蛋白质的定量测定——微量凯氏定氮法(microKjeldahlmethod)
实验原理生物材料的含氮量测定在生物化学研究中具有一定的意义，如蛋白质的含氮量约为16％，测出含氮量则可推知蛋白含量。生物材料总氮量的测定，通常采用微量凯氏定氮法。凯氏定氮法由于具有测定准确度高，可测定各种不同形态样品等两大优点，因而被公认为是测定食品、饲料、种子、生物制品、药品中蛋白质含量的标准分析方法。其原理如下：1. 消化：有机物与浓硫酸供热，使有机氮全部转化为无机氮——硫酸铵。为加快反应，添加硫酸铜和硫酸钾的混合物；前者为催化剂，后者可提高硫酸沸点。这一步约需30min至1h，视样品的性质而定。2. 加碱蒸馏：硫酸铵与NaOH(浓)作用生成(NH4)OH, 加热后生成NH3, 通过蒸馏导入过量酸中和生成NH4Cl而被吸收。3. 滴定：用过量标准HCl吸收NH3，剩余的酸可用标准NaOH滴定，由所用HCl摩尔数减去滴定耗去的NaOH摩尔数，即为被吸收的NH3摩尔数。此法为回滴法，采用甲基红卫指示剂。HCl＋NaOHNaCl ......阅读全文
蛋白质的定量测定——微量凯氏定氮法(micro－Kjeldahl－method)
实验原理生物材料的含氮量测定在生物化学研究中具有一定的意义，如蛋白质的含氮量约为16％，测出含氮量则可推知蛋白含量。生物材料总氮量的测定，通常采用微量凯氏定氮法。凯氏定氮法由于具有测定准确度高，可测定各种不同形态样品等两大优点，因而被公认为是测定食品、饲料、种子、生物制品、药品中蛋白质含量的标准分析
食品中蛋白质含量测定（凯氏定氮法，Kjeldahl－Method）
一、目的与要求1、学习凯氏定氮法测定蛋白质的原理。2、掌握凯氏定氮法的操作技术，包括样品的消化处理、蒸馏、滴定及蛋白质含量计算等。二、实验原理蛋白质是含氮的化合物。食品与浓硫酸和催化剂共同加热消化，使蛋白质分解，产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵，留在消化液中，然后加碱蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后，再用盐酸
粗蛋白的定量测定—微量凯氏定氮法
一、实验目的1.掌握凯氏定氮法测定蛋白质含量的原理和方法。2.学会使用凯氏定氮仪。二、实验原理蛋白质是由碳、氢、氧、氮及少量硫元素组成。这些元素在蛋白质中含量都有一定比例关系，其中含碳50～55%、氢6～8%、氧20～23%、氮15～17%和硫0.3～2.5%。此外在某些蛋白质中还含有微量的磷、铁、
蛋白质定量检测方法——凯氏定氮法
凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下，用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为氨，随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收，再以标准盐酸滴定，就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定，可由其氮量计算蛋白质含量，故此法是经典的蛋白质定
A－Method－for－MicroScale－Isolation－and－Purification－of－Gangliosides
A Method for Micro-Scale Isolation and Purification of GangliosidesStephan Ladisch~Director, Center for Cancer and Transplant Biology, Children's
蛋白质测定仪在牛奶蛋白质测定中的应用
蛋白质测定仪可以对牛奶（包括纯奶、核桃、燕麦、红枣牛奶、牛初乳）、奶粉（包括牛初乳粉）、豆粉、豆奶粉和鸡蛋等样品中蛋白质含量的测定。适用于乳制品质监站、产品质 量监督检验所、农产品检测中心、畜牧水产品检测站、出入境检验检疫局、工商、卫生等部门对牛奶、奶粉、豆粉、豆奶粉及鸡蛋等样品中蛋白质的快速定量检
蛋白质的测定凯氏定氮法
1)原理样品与硫酸和催化剂一同加热后消化,使蛋白质分解,其中的碳和氢分别被氧化成二氧化碳和水蒸气逸出,而有机氮转化成氨后与硫酸结合生成硫酸铵,然后在碱性条件下蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后再用硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,即得蛋白质含量。以甘氨酸为例,该过程的反应方程式如下:消化
微量凯氏定氮法测定食品中蛋白质
1)原理同常量凯氏定氮法。2)主要仪器①凯氏烧瓶(100mL)。②微量凯氏定氮蒸馏装置3)试剂①0.0100mol/L盐酸标准溶液。②20g/L硼酸吸收液:称取20g硼酸溶解于1000mL热水中,摇匀备用。③其他试剂同常量凯氏定氮法。4)操作方法(1)样品消化 精密称取均匀固体样品0.2～2.
