DNA的细胞化学反应——Feulgen反应

实验概要 1、了解Feulgen反应的基本原理。 2、熟悉传统细胞化学实验的基本实验技能和操作方法。实验原理 Feulgen反应是1924年由Feulgen和Rossenbeck开创的。这一反应的原理是:DNA经酸(1mol/LHCL)水解,其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开,使脱氧核糖的一端形成游离的醛基,这些醛基在原位与Schiff试剂(无色品红亚硫酸溶液)反应,形成紫红色的化合物,使细胞内含有DNA的部位呈紫红色阳性反应。所以,凡有DNA的部位,会呈现紫红色阳性反应,可以作为定性研究DNA的一种简便方法。紫红色的产生,是由于反应产物的分子内含有醌基,醌基是一个发色团,所以具有颜色。对照组预先用热三氯醋酸或DNA酶处理,抽提去细胞中的DNA而得到阴性反应,从而证明了Feulgen反应的专一性。主要试剂1、Carnoy固定液:3份95%酒精加入1份冰醋酸,混合即可。2、1mol/LHCL:准确量取......阅读全文

DNA的Feulgen染色法

1.目的与原理 实验目的: 学习DNA的Feulgen染色方法,观察染色结果,了解反应原理。 实验原理: DNA经弱酸(1mol/L HCl)水解,其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开,使脱氧核糖的一端形成游离的醛基,这些醛基在原位与Schiff试剂(无色品红亚

DNA的Feulgen染色法

1.目的与原理实验目的:学习DNA的Feulgen染色方法,观察染色结果,了解反应原理。实验原理:DNA经弱酸(1mol/L HCl)水解,其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开,使脱氧核糖的一端形成游离的醛基,这些醛基在原位与Schiff试剂(无色品红亚硫酸溶液)反应,形成紫红色的化合物,使细胞内含有

有丝分裂(Feulgen染色法)

实验原理:细胞中的DNA受1NHC1,60℃水解作用以后,核酸中的嘌呤碱很快完全被除掉,使脱氧核糖中潜在的醛基获得自由状态。水解后,组织要经水洗再移至希夫(Schiff)试剂中,希夫试剂即同露出来的醛基发生反应,呈现紫红色。这个反应是Feulgen在1942年提出来的,是DNA的一个特异性检查法。 

有丝分裂(Feulgen染色)制片技术

实验概要 1、通过本实验的学习,初步掌握植物染色体制片,奠定细胞遗传学研究的基本技术; 2、通过对植物根尖细胞的观察,掌握有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化; 3、掌握Feulgen染色方法。 实验原理 有丝分裂(mitosis)是植物

DNA的Feulgen染色法

1.目的与原理实验目的:   学习DNA的Feulgen染色方法,观察染色结果,了解反应原理。实验原理:   DNA经弱酸(1mol/L HCl)水解,其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开,使脱氧核糖的一端形成游离的醛基,这些醛基在原位与Schiff试剂(无色品红亚硫酸溶液)反应,形成紫红色的化合物,

有丝分裂(Feulgen染色)制片技术

实验概要1、通过本实验的学习,初步掌握植物染色体制片,奠定细胞遗传学研究的基本技术; 2、通过对植物根尖细胞的观察,掌握有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化; 3、掌握Feulgen染色方法。实验原理有丝分裂(mitosis)是植物细胞分裂的主要方式,细胞分裂过程中,核内染色体准确地复制,并有规

DNA的细胞化学反应——Feulgen反应

实验概要 1、了解Feulgen反应的基本原理。 2、熟悉传统细胞化学实验的基本实验技能和操作方法。实验原理 Feulgen反应是1924年由Feulgen和Rossenbeck开创的。这一反应的原理是:DNA经酸(1mol/LHCL)水解,其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开,使脱氧核糖的一端形成游

原代细胞富尔根(Feulgen)反应显示DNA

基本原理:显示DNA的传统方法是富尔根(Feulgen)反应,切片先用稀盐酸处理,DNA经弱酸(1mol/L HCL)水解后,在60℃条件下使DNA分子中脱氧核糖与嘌呤之间的连接打开,脱氧核糖的一端释放出醛基,并在原位与Schiff试剂反应生成紫红色产物。原理同PAS反应,使细胞核DNA显紫红色

