桥粒的制备
实验材料 牛口鼻部或舌头试剂、试剂盒 柠檬酸缓冲液仪器、耗材 匀浆器实验步骤 1. 在当地屠宰场获取新鲜的牛口鼻部或舌头,立刻埋于碎冰中。对于口鼻部:用剃刀刮掉口鼻部最外面的一层(角质层的角膜),收集下面的一层(棘层)。对于舌头:从结缔组织的上面分解出表皮。2. 用剪刀将解剖来的表皮剪成 0.5 cm X 0.5 cm 的碎片。用一个 Polytron 匀浆器匀浆表皮,每 10 g 组织加 200 ml 含 0.05% NP-40 的柠檬酸缓冲液。在 4℃ 搅拌匀浆物 1 小时。柠檬酸缓冲液:0.1 mol/L 柠樣酸(pH 2.6) ( 用 1 mol/L NaOH 调 pH 值)0.1 mmol/L DTT5 μg/ml 亮抑蛋白酶肽(Sigma)5 μg/ml 抑胃酶肽1 mmol/L PMSF3. 用一块 50 μm 的尼龙网筛或网纱过滤匀浆物。4. 滤过液用 13000 g 4℃ 离心 20 分钟。5. 用含 0.01......阅读全文
桥粒的制备
实验材料 牛口鼻部或舌头试剂、试剂盒 柠檬酸缓冲液仪器、耗材 匀浆器实验步骤 1. 在当地屠宰场获取新鲜的牛口鼻部或舌头,立刻埋于碎冰中。对于口鼻部:用剃刀刮掉口鼻部最外面的一层(角质层的角膜),收集下面的一层(棘层)。对于舌头:从结缔组织的上面分解出表皮。2. 用剪刀将解剖来的表皮剪成 0.5 c
桥粒的制备实验_分级分离桥粒
实验材料桥粒试剂、试剂盒尿素溶液仪器、耗材匀浆器实验步骤1. 在最终的桥粒沉淀中加 20 ml 尿素溶液,用玻璃/Teflon 匀浆器匀浆,用尿素溶液稀释匀浆物使蛋白质浓度为 0.15 mg/ml,用 1 mol/L 的 Tris-HCl 调节溶液的 pH 值到 9.0 在室温至少搅拌 1 小时。尿
桥粒的制备实验
从牛舌或牛口鼻部分离桥粒分级分离桥粒实验材料牛口鼻部或舌头 试剂、试剂盒柠檬酸缓冲液
桥粒的制备实验
从牛舌或牛口鼻部分离桥粒 分级分离桥粒 实验材料 牛口鼻部或舌头
桥粒的制备实验_从牛舌或牛口鼻部分离桥粒
实验材料牛口鼻部或舌头试剂、试剂盒柠檬酸缓冲液仪器、耗材匀浆器实验步骤1. 在当地屠宰场获取新鲜的牛口鼻部或舌头,立刻埋于碎冰中。对于口鼻部:用剃刀刮掉口鼻部最外面的一层(角质层的角膜),收集下面的一层(棘层)。对于舌头:从结缔组织的上面分解出表皮。2. 用剪刀将解剖来的表皮剪成 0.5 cm X
关于细胞质膜的桥粒与半桥粒的介绍
桥粒(desmosome)是相邻细胞间形成的纽扣式结构.通过质膜下的致密斑连接中间纤维,中间为钙粘素.主要分布在承受拉力的组织中,如皮肤,口腔,试管和心肌中。 半桥粒(hemidesmosome)位于上皮细胞基面与基膜之间,它与桥粒的不同之处在于: ①只在质膜内侧形成桥粒斑结构,其另一侧为基
抗桥粒自身抗体简介
抗桥粒自身抗体是天疱疮的特异性标志抗体,常结合临床、组织学和免疫病理来确诊天疱疮。其靶抗原有3种:Dsg1,为叶状天疱疮抗体的主要靶抗原;Dsg2,存在于各种上皮细胞中;Dsg3,为寻常天疱疮(PV)抗体的主要靶抗原。抗桥粒自身抗体常用间接免疫荧光法检测:染色模式为特征性网状着染。 间接免疫荧
免疫学实验抗桥粒自身抗体介绍
抗桥粒自身抗体介绍: 抗桥粒自身抗体是天疱疮的特异性标志抗体,常结合临床、组织学和免疫病理来确诊天疱疮。其靶抗原有3种:Dsg1,为叶状天疱疮抗体的主要靶抗原;Dsg2,存在于各种上皮细胞中;Dsg3,为寻常天疱疮(PV)抗体的主要靶抗原。抗桥粒自身抗体常用间接免疫荧光法检测:染色模式为特征性
抗桥粒自身抗体的临床意义是什么
阳性:天疱疮。 注意:PV患者血清中可以检测到直接抗表皮细胞间隙的自身抗体。在活体皮损表皮处可检测这些自身抗体,利用间接免疫荧光技术(IIF)可证实PV患者血清中也存在循环自身抗体。PV自身抗体的IIF染色模式与PF患者的一致,均为特征性网状着染。利用直接免疫荧光技术(DIF)在全部的活动期P
