如何充分脱蜡?

(1)蜡不溶于水,如果脱蜡不干净,少许蜡存留于切片上,将会引起染色不均匀、阳性物时隐时现、真假难辨、背景染色增加等。为了解决上述的问题,切片在染色前必须彻底脱蜡,目前用于脱蜡的试剂主要是二甲苯,因它脱蜡力强,脱蜡时间较短;(2)脱蜡的时间要根据季节,室温和试剂的新鲜谋面是在不同。如果在夏天,室温较高,脱蜡试剂也新鲜,则脱蜡时间不需很多,3-5分钟就已足够。如果在冬天,室温较低,脱蜡试剂也较陈旧,则脱蜡时间需要延长,10-20分钟或更长。(3)当天切的切片,烧烤2小时后进行染色,切片带有温度进行脱蜡这将可加速脱蜡的过程,如果预先切好烤好的切片,在染色前,还必须对切片进行加温 10-20分钟,然后再行脱蜡,这样脱蜡速度加快,效果魁伟更好。总之,操作时应根据不同的季节,不同的室温,不同的试剂来决定,脱蜡的时间,原则上是要彻底、干净、完全地脱去切片上的蜡。......阅读全文

如何充分脱蜡?

(1)蜡不溶于水,如果脱蜡不干净,少许蜡存留于切片上,将会引起染色不均匀、阳性物时隐时现、真假难辨、背景染色增加等。为了解决上述的问题,切片在染色前必须彻底脱蜡,目前用于脱蜡的试剂主要是二甲苯,因它脱蜡力强,脱蜡时间较短;(2)脱蜡的时间要根据季节,室温和试剂的新鲜谋面是在不同。如果在夏天,室温较高

切片制作流程中脱蜡至水包括哪些环节

取材,固定,脱水,透明,透蜡,包埋,切片,贴片,染色,透明,封藏等步骤。石蜡切片操作步骤:1、取材2、固定3、脱水:30%--50%---70%(每步60分钟)---85%---95%--100%---100%(每步30钟)。4、透明:转入1/2二甲苯+1/2无水酒精混合液20ml透明1h,纯二甲苯

美借助“脱蜡铸造工艺”打印出三维脉管系统

  组织工程和再生医学领域不断取得新进展,人们希望有一天能用病人自己的细胞,培养出各种人造器官,把病坏器官替换下来;或者培养出动物肌肉来做牛排,而不再杀牛取排。生物工程师们已经能在二维层面培养出任何一种组织类型,但要跨越到三维,还面临着不小的障碍。如果让大量细胞简单地堆在一起,没有合理的内部结构,它

一步脱蜡法在FFPE样本DNA提取中的应用

什么是FFPE福尔马林固定石蜡包埋技术(Formalin-Fixed and Parrffin-Embedded, FFPE)是一种组织保存技术。这种技术为了维持细胞核蛋白结构,先用福尔马林固定然后将组织用固体石蜡包埋,以供切片后作组织学诊断或研究使用。FFPE技术的应用福尔马林由于可以与蛋白氨基发

关于米糠油的物理精炼提练法介绍

  物理精炼以其比较简单的工艺流程,可直接获得质量高的精炼油和副产品脂肪酸,而且原辅材料节省,没有废水污染,产品稳定性好,精炼率高等优点,越来越引起人们的关注。尤其对高酸值油脂,其优越性更加显著。它包括蒸馏前的预处理和蒸馏脱酸两个阶段。由于预处理对物理精炼油的质量起着决定性作用。近几年来对米糠油的物

做好免疫组化染色必须注意的问题(二)

四、切片的附贴必须牢固,必须使用合适的粘贴剂。免疫组织化学染色前的前期准备工作,就是必须对新的载玻片进行处理,新的载玻片表面看起来很干净,有人认为不需要进行任何的处理,都能够适合使用,这是一种错误的想法。新出厂的载玻片,表面复盖着开一层油脂样的物质,如果不加以处理,对切片的附贴是极为不利的。我们的做

关于特殊染色的注意事项介绍

  1、染色前:  ①切出的石蜡切片要好,不能有皱褶或者刀痕,切片不能太厚。  ②捞片时,最好一张玻片捞一个组织,组织最好位于玻片的中间,美观的同时也利于脱蜡(有时二甲苯的液面低于组织片的时候,达不到脱蜡的目的)。  ③石蜡切片脱蜡到水时,一定要注意组织切片脱蜡务必要彻底(脱蜡时间不能太少)以使脱蜡

简述米糠油的混合油精炼法

  C.Bhattacharryaetal[16]采用混合油脱蜡和混合油碱炼法将高FFA含量的米糠油精炼成不皂化物含量低、色泽浅的烹调油进行了探讨。FFA含量分别为15?3%、20?5%和30?2%的毛糠油用磷酸在油相中脱胶后,用氯化钙和表面活性剂在15±1℃,在己烷相中进行脱蜡、结晶在实验室用离心