原代细胞富尔根(Feulgen)反应显示DNA

原代细胞富尔根(Feulgen)反应显示DNA 基本原理:显示DNA的传统方法是富尔根(Feulgen)反应,切片先用稀盐酸处理,DNA经弱酸(1mol/L HCL)水解后,在60℃条件下使DNA分子中脱氧核糖与嘌呤之间的连接打开,脱氧核糖的一端释放出醛基,并在原位与Schiff试剂反应生成紫红

培养细胞的染色实验——Feulgen染色法

实验方法原理此染色法为Feulgen早在1924年提出的一种鉴别细胞中DNA的组织化学方法。细胞中的DNA在60 ℃用1 N HCl酸解离脱氧核糖核酸,使嘌呤碱基与糖苷犍破坏,嘌呤碱脱掉,脱氧核糖的中的醛基游离;醛基能与Schiff试剂相结合,形成一种紫色的复合物。本方法中酸的离解根重要,若温度过低

DNA的细胞化学――孚尔根反应(二)

(注意: 这个步骤非常重要,必须用1 mol/L稀盐酸冲洗,因为它可以洗去贴在切片上的试剂的痕迹。如用蒸馏水冲洗,则试剂本身也可以水解,所释放出的碱性品红,可以使切片内一切嗜碱性物质皆染色从而引起严重的错误。若切片较厚,可延长其水解时间,而且每次均需更换洗涤剂) ↓ 蒸馏水冲洗3

DNA的细胞化学――孚尔根反应(二)

(注意: 这个步骤非常重要,必须用1 mol/L稀盐酸冲洗,因为它可以洗去贴在切片上的试剂的痕迹。如用蒸馏水冲洗,则试剂本身也可以水解,所释放出的碱性品红,可以使切片内一切嗜碱性物质皆染色从而引起严重的错误。若切片较厚,可延长其水解时间,而且每次均需更换洗涤剂)↓蒸馏水冲洗3次(使水解停止)↓S

DNA的细胞化学――孚尔根反应(一)

Feulgen反应(Feulgen reaction)是显示DNA的最典型的组织化学反应,为学者Feulgen和Rossenbeck于1924年发明,简称为Feulgen法。因对 DNA的显示反应具有高度专一性,故常被用来显示细胞内DNA的分布情况。 1.实 验 目 的

DNA的细胞化学――孚尔根反应(一)

Feulgen反应(Feulgen reaction)是显示DNA的最典型的组织化学反应,为学者Feulgen和Rossenbeck于1924年发明,简称为Feulgen法。因对 DNA的显示反应具有高度专一性,故常被用来显示细胞内DNA的分布情况。1.实 验 目 的1.1. 熟悉并掌握Feulge

DNA显示和细胞有丝分裂相的观察

核酸是生物最重要的组成成分,核酸分为两大类,即脱氧河塘核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。它们在细胞内的分布及化学性质均有所不同。DNA主要分布在核的染色质或有丝分裂过程中出现的染色体内。RNA分布在细胞质和核仁内。但在染色质及染色体中也含有少量的RNA,核仁中也有少量的DNA。在线粒体,叶绿体等细

细胞组分的分析方法——定量细胞化学分析技术2

5.固定方法(1)福尔马林法:  在单细胞悬液中加入等体积含8%甲醛的盐水G,4℃下固定12至18小时。该法常用于Acriflavine-Feulgen染色。(2)乙醇法:  细胞被重新悬浮于5ml冷盐水G中,慢慢加入-20℃95%的乙醇15ml,其最终浓度为70%,冰浴30分钟。此法常用于EB及P

什么是“组织化学”

组织化学是指以常用的组织化学技术,对细胞内主要化学成分和活性的粗略(一般性)的研究.概要介绍如下:一,______ 核酸(DNA和RNA)(一)__ 化学特性1.分布: DNA (细胞核内)RNA(核仁10% ;细胞质-核糖体90%)2. 分子结构:戊糖 + 磷酸 + 碱基特点:① 大量的磷酸基团→

显示细胞色素的显色方法介绍

1. 金属沉淀法:利用金属化合物在反应过程中生成有色沉淀,借以辨认所检查的物质或酶活性。如磷酸酶分解磷酸酯底物后,反应产物最终生成CoS 或PbS有色沉淀,而显示出酶活性。2. 偶氮偶联法:酚类化合物与偶氮染料结合后可以形成耐晒染料。3. Schiff 反应:细胞中的醛基可使Schiff 试剂中的无

