系统质谱仪micro-ESI 接口micro-LC 柱实验步骤1.根据制造商的建议，制备、清洗、平衡 uLC 柱。柱子的流速决定于柱子本身，一般 50um (内径）的柱子为 200nl/min 左右，100um (
溶解多肽的方法及多肽应用的注意点
多肽的溶解度取决元计算的物理特性。氨基酸可分类为酸性，碱性，极性，非极性，疏水性。多肽有高含量的非极性疏水性氨基酸或极性不带电荷的氨基酸。建议溶解在有机溶液中（例如：DMF，甲醇，丙醇，异丙醇，DMSO）。总之，酸性多肽一般溶解于碱性溶液中，而碱性多肽溶解在酸性溶液中。氨基酸的属性碱性：Arg,Hi
【分享】质谱分析蛋白的原理与方法
质谱技术具有较好的灵敏度、准确度，能准确测定蛋白质。目前质谱主要测定蛋自质一级结构包括分子量、肽链氨基酸排序及多肽或二硫键数目和位置，在对蛋白质结构分析的研究中占据了重要的地位。[1,2]质谱有进样器、离子源、质量分析器、离子检测器、控制电脑及数据分析系统等组成。传统的质谱仅用于小分子挥发物质
多肽稳定标同位素记技术与甲基化修饰技术
1. 多肽稳定标同位素记技术 随着多肽在生物医药领域越来越广泛和深入的应用，标记和修饰性的多肽种类的需求越来越多，质量需求也越来越高。稳定同位素标记(同位素示踪法)就是其中典型的一种。稳定同位素标记多肽是指用稳定同位素标记的氨基酸合成的多肽。与标准氨基酸相比，同位素标记是指用2H，13C或1
多肽固相合成方法：Boc多肽合成法和Fmoc多肽合成法
多肽的合成是氨基酸重复添加的过程，通常从C端向N端(氨基端)进行合成。多肽固相合成的原理是将目的肽的第一个氨基酸C端通过共价键与固相载体连接，再以该氨基酸N端为合成起点，经过脱去氨基保护基和过量的已活化的第二个氨基酸进行反应，接长肽链，重复操作，达到理想的合成肽链长度，最后将肽链从树脂上裂解下来
多肽固相合成方法：Boc多肽合成法和Fmoc多肽合成法
多肽的合成是氨基酸重复添加的过程，通常从C端向N端(氨基端)进行合成。多肽固相合成的原理是将目的肽的第一个氨基酸C端通过共价键与固相载体连接，再以该氨基酸N端为合成起点，经过脱去氨基保护基和过量的已活化的第二个氨基酸进行反应，接长肽链，重复操作，达到理想的合成肽链长度，最后将肽链从树脂上裂解下来
多肽固相合成方法：Boc多肽合成法和Fmoc多肽合成法
多肽的合成是氨基酸重复添加的过程，通常从C端向N端(氨基端)进行合成。多肽固相合成的原理是将目的肽的第一个氨基酸C端通过共价键与固相载体连接，再以该氨基酸N端为合成起点，经过脱去氨基保护基和过量的已活化的第二个氨基酸进行反应，接长肽链，重复操作，达到理想的合成肽链长度，最后将肽链从树脂上裂解下来，分
premRNA中存在的修饰及其对剪接影响
2018年10月7日 讯 /生物谷BIOON/--日前，作为“诺贝尔奖风向标”的拉斯克奖——拉斯克·科什兰医学特殊成就奖颁给了Joan Argetsinger Steitz教授（致敬Joan Steitz！2018年拉斯克特别成就奖获得者），以表彰她在生物医学领域，尤其是RNA生物学领域中所发挥
磷酸化蛋白质组鉴定技术路线及经典案例
蛋白质翻译后修饰（PTMs）几乎参与了细胞所有正常生命活动的过程，并发挥十分重要的调控作用。蛋白修饰已经成为国际上蛋白质研究的一个极其重要的领域，目前研究比较成熟的有磷酸化、乙酰化、糖基化、泛素化等。蛋白质磷酸化是生物体中最常见、最重要的一种蛋白质翻译后修饰方式，它可以通过激发、调节诸多信号通路进而
双剑合璧－|－sumo化与磷酸化修饰联合分析赢高分文章
随着质谱技术的不断进步，大规模修饰组学的方法也越来越成熟，PTM作为生物体内非常重要的生理现象也逐步被揭示出参与各项生命活动。今天我们就一起来学习一篇运用质谱技术对磷酸化修饰和类泛素化修饰鉴定，找出两种修饰联合作用对在DNA复制损伤压力时的响应。该篇文献来自哥本哈根大学的研究人员于2017年1
中科大吴缅教授最新文章：p53磷酸化修饰
p53 蛋白被认为是迄今为止最著名的肿瘤抑制因子之一, 在肿瘤发生发展过程中发挥复杂而重要的调控作用. 在正常生理情况下, 细胞内的p53 维持在很低的水平, 当细胞受到多种刺激后, p53被翻译后修饰, 蛋白因稳定而活性被激活, 参与细胞周期阻滞、细胞凋亡、细胞衰老、细胞代谢等生命活动过程.
4D组学新时代！更精确的磷酸化修饰组学
离子淌度分离概念的引入使得蛋白质组学进入了4D新时代。4D蛋白质组学是在3D分离即保留时间（retention time）、质荷比（m/z）、离子强度（intensity）这三个维度的基础之上增加了第四个维度，离子淌度（mobility）的分离（图1），进而大幅度的提高扫描速度和检测灵敏度，带来蛋白
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磷酸化蛋白质组鉴定技术路线及经典案例介绍
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高静压诱导马铃薯蛋白结构修饰及其抗氧化活性研究
高静压诱导马铃薯Patatin蛋白结构修饰及其抗氧化活性研究 中国农科院供图 中国农业科学院农产品加工研究所薯类加工与品质调控创新团队研究发现，高静压处理会改变马铃薯Patatin蛋白的结构、提高其抗氧化能力。相关论文发表于Molecules。 我国是世界上最大的马铃薯生产国，其产量约占世界总产