RNAi:制备siRNAs的方法
越来越多的研究人员开始采用小分子干扰RNA(small interfering RNAs,siRNAs)来抑制特定的哺乳动物基因表达。siRNA是一种短片断双链RNA分子,能够以同源互补序列的mRNA为靶目标降解特定的mRNA,这个过程就是RNA干扰途径(RNA interference pathway)。RNAi的应用包括功能基因组学,药物靶筛选,细胞信号传导通路分析等等。目前为止较为常用的5种制备siRNAs的方法包括· 化学合成· 体外转录· 长片断dsRNAs经RNase III 类降解 (e.g. Dicer, E. coli, RNase III)· siRNA表达载体或者病毒载体在细胞中表达siRNAs· PCR制备的siRNA表达框在细胞中表达前面3种方法包括体外制备siRNAs然后经过转染或者电转导入哺乳动物细胞后面两种方法则依赖能够表达siRNAs的DNA载体或者表达框转染到细胞中。每种方法都有自己的......阅读全文
制备电泳实验
实验方法原理 严格来说洗脱不能达到制备的目的,它只能得到微克到毫克级的样品。通常是用其他方法分离的粗样品通过某种电泳方法进一步分离纯化后,再用扩散洗脱或电泳洗脱收集纯样品,继而用作其他分析的需要。实验材料 凝胶切片仪器、耗材 解剖刀匀浆器实验步骤 1. 扩散洗脱扩散洗脱是用解剖刀或匀浆器将凝胶切片捣
质粒的制备
实验材料 大肠杆菌菌液试剂、试剂盒 LA培养基LB培养基75%乙醇仪器、耗材 摇床离心机超净台TE
样品制备技术
俄歇电子能谱仪对分析样品有特定的要求,在通常情况下只能分析固体导电样品。经过特殊处理,绝缘体固体也可以进行分析。粉体样品原则上不能进行俄歇电子能谱分析,但经特殊制样处理也可以进行分析。由于涉及到样品在真空中的传递和放置,所以待分析样品一般都需要经过一定的预处理。
制备电泳实验
洗脱 连续电泳 等电聚焦制备电泳 实验方法原理 严格来说洗脱不能达到制备的目的,它只能得到微克到毫克级的样品。通常是用其他方法分离的粗样品
什么是制备
1 制备色谱到底是什么?(1)分析色谱的目的,是分析出混合物中一个(或者几个)纯物质的含量。制备色谱的目的,是从混合物中得到纯物质。为了加快分离的时间与提高分离的效率,制备色谱的的进样品量很大,导致制备色谱柱子的分离负荷的相应加大,也就必须加大色谱柱填料,增大制备色谱的直径和长度,使用的相对多的流动
凝胶的制备
凝胶的制备商品凝胶是干燥的颗粒使用前需直接在欲使用的洗脱液中膨胀。为了加速膨胀,可用加热法,即在沸水浴中将湿凝胶逐渐升温至近沸,这样可大大中速膨胀,通常在1-2小时内即可完成。特别是在使用软胶时, 自然膨胀需24小时至数天,而用加热法在几小时内就可完成。这种方法不但节约时间,而且还可消毒,除去凝胶中
TEM样品制备
样品制备由于透射电子显微镜收集透射过样品的电子束的信息,因而样品必须要足够薄,使电子束透过。l 试样分类:复型样品,超显微颗粒样品,材料薄膜样品等。l 制样设备:真空镀膜仪,超声清洗仪,切片机,磨片机,电解双喷仪,离子薄化仪,超薄切片机等。 ▽ 超细颗粒制备方法示意图来源:公开资料 ▽ 材料薄膜制备
TEM样品制备
样品制备由于透射电子显微镜收集透射过样品的电子束的信息,因而样品必须要足够薄,使电子束透过。l 试样分类:复型样品,超显微颗粒样品,材料薄膜样品等。l 制样设备:真空镀膜仪,超声清洗仪,切片机,磨片机,电解双喷仪,离子薄化仪,超薄切片机等。▽超细颗粒制备方法示意图来源:公开资料▽材料薄膜制备过程示意
制备克隆实验