细胞化学技术常用显示方法

1. 金属沉淀法:利用金属化合物在反应过程中生成有色沉淀,借以辨认所检查的物质或酶活性。如磷酸酶分解磷酸酯底物后,反应产物最终生成CoS 或PbS有色沉淀,而显示出酶活性。2. 偶氮偶联法:酚类化合物与偶氮染料结合后可以形成耐晒染料。3. Schiff 反应:细胞中的醛基可使Schiff 试剂中的无

Autoradiography

MaterialsH-Thymidine, specific activity of 2.0curie/millimoleOnion sets, jars and toothpicksAlcohol-acetic acid fixativeMaterials for feulgen reaction

拟核的结构特点

细菌细胞具有原始的核,没有核膜,更没有核仁,结构简单,为了与真核细胞中典型的细胞核有所区别,称为核区(nuclearregion)、拟核(nucleoid)或原始核(primitive form nucleus),亦称细菌染色体。大肠杆菌基因组为双链环状的DNA分子,在细胞中以紧密缠绕成的较致密的不

关于核质的基本介绍

  细菌细胞具有原始的核,没有核膜,更没有核仁,结构简单,为了与真核细胞中典型的细胞核有所区别,称为核区(nuclearregion)、拟核(nucleoid)或原始核(primitive form nucleus),亦称细菌染色体。  大肠杆菌基因组为双链环状的DNA分子,在细胞中以紧密缠绕成的较

细胞生物学名词解释(一)

1. 细胞(cell)细胞是由膜包围着含有细胞核(或拟核)的原生质所组成, 是生物体的结构和功能的基本单位, 也是生命活动的基本单位。细胞能够通过分裂而增殖,是生物体个体发育和系统发育的基础。细胞或是独立的作为生命单位, 或是多个细胞组成细胞群体或组织、或器官和机体;细胞还能够进行分裂和繁殖

微生物拟核体内体外染色观察实验_富尔根氏染色法

实验方法原理富尔根氏(Feulgen)染色法是根据席夫氏(Schiff)试剂进行的反应而建立的微生物拟核染色法。席夫氏试剂含有碱性复红和亚硫酸,碱性复红与亚硫酸结合后,失去醌式结构而变为无色。当 DNA 经酸作用而生成的醛化合物与席夫氏试剂结合后,使醌式结构恢复,合成一种带紫红色的碱性复红衍生物。此

微生物拟核体内体外染色观察实验

实验方法原理 富尔根氏(Feulgen)染色法是根据席夫氏(Schiff)试剂进行的反应而建立的微生物拟核染色法。席夫氏试剂含有碱性复红和亚硫酸,碱性复红与亚硫酸结合后,失去醌式结构而变为无色。当 DNA 经酸作用而生成的醛化合物与席夫氏试剂结合后,使醌式结构恢复,合成一种带紫红色的碱性复红衍生

原核细胞的拟核和其他结构的介绍

  拟核  拟核(nucleoid)存在于原核生物,是没有由核膜包被的细胞核,只有一个位于形状不规则且边界不明显区域的环形DNA分子,核区没有强的Feulgen阳性反应,但是人们沿用了真核细胞的染色体概念,也把细胞的核区DNA称为染色体,实际上它没有真正的染色体结构 。内含遗传物质。里面的核酸为双股

培养细胞的染色实验

Giemsa染色法 苏木精伊红染色法 Feulgen染色法 吖啶橙染色荧光观察法             实验方法原理 Giemsa 染色是最常用的方法

有丝分裂实验

实验原理:细胞中的DNA受1NHC1,60℃水解作用以后,核酸中的嘌呤碱很快完全被除掉,使脱氧核糖中潜在的醛基获得自由状态。水解后,组织要经水洗再移至希夫(Schiff)试剂 中,希夫试剂 即同露出来的醛基发生反应,呈现紫红色。这个反应是Feulgen在1942年提出来的,是DNA的一个特异性检

拟核的含义介绍

  细菌细胞具有原始的核,没有核膜,更没有核仁,结构简单,为了与真核细胞中典型的细胞核有所区别,称为核区(nuclearregion)、拟核(nucleoid)或原始核(primitive form nucleus),亦称细菌染色体。  大肠杆菌基因组为双链环状的DNA分子,在细胞中以紧密缠绕成的较

拟核的基本内容简介

  细菌细胞具有原始的核,没有核膜,更没有核仁,结构简单,为了与真核细胞中典型的细胞核有所区别,称为核区(nuclearregion)、拟核(nucleoid)或原始核(primitive form nucleus),亦称细菌染色体。  大肠杆菌基因组为双链环状的DNA分子,在细胞中以紧密缠绕成的较