植物体内可溶性蛋白质含量的测定(福林-酚法)
该方法是双缩脲法的发展,包括两步反应:(1)在碱性条件下,蛋白质与铜作用生成蛋白质—铜络合物。(2)此络合物将试剂磷钼酸—磷钨酸(FolIn试剂)还原,混合物深蓝色(磷钼蓝和磷钨蓝混合物),颜色深浅与蛋白质含量成正比。此方法操作简便,灵敏度比双缩脲法高100倍,定量范围为5~100μg蛋白质。FolIn试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸、半胱氨酸引起,因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物,均有干扰作用。此方法的缺点是有蛋白质的特异性影响,即不同蛋白质因络氨酸、色氨酸含量的不同而使显色强度稍有不同,标准曲线也不是严格的直线形式。一、仪器与用具试管若干;刻度移液管05Ml 1支,1Ml 1支,10Ml 1支;定量加样器;圆底烧瓶;冷凝管1套(带橡胶管);微量滴定管;小烧杯;微量进样器50μl 1支;721分光光度计;恒温水浴器;研钵;玻棒;离心机;离心管。二、试剂Na2WO4·2H2O;Na2MoO4·2H2O;85%H3PO4;浓......阅读全文
植物体内可溶性蛋白质含量测定:考马斯亮蓝G-250染色法
【原理】 考马斯亮蓝G-250(GooMAssIe BrIllIAnT Blue G-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红色,在稀酸溶液中,当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在465nM,后者在595nM。在一定蛋白质浓度范围内(
植物体内可溶性蛋白质含量的测定:考马斯亮蓝G250染色法
【原理】 考马斯亮蓝G-250(GooMAssIe BrIllIAnT Blue G-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红色,在稀酸溶液中,当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在465nM,后者在595nM。在一定蛋白质浓度范围内(1
植物组织中可溶性糖含量测定
在作物的碳素营养中,作为营养物质主要是指可溶性糖和淀粉。它们在营养中的作用主要有:合成纤维素组成细胞壁;转化并组成其他有机物如核苷酸、核酸等;分解产物是其他许多有机物合成的原料,如糖在呼吸过程中形成的有机酸,可作为 NH 3 的受体而转化为氨基酸;糖类作为呼吸基质,为作物的各种合成过程和各种
蛋白质含量的测定:Folin酚试剂法(Lowry法)和考马斯...
蛋白质含量的测定—Folin-酚试剂法(Lowry法)和考马斯亮蓝法 1.学习Folin-酚法测定蛋白质含量的原理和方法。 2. 进一步掌握分光光度法——求标准曲线、准确测定未知样品、正确使用仪器。 原理 蛋白质浓度可以从它们
olin—酚试剂法(lowry法)测蛋白质含量
一、实验原理这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难(现在已可以订购),近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产生
植物体内硝态氮含量的测定
实验材料 植物材料试剂、试剂盒 硝态氮标准溶液氢氧化钠溶液水杨酸─硫酸溶液仪器、耗材 分光光度计天平试管吸量管容量瓶洗耳球电炉铝锅玻璃泡
植物体内硝态氮含量的测定
硝态氮是植物最主要的氮源。植物体内硝态氮含量往往能反映土壤中硝态氮供应情况,因此可作为土壤肥氮肥的指标。测定植物体内的硝态氮含量,不仅能够反映出植物的氮素营养情况,而且对鉴定蔬菜和植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。 (一)原理 在浓酸条件下,NO3-与水杨酸反应,生成硝基水杨酸
盐酸地匹福林的含量测定方法
照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品适量,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含1mg的溶液。对照品溶液取盐酸地匹福林对照品,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含1mg的溶液。色谱条件与系统适用性要求见有关物质项下测定法精密量取供试品溶液与对照品溶液,分别
