如何充分脱蜡?
(1)蜡不溶于水,如果脱蜡不干净,少许蜡存留于切片上,将会引起染色不均匀、阳性物时隐时现、真假难辨、背景染色增加等。为了解决上述的问题,切片在染色前必须彻底脱蜡,目前用于脱蜡的试剂主要是二甲苯,因它脱蜡力强,脱蜡时间较短;(2)脱蜡的时间要根据季节,室温和试剂的新鲜谋面是在不同。如果在夏天,室温较高,脱蜡试剂也新鲜,则脱蜡时间不需很多,3-5分钟就已足够。如果在冬天,室温较低,脱蜡试剂也较陈旧,则脱蜡时间需要延长,10-20分钟或更长。(3)当天切的切片,烧烤2小时后进行染色,切片带有温度进行脱蜡这将可加速脱蜡的过程,如果预先切好烤好的切片,在染色前,还必须对切片进行加温 10-20分钟,然后再行脱蜡,这样脱蜡速度加快,效果魁伟更好。总之,操作时应根据不同的季节,不同的室温,不同的试剂来决定,脱蜡的时间,原则上是要彻底、干净、完全地脱去切片上的蜡。......阅读全文
免疫组化Elivison二步法
1、石蜡切片置于67℃烘箱中,烘片2小时,脱蜡至水,用pH7.4的PBS冲洗三次,每次3分钟(3×3’)。2、取一定量pH=6.0柠檬酸盐缓冲液,加入微波盒中,微波加热至沸腾,将脱蜡水化后的组织切片置于耐高温塑料切片架上,放入已沸腾的缓冲液中,中档微波处理10分钟,取出微波盒流水自然泠却,从缓冲液中
石蜡切片抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)免疫组化染色试剂..
石蜡切片抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)免疫组化染色试剂盒说明主要用途石蜡切片抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)免疫组化染色试剂是一种旨在使用标准化的化学分离石蜡方法和免疫抗体显色技术,即通过抗酒石酸酸性磷酸酶多克隆抗体以及辣根过氧化物酶缀合物二抗,使用染料二氨基联苯胺染色显示棕褐色,分析存档中的石蜡包埋
罗氏FFPE组织切片核酸纯化试剂盒操作说明
High Pure FFPET DNA Isolation Kit基于离心柱法的抽提原理,免去DNA沉淀和有机试剂抽提的步骤,是快速核酸抽提的理想工具。整个抽提过程仅需3小时(含脱蜡过程);获得高DNA得率和质量;在qPCR,芯片分析和测序等下游应用中获得强大信号。图1:从FFPET样本中获得高得率
免疫组化(ICC)原理和IHC/ICC实验方法2
3、操作流程(1)脱蜡和水化脱蜡前,应将组织芯片在室温中放置60分钟或60℃恒温箱中烘烤20分钟。1)组织芯片置于二甲苯中浸泡10分钟,更换二甲苯后再浸泡10分钟;2)无水乙醇中浸泡5分钟;3)95%乙醇中浸泡5分钟;4)70%乙醇中浸泡5分钟;(2)抗原修复用于福尔马林固定的石蜡包埋组织芯片。1)
淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体制备技术5
免疫组化染色方法 SP法1)脱蜡、水化;2)PBS洗2~3次各5分钟;3)3%H2O2(80%甲醇)滴加在TMA上,室温静置10分钟;4)PBS洗2~3次各5分钟; 5)抗原修复;6)PBS洗2~3次各5分钟;7)滴加正常山羊血清封闭液,室温20分钟。甩去多余液体。8)滴加Ⅰ抗50μl,室温静置1小
石蜡切片神经元高尔基法快速染色试剂盒使用说明
石蜡切片神经元高尔基法快速染色试剂盒产品说明书(中文版)主要用途石蜡切片神经元高尔基法快速染色试剂是一种旨在使用亲银还原技术,分析固定处理的石蜡包埋组织切片中神经元(neuron)、锥体细胞(pyramidal cell)、胶质细胞(glia cell)、少突触胶质细胞(oligodendr
DNA探针原位杂交
1、4—6微米切片,用防脱片胶(多聚赖氨酸)处理过的玻片贴附 2、56—60℃烤片2—16h 3、新鲜二甲苯脱蜡,10minX2(趁热脱蜡) 4、100%乙醇5minX2次,不用浸水,直接空气干燥 5、加入50μl蛋白酶K工作液(蛋白酶K用蒸馏水稀释,浓度为25μg/ml),37℃消化1
DNA探针原位杂交的相关介绍