简述米糠油的硅胶脱色法

  米糠经溶剂浸出制得的米糠油,其色泽呈暗棕色、暗绿褐色或绿黄色,这主要取决于米糠贮存中的变质程度、制油方法和加工条件。一般来说,米糠油的深色经脱色不能完全除去,生产清澈透明和色浅的米糠油较困难。A.G.GopalaKrishno[12]采用硅胶对米糠油脱色进行研究,采用硅胶柱渗滤脱色和硅胶同混合油

抗原修复的作好免疫组化染色必须注意的问题

I、为达到免疫组织化学技术的要求,组织固定越新鲜越好。在免疫组化最后结果的判断时,常可见到均匀一片的似非特异性染色的现象,经多方研究认为,它是一种假性非特异性的染色。因为肿瘤组织中含有的抗原较易发生扩散弥散,肿瘤细胞无限制的生长和生长过速,导致肿瘤中间部分组织血液供给困难,造成缺血坏死,坏死细胞中的

抗原修复方法

至今为止,抗原修复有许多种方法,在这些方法中,有的是根据抗体的要求来进行,有的是根据抗原的表达程度来进行,我们则对每种病例每项检测,都要求必须进行抗原修复,以达到抗原全面表达的*佳状态。 1.  真空负压抗原修复法: ① 切片脱蜡至水。 ②0.3%H2O2甲醇真空负压处理5分钟。 ③自来水洗,蒸馏水

石蜡切片黑色素去色(bleach)试剂盒使用说明

主要用途YIJI石蜡切片黑色素去色(bleach)试剂是一种旨在使用标准化的化学分离石蜡方法的基础上,通过氧化剂处理,使黑色素由棕色变成无色,来识别存档中的石蜡包埋组织切片中黑色素成分的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良传统方法、成功实验证明的。主要适用于各种石蜡包埋组织切片中的黑色素成分,尤

石蜡切片黑色素去色(bleach)试剂盒

  石蜡切片黑色素去色(bleach)试剂盒产品说明书(中文版)   主要用途   YIJI石蜡切片黑色素去色(bleach)试剂是一种旨在使用标准化的化学分离石蜡方法的基础上,通过氧化剂处理,使黑色素由棕色变成无色,来识别存档中的石蜡包埋组织切片中黑色素成分的权威而经典的技术方法。该技术经过精

普鲁士蓝染色液(核固红法)使用说明

含铁血黄素(Hemosiderin)是一种血红蛋白源性色素,为金黄色或棕黄色颗粒,因其含铁,且为金黄色,故称为含铁血黄素。当红细胞被巨噬细胞吞噬后,在溶酶体酶的作用下,血红蛋白被分解为不含铁的橙色血质和含铁的含铁血黄素。Perls普鲁士蓝反应(Prussian blue reaction)又

石蜡切片与冷冻切片的区别

1、从一抗的选择方面来看。有的一抗既能做石蜡切片又能做冰冻切片,而有的一抗只能做冰冻切片,关键取决于所要检测的抗原稳定性,有的抗原不稳定,经过组 织固定,脱水、透明、浸蜡、包埋、脱蜡等一系列的做石蜡切片的步骤,所检测的抗原易被破坏,这时只能用冰冻切片来做,检测这类抗原的一抗只能做冰冻切片, 而那些稳

石蜡切片与冷冻切片的区别是什么

1、从一抗的选择方面来看。有的一抗既能做石蜡切片又能做冰冻切片,而有的一抗只能做冰冻切片,关键取决于所要检测的抗原稳定性,有的抗原不稳定,经过组 织固定,脱水、透明、浸蜡、包埋、脱蜡等一系列的做石蜡切片的步骤,所检测的抗原易被破坏,这时只能用冰冻切片来做,检测这类抗原的一抗只能做冰冻切片, 而那些稳

石蜡切片与冷冻切片的区别是什么

1、从一抗的选择方面来看。有的一抗既能做石蜡切片又能做冰冻切片,而有的一抗只能做冰冻切片,关键取决于所要检测的抗原稳定性,有的抗原不稳定,经过组织固定,脱水、透明、浸蜡、包埋、脱蜡等一系列的做石蜡切片的步骤,所检测的抗原易被破坏,这时只能用冰冻切片来做,检测这类抗原的一抗只能做冰冻切片,而那些稳定的

石蜡切片淀粉样蛋白(AMYLOID)硫磺素T(thioflavine-T)荧...

石蜡切片淀粉样蛋白(AMYLOID)硫磺素T(thioflavine T)荧光染色试剂盒使用说明主要用途YIJI石蜡切片淀粉样蛋白(AMYLOID)硫磺素T(thioflavine T)荧光染色试剂是一种旨在使用标准化的化学分离石蜡方法和硫磺素T染色技术,与淀粉样蛋白结合,来分析存档中的石蜡包埋

苏木精-伊红及过碘酸雪夫氏的染色方法

实验概要掌握苏木精-伊红(hematoxylin and eosin, HE)及过碘酸雪夫氏染色(periodic acid-schiff stain,PAS染色)方法。实验原理过碘酸雪夫氏染色:过碘酸是一种氧化剂,它能氧化糖类及有关物质中的1.2乙二醇基使之变为二醛,醛与Schiff氏试剂结合,形