植物体内多酚氧化酶活性的测定实验
实验方法原理多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶,在有氧的条件下,能使一元酚和二元酚氧化产生醌。用分光光度法在525nm波长下测其吸光度,即可计算出多酚氧化酶的活力和比活性。反应式如下:.实验材料马铃薯块茎试剂、试剂盒聚乙烯吡咯烷酮磷酸缓冲液磷酸缓冲液和度硫酸铵儿茶酚三氯乙酸仪器、耗材UV-1206UV-1
植物体内多酚氧化酶活性的测定实验
实验方法原理 多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶,在有氧的条件下,能使一元酚和二元酚氧化产生醌。用分光光度法在525nm波长下测其吸光度,即可计算出多酚氧化酶的活力和比活性。反应式如下:.实验材料 马铃薯块茎试剂、试剂盒 聚乙烯吡咯烷酮磷酸缓冲液磷酸缓冲液和度硫酸铵儿茶酚三氯乙酸仪器、耗材 UV-1206
植物体内多酚氧化酶活性的测定实验
实验方法原理多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶,在有氧的条件下,能使一元酚和二元酚氧化产生醌。用分光光度法在525nm波长下测其吸光度,即可计算出多酚氧化酶的活力和比活性。反应式如下:. 实验材料马铃薯块茎
植物体内丙二醛含量的测定实验
实验方法原理丙二醛(MDA)是由于植物官衰老或在逆境条件下受伤害,其组织或器官膜脂质发生过氧化反应而产生的。它的含量与植物衰老及逆境伤害有密切关系。测定植物体内丙二醛含量,通常利用硫代巴比妥酸(TBA)在酸性条件下加热与组织中的丙二醛产生显色反应,生成红棕色的三甲川(3、5、5-三甲基恶唑2、4-二
植物体内游离脯氨酸含量的测定
实验概要掌握小麦叶片内游离脯氨酸含量的测定方法。实验原理植物在正常条件下,游离脯氨酸含量很低,但遇到干旱、低温、盐碱等逆境时,游离脯氨酸便会大量积累,并且积累指数与植物的抗逆性有关。因此,脯氨酸可作为植物抗逆性的一项生化指标。脯氨酸是水溶性最大的氨基酸,具有很强的水合能力,其水溶液具有很高的水势。脯
植物体内丙二醛含量的测定实验
实验方法原理丙二醛(MDA)是由于植物官衰老或在逆境条件下受伤害,其组织或器官膜脂质发生过氧化反应而产生的。它的含量与植物衰老及逆境伤害有密切关系。测定植物体内丙二醛含量,通常利用硫代巴比妥酸(TBA)在酸性条件下加热与组织中的丙二醛产生显色反应,生成红棕色的三甲川(3、5、5-三甲基恶唑2、4-二
植物体内硝态氮含量的测定实验
实验方法原理在强酸条件下NO3-与水杨酸反应,生成硝基水杨酸。生成的硝基水杨酸在碱性条件下(pH>12)呈黄色,在一定范围内,其颜色的深浅与含量成正比,可直接用分光光度计测定。实验步骤一、材料仪器设备及试剂1. 材料:小麦或水稻等植物的叶片;2. 仪器设备:分光光度计;电子分析天平;10ml、20m
植物体内丙二醛含量的测定实验
实验方法原理 丙二醛(MDA)是由于植物官衰老或在逆境条件下受伤害,其组织或器官膜脂质发生过氧化反应而产生的。它的含量与植物衰老及逆境伤害有密切关系。测定植物体内丙二醛含量,通常利用硫代巴比妥酸(TBA)在酸性条件下加热与组织中的丙二醛产生显色反应,生成红棕色的三甲川(3、5、5-三甲基恶唑2、4-
植物体内硝态氮含量的测定实验
实验方法原理 在强酸条件下NO3-与水杨酸反应,生成硝基水杨酸。生成的硝基水杨酸在碱性条件下(pH>12)呈黄色,在一定范围内,其颜色的深浅与含量成正比,可直接用分光光度计测定。实验步骤 一、材料仪器设备及试剂1. 材料:小麦或水稻等植物的叶片;2. 仪器设备:分光光度计;电子分析天平;10ml、2
植物体内硝态氮含量的测定实验
实验方法原理:在强酸条件下NO3-与水杨酸反应,生成硝基水杨酸。生成的硝基水杨酸在碱性条件下(pH>12)呈黄色,在一定范围内,其颜色的深浅与含量成正比,可直接用分光光度计测定。实验步骤:一、材料仪器设备及试剂1. 材料:小麦或水稻等植物的叶片;2. 仪器设备:分光光度计;电子分析天平;10ml、2
如何检测茶叶是否合格?