用微量凯氏定氮法对粗蛋白的测定
一、实验目的 1.掌握凯氏定氮法测定蛋白质含量的原理和方法。 2.学会使用凯氏定氮仪。 二、实验原理 蛋白质是由碳、氢、氧、氮及少量硫元素组成。这些元素在蛋白质中含量都有一定比例关系，其中含碳50～55%、氢6～8%、氧20～23%、氮15～17%和硫0.3～2.5%。此外在某些蛋白质中
蛋白质定量/蛋白质含量的测定(LOWRY法)
实验概要运用LOWRY法测定蛋白质的含量。实验原理Lowry法是双缩脲法和福林酚法的结合与发展，其原理是：蛋白质溶液用碱性铜溶液处理，形成铜-蛋白质的络合盐，再加入酚试剂后，除使肽链中酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸等显色外，还使双缩脲法中肽键、碱性铜的显色效果更强烈。因此，Lowry法的显色效果比单独使用
凯氏定氮法如何测定蛋白质的含量
（一）消化 1、准备6个凯氏烧瓶，标号。1、2、3号烧瓶中分别加入适当浓度的蛋白溶液1.0mL，样品要加到烧瓶底部，切勿沾在瓶口及瓶颈上。再依次加入硫酸钾-硫酸铜接触剂0.3g，浓硫酸2.0mL，30%过氧化氢1.0mL。4、5、6号烧瓶作为空白对照，用以测定试剂中可能含有的微量含氮物质，对样品测
蛋白质的测定方法之凯氏定氮法
一 凯氏定氮法这种方法是1883年Kjeldahl发明，当时凯氏只使用H2SO4来分解试样，来定量谷物中的pro，他只知用H2SO4分解试样，而不能阐明H2SO4分解有机氮化合物生成氨的反应历程，所以只使用H2SO4分解试样，需要较长时间，后来由Gunning加入改进，他改进的办法是在消化时加入K
微量凯氏定氮法测定食品中蛋白质方法原理
样品与硫酸和催化剂一同加热后消化,使蛋白质分解,其中的碳和氢分别被氧化成二氧化碳和水蒸气逸出,而有机氮转化成氨后与硫酸结合生成硫酸铵,然后在碱性条件下蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后再用硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,即得蛋白质含量。以甘氨酸为例,该过程的反应方程式如下:消化 2
改良微量凯氏定氮法测定血清蛋白质总量
实验概要改良微量凯氏定氮法测定血清蛋白质总量实验原理 蛋白质是机体内主要的含氮物质，而且氮元素的含量相当恒定，一般为16％，其它非蛋白质的含氮化合物所占的氮量甚微。因此，测定生物样品的含氮量，即可推算蛋白质含量。 测定生物样品中的含氮量，最常用的方法是凯氏定氮法，本实验采
微量凯氏定氮法测定食品中蛋白质的方法介绍
微量凯氏定氮法1)原理同常量凯氏定氮法。2)主要仪器①凯氏烧瓶(100mL)。②微量凯氏定氮蒸馏装置3)试剂①0.0100mol/L盐酸标准溶液。②20g/L硼酸吸收液:称取20g硼酸溶解于1000mL热水中,摇匀备用。③其他试剂同常量凯氏定氮法。4)操作方法(1)样品消化 精密称取均匀固体样
蛋白质测定仪法与凯氏定氮法的对比
采用凯氏定氮法检测蛋白质，此法由人工操作，比较费时，检测结果的准确性容易受人为因素影响，现国际上普遍采用蛋白质测定仪检测蛋白质。同凯氏法相比蛋白质测定仪具有自动、省时、准确的优点。凯氏定氮法与蛋白质测定仪法的原理一样，不同在处在于前者使用经典凯氏定氮烧瓶及定氮蒸馏装置进行样品消化和蒸馏，手工滴定计算
原位微量BCA蛋白定量法
简述：传统标准的BCA蛋白定量分析方法常规均使用试管或者微孔板进行检测，通过对传统方法进行改进，可使用BioTek公司的Take3TM 超微量多体积检测板进行原位微量BCA法蛋白定量分析。待测蛋白样品和BCA工作缓冲液按照顺序直接加在Take3TM板的微量定量孔处、温浴，使用EpochTM
微量凯氏定氮法测定食品中蛋白质注意事项
①蒸馏前给水蒸气发生器内装水至2/3体积处,加甲基橙指示剂数滴及硫酸数毫升,以使其始终保持酸性,这样可以避免水中的氨被蒸出而影响测定结果,同时可以指示因水蒸气气压不足而使氨气发生倒吸溶于水中,使得测定结果偏低。②在蒸馏时,蒸汽发生要均匀充足,蒸馏过程中不得停火断汽,否则将发生倒吸。③加碱要足量,操作
微量凯氏定氮法测定食品中蛋白质仪器和试剂
主要仪器①凯氏烧瓶(100mL)。②微量凯氏定氮蒸馏装置试剂①0.0100mol/L盐酸标准溶液。②20g/L硼酸吸收液:称取20g硼酸溶解于1000mL热水中,摇匀备用。③其他试剂同常量凯氏定氮法。
微量凯氏定氮法测定食品中蛋白质操作方法
