电泳操作过程中有哪些注意事项
1.DNA电泳与溴化乙锭 “DNA的琼脂糖凝胶电泳”是生物化学实验的基础型实验。“质粒DNA的分离、纯化和鉴定”在很多学校也是必开的综合性实验。这些涉及到DNA的提纯及鉴定的实验都会用到高度灵敏的荧光染色剂溴化乙锭对DNA进行染色。EB是强诱变剂,具有高致癌性,会在60~70 cc蒸发,所以在学生实验中要特别注意其安全使用,严禁随便丢弃。在实验中使用及实验结束后处理应注意以下事项。 (1)使用中注意事项 实验室涉及到EB的操作应统一固定在实验室的某一角落,称量固体时要带面罩和手套,使用含有EB的溶液务必带上手套。同时不要在胶太热的时候加EB,以防止因蒸发被吸入。接触到EB的玻璃器皿应集中放置并专门使用,污染到EB的枪头、抹布、手套及EB染色跑完的胶,回收至棕色的玻璃瓶中,定期进行焚烧处理旧。桌面或物体表面污染到EB时,可用活性碳进行处理。 (2)废EB溶液处理 A:EB浓溶液(浓度大于0.5mg/mI)的净化处理......阅读全文
电泳操作过程中有哪些注意事项
1.DNA电泳与溴化乙锭 “DNA的琼脂糖凝胶电泳”是生物化学实验的基础型实验。“质粒DNA的分离、纯化和鉴定”在很多学校也是必开的综合性实验。这些涉及到DNA的提纯及鉴定的实验都会用到高度灵敏的荧光染色剂溴化乙锭对DNA进行染色。EB是强诱变剂,具有高致癌性,会在60~70 cc蒸发,所以在
纸电泳法的操作过程和所需仪器
1.仪器装置 包括电泳室及直流电源两部分。 常用的水平式电泳室装置如图,包括两个电泳槽 A和一个可以密封的玻璃(或相应材料)盖B;两侧的电泳槽均用有机玻璃(或相应材料)板 C分成两部分;外格装有铂电极(直径0.5~0.8cm)D;里格为可放滤纸 E的有机玻璃电泳槽架F,此架可从槽中取出;两侧电泳槽A
电泳操作过程中需要注意哪些问题
凝胶电泳操作注意事项: 1. 缓冲系统:在没有离子存在时,电导率最小,DNA不迁移,或迁移极慢,在高离子强度的缓冲液中,电导很高并产热,可能导致DNA变性,因此应注意缓冲液的使用是否正确。长时间高压电泳时,常更新缓冲液或在两槽间进。
凝胶电泳实验操作过程中,应注意哪些事项?
一、凝胶制备时:TEMED和AP要后加,加入后用玻棒缓慢匀速的混匀,避免有气泡产生;然后马上注入电泳槽内,插入梳子,这时也要匀速,但不能太慢,因为太慢的话底部的胶会比上面的胶凝的快,影响胶的质量,同时小心有气泡;二、加样时要注意:1.每空的上样量不能过大,以免样品溢出,造成各泳道相互污染;2.为了避
聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作过程
蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时,它的迁移率取决于它所带净电荷以及分子的大小和形状等因素。如果加入一种试剂使电荷因素消除,那电泳迁移率就取决于分子的大小,就可以用电泳技术测定蛋白质的分子量。1967年,Shapiro等发现阴离子去污剂十二烷基硫酸钠(SDS)具有这种作用。当向蛋白质溶液中加入足够量SD
琼脂糖凝胶电泳法的操作过程和所需仪器
1.仪器装置 电泳室及直流电源同纸电泳。2.试剂(1) 醋酸-锂盐缓冲液(pH3.0)取冰醋酸 50ml,加水800ml混合后,用氢氧化锂调节pH**3.0,再加水**1000ml。(2) 甲苯胺蓝溶液取甲苯胺蓝 0.1g,加水100ml使溶解。3.操作方法(1)制胶取琼脂糖约 0.2g,加水10m
醋酸纤维素薄膜电泳法的操作过程和所需仪器
1.仪器装置电泳室及直流电源同纸电泳。2.试剂(1) 巴比妥缓冲液(pH8.6)取巴比妥 2.76g,巴比妥钠15.45g,加水溶解使成1000ml。(2) 氨基黑染色液取 0.5g的氨基黑10B,溶于甲醇50ml、冰醋酸10ml及水40ml的混合液中。(3) 漂洗液取乙醇 45ml、冰醋酸5ml及
TLC操作过程
操作过程点样:将试样溶液用毛细管在层析板上距离板底部约1.5厘米的位置点若干下(次数根据样品浓度而定),并静置顷刻(或加热)以使溶剂完全蒸发。若溶剂难以挥发,则点样之后需要将板放于真空容器中干燥后再使用。溶剂的蒸发是必须的,否则残留的溶剂会与流动相作用,降低流动相的均一性,导致分离效果变差。将少量合