根据茶叶中被曝出的问题可以看出,茶叶中经常超标的农药为有机氯农药残留,因此就需要用气相色谱法来检定茶叶中的农残含量。 传统的方法采用填充柱恒温操作,低沸点组分解易重叠,高沸点组分峰易扩展,分离效果不理想。采用电子捕获-气相色谱法(ECD-GC)OV-17中等极性毛细管柱,进行程序升温操作,组分
Folin酚试剂法测定蛋白质含量
一、 目的 掌握Folin-酚法测定蛋白质含量的原理和方法,熟悉分光光度计的操作。 二、原理 Folin-酚试剂法包括两步反应:第一步是在碱性条件下,蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物;第二步是此络合物将磷钼酸-磷钨酸试剂(Folin 试剂)还原,产生深蓝色(磷钼蓝和磷钨
folin酚试剂法测定蛋白质含量的原理
此法的显色原理与双缩脲法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产生深蓝色的原因是:在碱性条件下,蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物。 Folin—酚试剂中的磷钼酸盐—磷钨酸盐被蛋白质中的酪氨酸和苯丙氨酸残基还原,产生深蓝色(
Bradford法蛋白质含量的测定
原理:这一方法基于考马斯亮蓝G-250 有红蓝两种不同的形式。在一定浓度的乙醇及酸性条件下,可配成淡红色的溶液,当与蛋白质结合后,产生蓝色化合物,反应迅速而稳定。反应化合物在 465-595nm处有最大的光吸收值,化合物颜色的深浅与蛋白浓度的高低成正比关系,因此可检测595nm的光吸收值的大
盐酸地匹福林滴眼液的含量测定方法
照高效液相色谱法(通则0512)测定供试品溶液取本品,即得。对照品溶液、色谱条件、系统适用性要求与测定法见盐酸地匹福林含量测定项下。
酚试剂(Lowry)法测血清蛋白质含量
一、 相关理论1、 血清(浆)蛋白质是血清(浆)固体成分中含量最多、组成复杂、功能广泛的一类化和物。2、 血清(浆)蛋白质的分类:目前已研究的有300 余种,已分离提纯的有100 余种,大部分在肝脏合成。1) 盐析法可将血浆蛋白分为白蛋白(Albumin, Alb 或A)和球蛋白(Globulin,
生物酶在食品行业应用蛋白酶的活力测定
蛋白酶的种类繁多,不同的蛋白酶的性质和催化反应条件各不相同,无法规定一个统一的测定方法,目前使用最多的有福林—酚法、紫外分光光度法、甲醛滴定法、DHT-酪蛋白法。 1、福林酚法 蛋白酶催化蛋白质水解成氨基酸,其中含酚基的氨基酸(色氨酸、酪氨酸)与福林试剂反应,生成蓝色复合物,蓝色深浅与含酚基
蛋白酶的活力测定方法介绍
蛋白酶的种类繁多,不同的蛋白酶的性质和催化反应条件各不相同,无法规定一个统一的测定方法,使用最多的有福林—酚法、紫外分光光度法、甲醛滴定法、DHT-酪蛋白法。1福林酚法蛋白酶催化蛋白质水解成氨基酸,其中含酚基的氨基酸(色氨酸、酪氨酸)与福林试剂反应,生成蓝色复合物,蓝色深浅与含酚基氨基酸的多少成正比
蛋白酶的活力测定
蛋白酶的种类繁多,不同的蛋白酶的性质和催化反应条件各不相同,无法规定一个统一的测定方法,目前使用最多的有福林—酚法、紫外分光光度法、甲醛滴定法、DHT-酪蛋白法。1 福林酚法蛋白酶催化蛋白质水解成氨基酸,其中含酚基的氨基酸(色氨酸、酪氨酸)与福林试剂反应,生成蓝色复合物,蓝色深浅与含酚基氨基酸的多少
蛋白酶的活力测定方法介绍
蛋白酶的种类繁多,不同的蛋白酶的性质和催化反应条件各不相同,无法规定一个统一的测定方法,目前使用最多的有福林—酚法、紫外分光光度法、甲醛滴定法、DHT-酪蛋白法。1 福林酚法蛋白酶催化蛋白质水解成氨基酸,其中含酚基的氨基酸(色氨酸、酪氨酸)与福林试剂反应,生成蓝色复合物,蓝色深浅与含酚基氨基酸的多少
植物组织中总氮、蛋白质氮含量的测定(微量凯氏法)
氮素代谢在植物 的新陈代谢中占主导地位。植物组织中有机氮化物的含量随着植物的生理状况及环境条件的不同而发生变化。所以测定其含量,对研究植物的氮素吸收、运输和代谢规律,以及确定农产品的品质、营养价值等具有一定意义。 一、原理 植物组织中的有机氮化物包括蛋白氮和非蛋白氮。非蛋白氮主要是氨基
植物体内氧自由基含量的测定实验
实验方法原理在生物体中,氧作为电子传递的受体,得到单电子时,生成超氧阴离子自由基(O2-)。利用羟胺氧化的方法可以测定生物系统中O2-含量。O2-与羟胺反应生成NO2-,NO2-在对氨基苯磺酸和α-萘胺的作用下,生成粉红色的偶氮染料(对-苯磺酸-偶氮-α-萘胺)。取生成物在530nm波长处测定吸光度