试剂、试剂盒 ATP-巯基乙醇IPTGX-gal平末端限制酶连接缓冲液T4DNA 连接酶平末端插入物克隆载体培养基仪器、耗材 FALCON 2059 多聚丙烯试管37°C 恒温箱 水浴箱实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂ATP(10 mmol/L)β-巯基乙醇(可选择)IPTG(100 mm
血清制备实验
实验材料 血仪器、耗材 低温离心机4℃冰箱试管–80℃低温储藏箱实验步骤 1. 取血后,37℃下,让血液凝固1 到2 小时(不加抗凝剂);2. 4℃冰箱过夜(让血块固缩);3. 当血清自然析出后, 4℃,3000 转/分,离心10 分钟,分离血清,弃去不溶物;4. 将血清移至一干净试管,并分装成小份
制备克隆实验
试剂、试剂盒 ATP -巯基乙醇 IPTG X-gal 平末端限制酶 连接缓冲液 T4DNA 连接酶 平末
抗体的制备
为了研究抗体的理化性质、分子结构与功能,以及应用抗体于临床疾病的诊断、治疗及预防都需要人工制备抗体。目前,根据制备的原理和方法可分为多克隆抗体、单克隆抗体及基因工程抗体三类。 一、多克隆抗体 大多数抗原是由大分子蛋白质组成,但只是抗原上有限部位的特殊分子结构能与其相应抗体结合,称此部位为抗原
血清制备实验
抗血清为含有某一类具有特异免疫功能的抗体分子的血清,一般为动物被人工注射某类抗原后制备的动物血清。高效价的抗血清用于研究工作以及疾病的诊断和治疗。实验材料血仪器、耗材低温离心机4℃冰箱试管–80℃低温储藏箱实验步骤1. 取血后,37℃下,让血液凝固1 到2 小时(不加抗凝剂);2. 4℃冰箱过夜(让
质粒的制备
构建载体 实验方法原理 在pH 12.0 ~ 12.6碱性环境中,细菌的线性大分子量染色体DNA变性分开,而共价闭环的质粒DNA虽然变性但仍处于拓扑缠绕状
制备色谱简介
(1)分析色谱的目的,是分析出混合物中一个(或者几个)纯物质的含量。制备色谱的目的,是从混合物中得到纯物质。为了加快分离的时间与提高分离的效率,制备色谱的的进样品量很大,导致制备色谱柱子的分离负荷的相应加大,也就必须加大色谱柱填料,增大制备色谱的直径和长度,使用的相对多的流动相。然而,当色谱柱上样品
RNA的制备
来源于任何细胞的RNA都可以通过反转录酶的作用拷贝成双链DNA并克隆化,获得相应的于特定细胞来源的cDNA文库。因此,RNA制备的意义有两个方面 * 获得特定细胞来源的cDNA文库,克隆目的基因 * 分析基因的表达,阐明基因调控的特性,了解从基因转录产生RNA的结构,数量,水平及合成的速率抑制RNA
血清制备实验
血清制备实验 实验材料 血 仪器、耗材
血涂片制备
血涂片制备(preparation of blood smears)是显微镜血细胞形态观察的前提。 1﹒操作 (1)血标本: ①静脉采血标本:用EDT A ·K2抗凝1~2h内的标本,使用玻棒、毛细管、注射针头等在距载玻片一端1c m处加1滴抗凝血,直径约4 mm。 ②皮肤采
散剂的制备
实验材料 碳酸氢钠氧化镁试剂、试剂盒 硫酸氢钠仪器、耗材 研钵筛子天平实验步骤 一、准备1. 称取:正确选择天平,掌握各种结聚状态的药品的称重方法。2. 粉碎:是制备散剂和有关剂型的基本操作。要求学生根据药物的理化性质,使用要求,合理地选用粉碎工具及方法。3. 过筛:掌握基本方法,明确过筛操作
制备克隆实验
试剂、试剂盒ATP-巯基乙醇IPTGX-gal平末端限制酶连接缓冲液T4DNA 连接酶平末端插入物克隆载体培养基仪器、耗材FALCON 2059 多聚丙烯试管37°C 恒温箱水浴箱实验步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂ATP(10 mmol/L)β-巯基乙醇(可选择)IPTG(100 mmol/L
质粒的制备
实验方法原理 在pH 12.0 ~ 12.6碱性环境中,细菌的线性大分子量染色体DNA变性分开,而共价闭环的质粒DNA虽然变性但仍处于拓扑缠绕状态。将pH调至中性并有高盐存在及低温的条件下,大部分染色体DNA、大分子量的RNA和蛋白质在去污剂SDS的作用下形成沉淀,而质粒DNA仍然为可溶状态
GPC样品制备
样品制备 对于比较样品的好坏或者控制产品质量来说,GPC分析结果的重复性非常重要。那么从样品制备方面如何保证结果的重复性呢?一般来说,大家会认为自动进样器只是提高了分析的自动化程度,更加方便。实际上自动进样器更深层次的意义在于可以提高测试结果的重复性。传统的样品制备需要外部溶样和外部过滤,人为因
样品制备方式
(1)无机材料溶剂清洗或长时间抽真空,以除去试样表面的污染物。如对陶瓷或金属样,用乙醇或丙酮擦洗,然后用蒸馏水洗掉溶剂,吹干或烘干。用氩离子刻蚀法除去表面污染物。擦磨、刮剥和研磨。表层与内表面的成分相同的固体样品,用SiC纸擦磨或用刀片刮剥;粉末样品采用研磨的办法使之裸露出新的表面层。真空加热法。对
土壤样品制备
一、样品制备 (一)场地和器具 1、制样场地 (1)风干室 应设置专用土壤风干室,配备风干架;风干室应通风良好,整洁,无易挥发性化学物质,避免阳光直射土壤样品, 注意防酸或碱等污染,可在窗户加设防尘网。每层样品风干盘上方空间应不少于 30cm,风干盘之间间隔应不少于 10cm。风干室应配
桥粒的制备
实验材料 牛口鼻部或舌头试剂、试剂盒 柠檬酸缓冲液仪器、耗材 匀浆器实验步骤 1. 在当地屠宰场获取新鲜的牛口鼻部或舌头,立刻埋于碎冰中。对于口鼻部:用剃刀刮掉口鼻部最外面的一层(角质层的角膜),收集下面的一层(棘层)。对于舌头:从结缔组织的上面分解出表皮。2. 用剪刀将解剖来的表皮剪成 0.5 c
NADH制备方法
NADH制备方法主要包括提取法、发酵法、强化法、生物合成法和有机物合成法 。
质粒的制备
质粒的制备可以用于(1)携带外源基因进入细菌中扩增或表达的主要载体,它在基因操作中具有重要作用;(2)质粒的分离与提取是最常用、最基本的实验技术。实验方法原理在pH 12.0 ~ 12.6碱性环境中,细菌的线性大分子量染色体DNA变性分开,而共价闭环的质粒DNA虽然变性但仍处于拓扑缠绕状态。将pH调
溶菌酶的制备
溶菌酶是采用 生物工程技术进行克隆、提取而制取,它是一种天然酶,安全绿色的添加剂,无抗药性。 该酶广泛存在于人体多种组织中,鸟类和家禽的蛋清、哺乳动物的泪、 唾液、血浆、尿、乳汁等体液以及微生物中也含此酶,其中以蛋清含量最为丰富。从鸡蛋清中提取分离的溶菌酶是由18种129个 氨基酸残基构成的单
制备苯乙醛
香料?您知道苯乙醛与香料是有密切关系的吗?苯乙醛CAS号为122-78-1,它的主要作用就是用来做花香型香精的调合香料。当然,于我公司产品中是用于科研的。制备苯乙醛:可有多种制法,比如说:苯乙酸催化还原、β-苯乙醇催化氧化以及采用苯乙烯、环氧苯乙烷、桂酸及其酯类为原料的方法都能制得2-苯基乙醛。工业
TEM样品制备
由于透射电子显微镜收集透射过样品的电子束的信息,因而样品必须要足够薄,使电子束透过。 试样分类:复型样品,超显微颗粒样品,材料薄膜样品等。 制样设备:真空镀膜仪,超声清洗仪,切片机,磨片机,电解双喷仪,离子薄化仪,超薄切片机等。