1、4—6微米切片,用防脱片胶(多聚赖氨酸)处理过的玻片贴附 2、56—60℃烤片2—16h 3、新鲜二甲苯脱蜡,10minX2(趁热脱蜡) 4、100%乙醇5minX2次,不用浸水,直接空气干燥 5、加入50μl蛋白酶K工作液(蛋白酶K用蒸馏水稀释,浓度为25μg/ml),37℃消化1
关于米糠油再酯化脱酸法的简介
植物油脱酸方法之一就是使油中游离脂肪酸(FFA)经酸化反应转化为中性甘油酯,达到脱酸的目的。Bhattacharrya.A.C和D.K.Bhattacharrya[14]将米糠油脱胶和脱蜡后,采用甘油进行再酯化,将FFA15~30%的米糠油得到脱酸效果而降低酸价。再酯化法再与传统的碱炼、脱色联合
N甲基吡咯烷酮有什么用途
本品为优良高级溶剂,选择性强和稳定性好的极性溶剂,高精密电子,电路板,锂电池等,清洗剂:脱油、脱脂、脱蜡、抛光、防锈、脱漆等高档涂料、油墨、颜料具有毒性低、沸点高、溶解力强、不易燃、可生物降解、可回收利用、使用安全和适用于多种配方用途等优点。
常用抗原的修复方法
用于福尔马林固定的石蜡包埋组织切片:1)抗原热修复 可根据实验室的具体条件,选用微波炉抗原修复、高压锅抗原修复或水浴高温抗原修复。抗原热修复可选用各种缓冲液,如TBS、PBS、重金属盐溶液等,但实验证明,以0.01M枸橼酸盐缓冲液(pH6.0)效果最好。请选用我公司提供的ZLI-9064 枸橼酸盐缓
流式细胞术间接免疫荧光标记的样品制备实验
实验方法原理取一定量的细胞悬液,先加入特异的第一抗体,待反应完全后洗去未结合抗体,在加入荧光标记的第二抗体,生成抗原-抗体复合物,以流式细胞仪检测其上标记的荧光素被激发后发出的荧光。实验材料实验样品试剂、试剂盒抗体、PBS溶液仪器、耗材移液器移液吸头离心机实验步骤一、不同来源样品的处理1 . 培养细
流式细胞术间接免疫荧光标记的样品制备实验
实验方法原理 取一定量的细胞悬液,先加入特异的第一抗体,待反应完全后洗去未结合抗体,在加入荧光标记的第二抗体,生成抗原-抗体复合物,以流式细胞仪检测其上标记的荧光素被激发后发出的荧光。 实
脂肪及结缔组织的染色方法
实验步骤脂肪的苏丹Ⅲ(Ⅳ)染色方法:1) 冰冻切片用70%乙醇漂洗,不超过30s。2) 切片入苏丹Ⅲ(Ⅳ)染液中3~15min或延长至1h。3) 新50%~70%乙醇分化,直至洗去切片上的浮色为止,蒸馏水洗。4) 用稀释1倍的明矾苏木精浅染核1min或稍长。5) 用滤纸将切片及周围的水分吸干。6)
常用抗原修复方法
用于福尔马林固定的石蜡包埋组织切片: 1)抗原热修复 可根据实验室的具体条件,选用微波炉抗原修复、高压锅抗原修复或水浴高温抗原修复。抗原热修复可选用各种缓冲液,如TBS、PBS、重金属盐溶液等,但实验证明,以0.01M枸橼酸盐缓冲液(pH6.0)效果最好。请选用我公司提供的ZLI-9064
流式细胞术间接免疫荧光标记的样品制备实验
实验方法原理 取一定量的细胞悬液,先加入特异的第一抗体,待反应完全后洗去未结合抗体,在加入荧光标记的第二抗体,生成抗原-抗体复合物,以流式细胞仪检测其上标记的荧光素被激发后发出的荧光。 实
TUNEL检测的实验方法
对于贴壁细胞或细胞涂片a. PBS或HBSS洗涤一次。b. 如果细胞贴得不牢,可以干燥样品使细胞贴得更牢。c. 用4%多聚甲醛或碧云天生产的免疫染色固定液(P0098)固定细胞30-60分钟。d. 用PBS或HBSS洗涤一次。e. 加入含0.1% Triton X-100的PBS,冰浴孵育2分钟。f
线粒体及高尔基体永久标本的制作
(一)显示线粒体—Regand染色法1.取材固定:固定材料必须新鲜,所以要求杀死动物后立即取材,切成1—2mm3大小的块,投入固定液中。固定液:3%重铬酸钾20ml福尔马林(中性)5ml固定4天(可在冰箱中),每天换固定液一次。4天后转入3%重铬酸钾中7天,每2天换一次液体。2.流水冲洗24小时后,
结晶紫染色液使用说明
产品内容:1. 结晶紫染色液(Crystal Violet Staining Solution)是一种组织或细胞染色时常用的可以把细胞核染成深紫色的染色液。2. 结晶紫是一种碱性染料,可以和细胞核中的DNA结合,从而产生细胞核染色。3. 一个包装的本染色液至少可以染色200个样品。4. 室温避光保存
免疫组化(Elivison二步法)