过滤操作过程
过滤操作过程一般包括过滤、洗涤、干燥、卸料4个阶段 。。①过滤。悬浮液在推动力作用下,克服过滤介质的阻力进行固液分离;固体颗粒被截留,逐渐形成滤饼,且不断增厚,因此过滤阻力也随之不断增加,致使过滤速度逐渐降低。当过滤速度降低到一定程度后,必须停止过滤。②洗涤。停止过滤后,滤饼的毛细孔中含有许多滤液,
聚丙烯酰胺凝胶电泳法的操作过程和所需仪器
1.仪器装置通常由稳流电泳仪和圆盘或平板电泳槽组成。其电泳室有上、下两槽,每个槽中都有固定的铂电极,铂电极经隔离电线接于电泳仪稳流挡上。2.试剂(1)溶液 A取三羟甲基氨基甲烷 36.6g,四甲基乙二胺0.23ml,加0.1mol/L盐酸溶液48ml,再加水溶解并稀释** 100ml,置棕色瓶内,在
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法的操作过程和所需仪器
SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白分子量,是根据大多数蛋白都能与阳离子表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)按重量比结合成复合物,使蛋白分子所带的负电荷远远超过天然蛋白分子的负电荷,消除了不同蛋白分子的电荷效应,使蛋白分子相对迁移率(R'')的大小完全取决于分子量的高低,因此可从已知分子
PCR扩增仪操作过程
PCR用于扩增一小段已知的DNA片断,可能是单个基因,或者仅仅是某个基因的一部分。与活体生物不同的是,PCR只能复制很短的DNA片断,通常不超过10kbp。DNA是双链分子,因此用互补DNA双链的构造单位(核苷酸)来度量其大小,单位为碱基对(base pair, bp)。某些特定的方法可以扩
微滤操作过程分类
微滤操作过程分死端过滤和错流过滤两种模式。死端过滤在压力推动下,料液流动方向与膜表面垂直的过滤方式称为死端过滤。死端过滤又称全量过滤,直流过滤 。在死端过滤时,溶剂和小于膜孔的溶质粒子在压力的推动下透过膜,大于膜孔的溶质粒子被截留,通常堆积在膜面上。随着时间的增加,膜面上堆积的颗粒越来越多,膜的渗透
无菌检测的操作过程
4.3.1 取出一次性培养器先检查包装是否无损,在无菌室内打开无菌包装。 4.3.2 将一次性培养器逐个插放在不锈钢排液槽上。 4.3.3 将一次性培养器的弹性软管装入集菌仪的蠕动泵头,要求定位准确,软管走势顺畅。 4.3.4 用中间的针孔插到样品瓶里,然后用尾端针孔插到稀释液里,开机,将稀释液倒置
扫描电镜操作过程
1、接通电源,打开电镜主机上的开关(开关有三个档,第一档为关闭,第二档开启,第三档为启动)启动的时候把钥匙放在第三档大约两秒钟松手,电镜启动,钥匙自动回到第二档(回到第二档的原因是防止突然断电,又突然来电)。 2、打开电脑。 3、打开电脑桌面上的电镜操作软件(打开软件电镜真空泵会自动工作,开始
硬度计操作过程
详细介绍硬度计操作过程 1、打开硬度计的电源,旋转试验力变换手轮,选择试验力。 2、硬度计按方向键移选择表,表1适用于有色金属,表2适用于黑色金属,按ENTER键确认,主屏幕弹出转换表,按ENTER键确认,主屏幕状态显示出所选硬度值转换标尺。 3、按方向键,弹出DWELL保荷时间菜单,选择加荷时
基因枪法的操作过程
基因枪法: 将直径4um的钨粉或金粉在供体DNA中浸泡,然后用基因枪将这些粒子打入细胞、组织或器官中,具有一次处理多个细胞的优点,但转化效率较低。另外这种方法也用于基因治疗和抗体制备,并已取得初步成效。
ELISA试剂盒操作过程
试剂盒选用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA)。往预先包被人性别决议区Y框蛋白9(SOX9)捕获抗体的包被微孔中,依次参加标本、规范品、HRP标记的检测抗体,通过温育并完全洗刷。免责声明1. 试剂盒仅供研讨运用,不得用于临床实验或人体实验,否则所发生的一切结果,由实验者承当,本公司概不负责
洗箱机的操作过程
自动洗箱机由一对链轮通过一个可调减速机驱动,使输送链环形移动。输送链配备有止动块。进入箱体(或机架)后,自动带入清洗箱。初洗喷淋后由离心泵加压,用一定温度(50~60℃)的循环热水上下左右多次冲洗。毕竟,它被冲洗、消毒并在高温下干燥,然后从出口送到下一道工序(或手动收集箱)。 全自动洗箱机是一