(1)样品消化 精密称取均匀固体样品0.2～2.0g,或半固体样品2～5g或吸取液体样品10～20mL,小心移入100mL干燥的凯氏烧瓶中。向瓶内加入0.2g硫酸铜、3g硫酸钾及一定量的浓硫酸(每克样品加硫酸15mL)将凯氏烧瓶45°倾斜置于电炉上。同常量法消化至消化液呈透明蓝绿色溶液时,再继
微量凯氏定氮法测定食品中蛋白质计算公式
计算式中 w——蛋白质的质量分数,%; V0——滴定空白蒸馏液消耗盐酸标准液体积,mL; V1——滴定样品蒸馏液消耗盐酸标准液体积,mL; c——盐酸标准液的浓度,mol/L; 0.014——氮的摩尔质量,g/mo
测定蛋白质含量只有凯氏定氮法吗
当然不是一、微量凯氏（kjeldahl）定氮法样品与浓硫酸共热。含氮有机物即分解产生氨（消化），氨又与硫酸作用，变成硫酸氨。经强碱碱化使之分解放出氨，借蒸汽将氨蒸至酸液中，根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。若以甘氨酸为例，其反应式如下：nh2ch2cooh+3h2so4——2co2+3so
蛋白质含量测定法凯氏定氮法
本法系依据蛋白质为含氮的有机化合物，当与硫酸和硫酸铜、硫酸钾一同加热消化时使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸液吸收后以硫酸滴定液滴定，根据酸的消耗量算出含氮量，再将含氮量乘以换算系数，即为蛋白质的含量。 本法灵敏度较低，适用于0.2～2.0mg氮的测定。氮
蛋白质含量的定量测定——双缩脲法（Biuret法）
实验原理具有两个或两个以上肽键的化合物皆有双缩脲反应。在碱性溶液中双缩脲与铜离子结合形成复杂的紫好色复合物。而蛋白质及多肽的肽键与双缩脲的结构类似，也能与Cu2+形成紫红色络合物，其最大光吸收在540nm处。其颜色深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质的分子量及氨基酸的组成无关，该法测定蛋白质的浓度范围
蛋白质的定量测定——福林酚法(Folin—酚试剂法)
实验原理 Folin—酚试剂法最早是由Lowry确定的测定蛋白质浓度的基本方法。以后在生物化学领域得到广泛的应用。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的，只是加入了第二种试剂，即Folin—酚试剂，以增加显色量，从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这个方法的优点是灵敏度高，比双缩脲法灵敏得多，缺点是费时较
高效液相色谱法快速检测酸奶蛋白饮料中三聚氰胺
三聚氰胺是一种亲水性很强的小分子，在传统的反相色谱中不被保留，无法与其他物质分离。 该方法的原理是用水和乙腈提取样品中的三聚氰胺，然后用高效液相色谱法测定，用外标法定量。标准工作曲线的相关系数为r: 0.99998 精密度试验的相对标准偏差为0.3％，标准加入回收率为98.37±9975
凯氏定氮法对食品中蛋白质含量的测定
实验概要本实验用凯氏定氮法（Kjeldahl Method）测定了食品中蛋白质含量，目的学习凯氏定氮法测定蛋白质的原理，掌握凯氏定氮法的操作技术，包括样品的消化处理、蒸馏、滴定及蛋白质含量计算等。实验原理蛋白质是含氮的化合物。食品与浓硫酸和催化剂共同加热消化，使蛋白质分解，产生的氨与硫酸结合生成硫酸
蛋白质定量/蛋白质含量的测定(考马斯亮蓝法)
实验概要运用考马斯亮蓝法测定蛋白质的含量。实验原理考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离态下呈红色，当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色，前者最大光吸收在465nm，后者在595nm。在一定蛋白质浓度范围内（0～100μg/ml），蛋白质－色素结合物在595
选用凯氏定氮仪需要考虑哪些问题选择
蛋白质定量法虽然很多，但至今仍将19世纪末丹麦化学家凯道尔发现的凯氏定氮法作为法定的标准方法。 在众多测定方法中，因为凯氏定氮法校准方法方便、快捷、准确。在各种定量法中仍占重要地位，当报道一种新方法时，通常是将新法测定的结果同凯氏法相比较，并探讨其相关性。凯氏定氮法又根据仪器装置、样品与试
药物疫苗中蛋白检测的TN分析法
背景介绍在药物疫苗生产中，需要对起始、中间和最终产品的抗原水平进行控制。用以检测衰减或失活的病毒或细菌数量。由于这些抗原通常由蛋白质组成，总蛋白的分析定量是一种可选方法。《药典》规定了许多相关方法，其中包括几种紫外/可见分光光度法（如Lowry法、Bradford法、BCA法）以及两种总氮法，即凯氏