简述甲乙酮的用途

  1、用作醋酸纤维素、丙烯酸树脂、醇酸树脂、涂料、油墨等的溶剂,染料的粘结剂,润滑油脱蜡剂,硫化促进剂等  2、用作测定镉、铜和汞的试剂、色谱分析标准物质和半导体光刻用溶剂  3、GB 2760-96规定为允许使用的食用香料。主要用于配制干酪、咖啡和香蕉型香精。亦可用作萃取溶剂。  4、主要用作溶

免疫组化技术规范2

8、脱蜡:免疫组化的脱蜡步骤与常规H&E脱蜡步骤相同,免疫组化实验室中脱蜡需与H&E常规脱蜡分离,以保证脱蜡彻底,否则可能导致染色结果的异常。三、免疫组化实验中的抗原修复1、酶消化:如胰蛋白酶、胃蛋白酶、蛋白水解酶2、抗原热修复:高压法、微波法、水煮法众所周知,免疫组化染色中最关键的莫过于抗原修复,

石蜡包埋组织样本的制备

实验材料 组织胰蛋白酶试剂、试剂盒 二甲苯乙醇生理盐水仪器、耗材 尼龙网实验步骤 1. 把石蜡包埋组织切成 40~50 μm 厚的组织片 3~5 片,或用乳钵研成 0.5 mm 直径大小颗粒状,放入 10 ml 的试管中。2. 加入二甲苯 5~8 ml 时,在室温下脱蜡 1~2 d,视石蜡脱净与否,

石蜡包埋组织样本的制备

实验材料组织胰蛋白酶试剂、试剂盒二甲苯乙醇生理盐水仪器、耗材尼龙网实验步骤1. 把石蜡包埋组织切成 40~50 μm 厚的组织片 3~5 片,或用乳钵研成 0.5 mm 直径大小颗粒状,放入 10 ml 的试管中。2. 加入二甲苯 5~8 ml 时,在室温下脱蜡 1~2 d,视石蜡脱净与否,更换 1

6年免疫组化经验总结

做过病理实验的人都知道,实验看似容易,但真想把它做好,还是需要花上很长一段时间去积累和摸索经验。我从事病理实验已有 6 年多了,在这段时间里,我做过许许多多病理相关实验,刚开始啥也不懂,一味按照网上操作流程来做,但做的结果往往并不是十分理想,最终结果未能达到预期的效果。经过一段时间的浏览和学习,在论

6年免疫组化经验总结

做过病理实验的人都知道,实验看似容易,但真想把它做好,还是需要花上很长一段时间去积累和摸索经验。我从事病理实验已有 6 年多了,在这段时间里,我做过许许多多病理相关实验,刚开始啥也不懂,一味按照网上操作流程来做,但做的结果往往并不是十分理想,最终结果未能达到预期的效果。经过一段时间的

病理制片技术——常用特殊染色

1.第一步准备工作:配制六胺银染液,将10%硝酸银2.5ml倒入干净的染色缸内,加入2%硼砂5ml,液体呈乳白色,再加入3%乌洛托品40ml,染液逐渐呈透明状。2.第二步染色过程:事先把温箱调至60℃备用,切片经脱蜡至水,用1%过碘酸氧化10 min,水洗,然后切片放人六胺银染液放置60℃温箱1

常用免疫组织化学染色方法-1

一)、ABC法: (注,下面各种方法,均为手工操作,如没特别说明,均在室温下进行)1.切片经二甲苯Ⅰ 5分钟。2.切片经二甲苯Ⅱ 5分钟。3. 无水酒精Ⅰ 30秒。4. 无水酒精Ⅱ 30秒。5. 95% 酒精Ⅰ 30秒。6. 95%酒精Ⅱ 30秒。7. 90%酒精 30秒。8.80%酒精 30秒。9

结缔组织的染色方法

结缔组织的染色方法 一般所说的结缔组织是指纤维性结缔组织而言,其结构特点是细胞间质内基质外含有较多的纤维成分,主要是胶原纤维、弹性纤维和网状纤维,我们仅简述这三种纤维的常见染色方法。 (1)Mallory三色染色法:常用于判定多种组织、器官的病变程度及修复情况,区分肿瘤组织中的纤维成分与平滑肌。 染

石蜡切片抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)免疫组化染色试剂..

石蜡切片抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)免疫组化染色试剂盒说明主要用途石蜡切片抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)免疫组化染色试剂是一种旨在使用标准化的化学分离石蜡方法和免疫抗体显色技术,即通过抗酒石酸酸性磷酸酶多克隆抗体以及辣根过氧化物酶缀合物二抗,使用染料二氨基联苯胺染色显示棕褐色,分析存档中的石蜡包埋

免疫组化Elivison二步法

1、石蜡切片置于67℃烘箱中,烘片2小时,脱蜡至水,用pH7.4的PBS冲洗三次,每次3分钟(3×3’)。2、取一定量pH=6.0柠檬酸盐缓冲液,加入微波盒中,微波加热至沸腾,将脱蜡水化后的组织切片置于耐高温塑料切片架上,放入已沸腾的缓冲液中,中档微波处理10分钟,取出微波盒流水自然泠却,从缓冲液中