凝胶成像种类及操作过程
随着分子生物学研讨逐步遍及,凝胶成像体系在国内的需求在不断增加不论是什么用途,凝胶成像体系的组件都是相似的。都有一个拍照体系、一个带有特别光源的暗箱与获取和剖析凝胶图片的软件组成。接下来逐个为广大用户叙述其种类及操作过程—— 凝胶成像种类:*一般凝胶成像剖析体系: 可以对蛋白电泳凝胶,DNA
混凝土振动台操作过程
混凝土振动台操作过程一、准备工作1、振动台安装前,应先打好地基,打地基地土平面要按水平找平,并按底架螺栓,然后安 装,安装使固定螺栓必须拧紧。2、振动台安装完毕试车时,先开车3-5分钟后停车对所有紧固螺栓进行检查,若松动须紧后方可使用。二、试验操作振动台在真实过程中,混凝土制品应须牢固的紧
直接灰分法的操作过程
称取试样后,以小火加热使试样充分炭化至无烟,然后置于马弗炉中,在550±25℃ 灼烧4 h。冷却至200℃左右,取出,放入干燥器中冷却30 min,重复灼烧至恒重,计算灰分含量(重量百分比g/100 g,以下简称%)。
柱层析的基本操作过程
柱层析的基本操作过程:主要包括常压分离、减压分离和加压分离 3种模式。常压分离是最简单的分离模式方便、简单 ,但是洗脱时间长。减压分离尽管能节省填料的使用量 ,但是由于大量的空气通过填料会使溶剂挥发 ,并且有时在柱子外面会有水汽凝结 ,以及有些易分解的化合物也难以得到 ,而且还必须同时使用水泵或真空
PCR扩增仪的操作过程
PCR用于扩增一小段已知的DNA片断,可能是单个基因,或者仅仅是某个基因的一部分。与活体生物不同的是,PCR只能复制很短的DNA片断,通常不超过10kbp。DNA是双链分子,因此用互补DNA双链的构造单位(核苷酸)来度量其大小,单位为碱基对(base pair, bp)。某些特定的方法可以扩增40k
碱片法的操作过程
具体过程是将超细玻璃纤维滤膜剪成直径为7cm的圆片,毛面向上,用移液管均匀滴加1mL30%的碳酸钾溶液,使溶液在滤膜上扩散直径为5cm,于60℃烘干。然后将其放入塑料皿用塑料垫圈压好装在塑料袋中携至采样现场放置采样。采样时间一般为1个月。采样完毕将碱片带回实验室用重量法测定碱片上硫酸根的量。测定结果
薄层色谱的基本操作过程
薄层色谱操作注意事项影响薄层色谱分析的因素有很多,比如样品处理方法、薄层板制备技巧、点样方法、展开剂的遴选、温湿度的掌控等等很多方面,在这里对其操作要点作一下简单介绍:1铺制薄层板:铺板用的匀浆不宜过稠或过稀:过稠,板容易出现拖动或停顿造成的层纹;过稀,水蒸发后,板表面较粗糙。匀浆配比一般是硅胶G:
柱层析的基本操作过程
柱层析的基本操作过程:主要包括常压分离、减压分离和加压分离 3种模式。常压分离是最简单的分离模式方便、简单 ,但是洗脱时间长。减压分离尽管能节省填料的使用量 ,但是由于大量的空气通过填料会使溶剂挥发 ,并且有时在柱子外面会有水汽凝结 ,以及有些易分解的化合物也难以得到 ,而且还必须同时使用水泵或真空
核酸电泳(RNA电泳与DNA电泳)
(一)DNA的凝胶电泳:凝胶电泳是分子克隆的中心技术之一。琼脂糖凝胶用于分离大于200~1000bp的片段;操作简单、快速,且分离范围广,分辨率高。2.聚丙烯酰胺凝胶用于分离5-500bp的片段; 效果好、分辨率极高,相差1bp的DNA片断就能分开,能容纳相对大量的DNA ,用于核苷酸多态性的分析。
直流高压发生器操作过程
按下列步骤操作:⑴ 将调压电位器退回零位。⑵ 关闭电源开关,面板指示灯均不亮。⑶ 一分钟后,待机内低压电容器充分放电后,才允许再次打开电源开关。重新进行空载试验,并查明情况后,可再次升压试验。注意:做电缆试验时,要安装限流电阻使用。(做其它试验时,不能使用限流电阻)直流高压发生器使用说明书● 控制箱
间接血凝试验的操作过程介绍
该技术在临床检验中应用广泛,以下简述其操作过程。 载体 红细胞是大小均一的载体颗粒,最常用的为绵羊、家兔、鸡的红细胞及O凝型人红细胞。新鲜红细胞能吸附多糖类抗原,但吸附蛋白质抗原或抗体的能力较差。致敏的新鲜红细胞保存时间短,且易变脆、溶血和污染,只能使用2~3d。为此一般在致敏前先将红细胞醛