临床化学检查方法介绍抗桥粒自身抗体介绍
抗桥粒自身抗体介绍: 抗桥粒自身抗体是天疱疮的特异性标志抗体,常结合临床、组织学和免疫病理来确诊天疱疮。其靶抗原有3种:Dsg1,为叶状天疱疮抗体的主要靶抗原;Dsg2,存在于各种上皮细胞中;Dsg3,为寻常天疱疮(PV)抗体的主要靶抗原。抗桥粒自身抗体常用间接免疫荧光法检测:染色模式为特征性网状
抗桥粒自身抗体的正常值及临床意义
正常值 IIF法(间接免疫荧光法):阴性。 临床意义 阳性:天疱疮。 注意:PV患者血清中可以检测到直接抗表皮细胞间隙的自身抗体。在活体皮损表皮处可检测这些自身抗体,利用间接免疫荧光技术(IIF)可证实PV患者血清中也存在循环自身抗体。PV自身抗体的IIF染色模式与PF患者的一致,均为特
关于细胞连接—中间纤维相连的锚定连接的介绍
⑴中间纤维相连的锚定连接— 桥粒:又称点状桥粒,位于粘合带下方。是细胞间形成的钮扣式的连接结构,跨膜蛋白(钙粘素)通过附着蛋白(致密斑)与中间纤维相联系,提供细胞内中间纤维的锚定位点。中间纤维横贯细胞,形成网状结构,同时还通过桥粒与相邻细胞连成一体,形成整体网络,起支持和抵抗外界压力与张力的作用
关于细胞连接的生物介绍
细胞粘着是细胞连接的起始,细胞连接是细胞粘着的发展。从时间上看,粘着在先,连接在后。从结构上看,细胞粘着涉及的分子较少、范围局部、结构简单;而细胞连接涉及的蛋白分子较多、范围广、结构复杂,结合的紧密程度高。动物细胞有四种类型的连接∶紧密连接(tight junction)、粘着连接(adhesi
PNAS:科学家发现可预防心室性心肌病猝死药物
致心律失常右心室心肌病(ARVC)是一种选择性发生在右心室的疾病,可导致心脏衰竭和猝死。该病病因并不十分明确,但约50%的患者是由于遗传缺陷导致。近日,来自英国牛津大学的Xin Lu研究团队发现p53抑制剂iASPP可以预防ARVC诱发的猝死。 细胞桥粒是存在于细胞之间保证细胞物理压力的锚定连
生物膜质膜的特化结构和功能
质膜的特化结构包括侧面的特化结构和游离面的特化结构。侧面的特化结构就是指细胞连接,或称细胞间连接,它是细胞相互连接处局部质膜所形成的特化结构,在多细胞动物中普遍存在。游离面的特化结构,如微绒毛、鞭毛、纤毛等,帮助完成细胞的特定活动。 1.紧密连接(tight junction) 又称闭锁小带
细胞连接的连接方式介绍
细胞连接方式的例子在脊椎动物中,细胞连接可分为:紧密连接(Tight Junctions)使细胞非常紧密的相接,防止物质进出。例如皮肤细胞间的连接就是如此,以防止水分从汗腺流失。间隙连接(Gap Junctions)又称为通讯连接(Communicating Junctions),类似植物的原生质丝
细胞连接的介绍
在多细胞生物体内,细胞与细胞之间通过细胞膜相互联系,形成一个密切相关,彼此协调一致的统一体,称为细胞连接。细胞连接是多细胞有机体中相邻细胞之间通过细胞膜相互联系、协同作用的重要组织方式,在结构上常包括质膜下、质膜及质膜外细胞间几个部分,对于维持组织的完整性非常重要,有的还具有细胞通讯作用。 细
大疱性皮肤病的病因分析
天疱疮是一种自身免疫性疾病。其病因与发病机理尚不完全清楚,但大量证据表明,它是一种自身免疫性疾病。在天疱疮患者血清中存在有抗角质形成细胞膜或细胞间物质抗体,患者皮损及周围组织也有类似抗体的沉积皮损及周围组织也有类似抗体的沉积。这些抗体所针对的靶抗原是自身表皮组织。天疱疮是抗原、抗体之间反应导致角
多肽制备
固相多肽合成就是不断地在固相载体上加入α-氨基和侧链基团被保护的氨基酸。FMOC基团是用来保护α-氨基中的N的,去除保护基团后,再加入第二个氨基酸。产生的多肽通过一个连接臂将C端连接在树脂上,它可以被裂解下来。通常情况下,在多肽从树脂上裂解下来的同时去除侧链保护基团,一般采用哌啶去 FMOC保护基团
抗原制备