(1)石蜡切片置于67℃烘箱中,烘片2小时,脱蜡至水,用pH7.4的PBS冲洗三次,每次3分钟(3×3’)。(2)取一定量pH=6.0柠檬酸盐缓冲液,加入微波盒中,微波加热至沸腾,将脱蜡水化后的组织切片置于耐高温塑料切片架上,放入已沸腾的缓冲液中,中档微波处理10分钟,取出微波盒流水自然泠却,从缓冲
简述诺卡氏放线菌的作用
诺卡氏菌主要分布于土壤。现已报导100余种,能产生30多种抗生素。如可产生对结核分枝杆菌和麻疯分枝菌有特效的利福霉素;对引起植物白叶枯病的细菌,以及原虫、病毒有作用的间型霉素;对革兰氏阳性细菌有作用的瑞斯托菌素等。另外,有此诺卡氏菌用于石油脱蜡、烃类发酵以及污水处理中分解腈类化合物。
甲苯胺蓝染色剂的染色步骤
(一)1.组织切片常规脱蜡至水。2.入甲苯胺蓝液30min。3.稍水洗。4.入冰醋酸液分化,直到胞核和颗粒清晰。5.稍水洗,用冷风吹干。6.二甲苯透明,中性树胶封固。(二)①切片脱腊至水。②蒸馏水浸洗3次。③0.1%甲苯胺蓝液浸染10min。④水洗,洗去多余染液。⑤各级酒精脱水。⑥二甲苯透明,中性树
免疫组化技术规范(一)
欧美国家相继开展了免疫组化质量控制工作,建立了一套比较完善的质量控制方法和程序。中国病理工作者委员会(CCP)免疫组化研究中心借鉴国外的先进经验并结合我国当前的实际情况开始探索一种适合我国免疫组化质控的方法,同时,发现和推广标准化的染色程序,改善和提高免疫组化实验的可靠性,使免疫组化技术更具标准化,
免疫组化SABC法操作流程
1、洗载玻片将载玻片置于重铬酸钾和浓H2SO4混合液中,目的是为了是载玻片上的硅胶等除去,同时使一些肉眼看不见的凹凸不平的表面变平整,便于组织吸附,然后置于清水中清洗,除去残余的重铬酸钾和浓H2SO4(大约冲一个小时左右),再将载玻片浸泡于酒精之中, 然后放到架子上,置于37 ℃温箱中,将多聚赖
用于PCR的模板DNA制备实验——直接法(DNA-免提法)
实验步骤1. 标本太少时,可将一张石蜡切片经脱蜡,水化,蒸馏水清洗,无菌蒸馏水浸泡,取出晾至半干。2. 加入 20~80 μl 直接裂解液中,加 20 mg/ml 蛋白酶 K 0.2~1 μl,放置 55℃ 裂解 3 h 以上;100℃10 min 灭活蛋白酶 K;10000 r/min 离心 10
分离型离心机的主要作用
GF—分离型:主要用于分离各种难分离的乳浊液,特别适用于二相密度差甚微的液、液分离(比重差大于0.1%),以及含有少量杂质的液、液、固三相分离。油品类的分离,变压器油 ,食用油脱水及脱蜡,透平油,生物柴油,煤焦油,润滑油,船舶燃料油,淬火油;各种糖浆剂的分离;全血分离--从全血中分离血浆、血球;生物
真空热处理炉有哪些优点?
真空炉适用范围:用于硬质合金、陶瓷、不锈钢材料、粉末冶金、金属注射成型,真空烧结脱蜡。具有大抽气量、高真空度、温度均匀可控和无泄漏等特点。其他技术参数可按用户要求设计制造成。1、控制精度:±0.1℃ % 2、控温表所有功能都能在触摸屏上操作,内置存储卡,可随意取出在计算机上面打印。可在触摸屏面板上
涎腺乳腺样分泌性癌病例临床病理学特征分析1
涎腺乳腺样分泌性癌(mammary analogue secretory carcinoma,MASC)是近年来新发现的涎腺肿瘤,比较少见,2010年由Skalova等首次提出,因其特征与乳腺分泌性癌相似而得名,并收录于2017版《WHO头颈部肿瘤病理学和遗传学分类》。MASC组织学形态易于发生于涎
免疫组化SABC法操作流程
1、洗载玻片将载玻片置于重铬酸钾和浓H2SO4混合液中,目的是为了是载玻片上的硅胶等除去,同时使一些肉眼看不见的凹凸不平的表面变平整,便于组织吸附,然后置于清水中清洗,除去残余的重铬酸钾和浓H2SO4(大约冲一个小时左右),再将载玻片浸泡于酒精之中, 然后放到架子上,置于37 oC温箱中,将多聚赖氨
免疫组化主要步骤
免疫组化主要步骤1. 洗载玻片:将载玻片置于重铬酸钾和浓H2SO4混合液中,目的是为了是载玻片上的硅胶等除去,同时使一些肉眼看不见的凹凸不平的表面变平整,便于组织吸附,然后置于清水中清洗,除去残余的重铬酸钾和浓H2SO4(大约冲一个小时左右),再将载玻片浸泡于酒精之中, 然后放到架子上