不管是制备单抗还是多抗,抗原的设计与制备都是一个非常重要的问题,设计或者制备得不好的抗原有可能完全不能免疫出抗体来。一个良好的抗原必须具体的条件:(1)分子足够大。对于多肽或蛋白质类的抗原来说,一个抗原决定簇(又叫表位,epitope),通常由6-8个氨基酸残基组成。而平均每5-10kD才有一个表位
制备TLC
制备TLCTLC还可用于少量如100毫克左右的化合物的分离,此时混合物样品不是“点”在板上,而是涂抹在TLC板上且高于洗脱剂液面上的位置,形成一条水平的样品带。然后如同展开小型TLC板一样将制备TLC板展开并晾干,然后将每条携带不同化合物的色带从板上分别刮下,并用合适的溶剂萃取洗涤(如二氯甲烷)并过
汕头大学教授到昆明动物所进行学术交流
5月31日,应中国科学院昆明动物研究所孔庆鹏研究员的邀请,汕头大学许丽艳教授和李恩民教授到研究所进行学术交流。当天下午,许丽艳教授和李恩民教授给所内师生们分别做了题为“fascin基因在食管癌中的功能、表达调控及其细胞信号传导通路”以及“桥粒糖蛋白DSC2负性调控食管癌细胞侵袭迁移的分子机制”的
什么是制备与半制备液相
制备与半制备主要是指待制备样品的量来区别,1克以上是制备级别,100毫克到1克之间是半制备级别
半制备色谱和制备色谱的区别
1.制备与半制备的差异是流速与色谱柱;半制备一般会选择直径为10mm的色谱柱;而制备选择的是直径为20的色谱柱;同样,流速也会相应提升,半制备的流速一般为1.0ml/min,而制备一般会设置为8ml/min。液相色谱仪有分析型以及制备型,分析型一般用来分析多个化学成分,可以进行定性以及定量,而制备型
制备电泳实验——等电聚焦制备电泳
实验方法原理等电聚焦制备电泳是一种非变性制备技术。由于等电聚焦电泳技术的特点,因而是一种理想的制备方法。试剂、试剂盒电极液两性电解质Ultrodex实验步骤一、液体介质垂直柱状蔗糖密度梯度等电聚焦是原瑞典 LKB 公司早期用于制备和分析目的的等电聚焦方法。载体两性电解质在蔗糖密度梯度柱中形成 pH
人工制备抗体制备方法有哪些
抗体在疾病的诊断和免疫防治中的重要作用,使人们对抗体的需求越来越大。人工制备抗体是大量获得抗体的重要途径。早年人工制备抗体的方法主要是以相应抗原免疫动物,获得抗血清。由于抗原常常含有多种不同的抗原表位,加之所获得的抗血清也未经免疫纯化,因此,获得的抗血清实际上是含多种抗体的混合物,即多克隆抗体(po
拇指征的发病原因
本病呈常染色体显性遗传,Dietz等(1991)通过家族的连锁分析,将本病基因定位于15q15~q21.3,在人体很多组织如心内膜,心瓣 膜,大血管,骨骼等处,均有硫酸软骨素A或C等黏多糖堆积,从而影响了弹力纤维和其他结缔组织纤维的结构和功能,使相应的器官发育不良及出现功能异常,Abraham等
单克隆抗体上清制备实验——大量制备
实验材料目的杂交瘤试剂、试剂盒完全 DMEM-10 培养液(含 5~10 mmol/L HEPES pH 7.2~7.4)仪器、耗材250 ml 无菌锥形离心管转瓶培养装置850 cm2 旋转培养瓶175 cm2 组织培养瓶实验步骤1. 重复基本方案 1 步骤 1,并按 1:10 分传到终体积为 1
简述角质形成细胞的作用
1.角质形成细胞的特点是可以产生角蛋白。角质形成细胞自最下面的基底细胞不断增殖,在向上移动的同时产生坚韧的角蛋白。角质形成细胞间通过一种称为桥粒的结构紧密连接在一起,当桥粒连接出现问题时会导致各种皮肤水疱性疾病的发生。 2.最外层的角质层一般由5~20层已经死亡的扁平细胞组成。这些细胞没有细胞
关于细胞连接—一锚定连接的介绍
通过细胞的骨架系统将细胞或细胞与基质相连成一个坚挺、有序的细胞群体,使细胞间、细胞与基质间具有抵抗机械张力的牢固粘合。锚定连接在组织内分布很广泛,在上皮组织,心肌和子宫颈等组织中含量尤为丰富。 特点:通过肌动蛋白丝或中等纤维相连。 一锚定连接 1、参与锚定连接的骨架系统可分两种不同形式: