创新参选:从酵母中提取gDNA的方法改进

2012实验室创新技术大奖”评选活动开展以来,生物通已经陆陆续续收到不少项目,这些项目中有的能减少实验步骤,有的能降低实验成本,还有一些改进了实验设备,让我们的实验过程更加轻松。 生物通将会陆续公布一些项目,以便大家分享这些创新技术。同时为了感谢这些分享实验技巧的参选者,生物通也准备了一些精美礼品寄出,同时近期我们还将进行抽奖,以飨读者。 参选项目:从酵母中提取gDNA的方法改进 背景: 细胞壁是快速裂解酵母细胞的主要障碍。从酵母细胞中制备gDNA的传统方法包括使用破壁酶和玻璃珠,之后通过去垢剂裂解细胞,并利用酚-氯仿提取gDNA。在分析大量样品时,这些方法相当耗时,也相对较贵。 在快速分析时,也可以通过反复冻融裂解细胞。尽管这种方法相对较快,但是在氯仿抽提之后需要将样品转移至新的管中,这对于大量样品的同时抽提就不太方便。另外,还有一种更为简单的SDS处理方法。不过,似乎产量较低,结果重复性不太......阅读全文

从哺乳动物细胞中制备核和细胞质提取物—核提取物制备

实验材料转瓶或单层培养的哺乳动物细胞(如HeLa细胞)试剂、试剂盒PBS低渗缓冲液高盐缓冲液含1. 2 mol L KCl透析缓冲液液氮仪器、耗材贝克曼 JS4. 2 转子或相当的转子50 mL 圆锥形刻度聚丙烯离心管(对较小体积的提取物也可用 15 mL 的离心管)Dounce 氏玻璃匀浆器(B

奶粉中蛋白质含量测定的改进

  蛋白质是奶粉中最重要的营养物质之一,三聚氰胺事件就是因为为了蛋白质含量而添加对小孩有害的物质。因此,蛋白质含量的检测是非常重要的。蛋白质含量的检测有很多种方法,如今使用蛋白质测定仪是比较快速简单且精确的,另外,还有凯氏定氮法、微量凯氏定氮法等等。本文主要讨论如何改进对奶粉中蛋白质含量的测定。  

农残检测中对提取溶剂的浓缩方法

农残检测中对提取溶剂的浓缩是一个必须的步骤;就目前来说浓缩的方法主要有两种:旋转蒸发(减压)和氮吹浓缩(还有K-D浓缩等)。这两种方法各有其适用性。1.旋转蒸发浓缩,这是一种快速的、针对大体积溶液的浓缩方法。由于一般都在抽真空的条件下进行,因此浓缩的速度很快。关于旋蒸浓缩的一些注意事项,在以前的帖子

中药样品前处理中的提取方法有哪些

  中药主要来源于天然药及其加工品,包括植物药、动物药、矿物药及部分化学、生物制品类药物。  中药提取方法主要有蒸馏法和溶剂萃取法。蒸馏法包括常压蒸馏、分馏、水蒸气蒸馏、真空蒸馏、抽提蒸馏等。水蒸气蒸馏法又可分为共水蒸馏法、通水蒸气蒸馏法、水上蒸馏法等。溶剂萃取法是较为有效、应用广泛的经典方法之一,

细胞培养液中蛋白的提取方法

蛋白质浓缩技术是免疫学中常用的手段,现介绍几种常用的浓缩技术.1、透析袋浓缩法利用透析袋浓缩蛋白质溶液是应用最广的一种.将要浓缩的蛋白溶液放入透析袋(无透析袋可用玻璃纸代替),结扎,把高分子(6 000-12 000)聚合物如聚乙二醇(碳蜡)、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可.也可将吸水剂配

土壤中多环芳烃的提取有哪些方法

对同一土壤样品分别运用索氏提取、快速溶剂萃取和微波萃取3种提取技术,再对这3种提取液进行相同的后续处理(脱水、净化及上机分析等)。  通过分析结果,对3种提取技术进行评定。结果 表明:3种提取技术16种多环芳烃加标回收率结果分别为83%~120%、91%~112%和85%~119%,均符合试验要求。

DNA提取方法-影响提取质量的因素-提高提取质量的方法

一、石蜡包埋组织DNA提取的基本方法从石蜡包埋组织中提取DNA的基本步骤,是在常规DNA提取方法的基础上改良和演变而业。Goelz等(1985)最先提出的石蜡包埋组织DNA提取技术,是用机械的方法破碎组织,切除多余的石蜡,进入含SDS和高浓度蛋白酶K(1mg/ml)的提取缓冲液加温孵育,然后进行苯酚

如何改进粗纤维测定方法?

纤维是指食用植物细胞壁中的碳水化合物和其他物质的复合物。纤维虽然不能被人体消化吸收,营养价值很低,但它能吸收和保留水份,使粪便体积增大,可促进肠道蠕动,对血浆中胆固醇有阻止形成和降低作用,因此,纤维素有可以预防结肠癌、阑尾炎和心脏病等多种疾病的作用,是人类食物中不可缺少的重要组成部分。因此,食物中纤

MALDlMS实验_改进方法

实验方法原理MALDI离子化过程本身存在一个问题即离子化过程中动能有微小的分散。由单个激光脉冲产生的离子的动能的微小差别削弱了 MALDI-MS 的分辨力。多肽的质量分辨率(m/Δm) 通常为 40-800 FWHM (峰高一半处的峰宽),蛋白质的质量分辨率通常为 50-400 FWHM, 这样的质

电子地上衡结构的改进的方法

电子地上衡是普遍使用的大型衡器,主要运用于称量货物。现有电子地上衡的机械结构主体基础为一个秤台平面,货物放在秤台上,电子系统记录下秤台的形变而给出重量信息。但是由于秤台高出地面,为了让货物能平稳地推上秤台,需要另外配置三角木桩或铁块垫在秤台边上,极不方便。提供了一种电子地上衡结构的改进,其目的在于克

电子地上衡结构的改进的方法

现有电子地上衡的机械结构主体基础为一个秤台平面,货物放在秤台上,电子系统记录下秤台的形变而给出重量信息。但是由于秤台高出地面,为了让货物能平稳地推上秤台,需要另外配置三角木桩或铁块垫在秤台边上,极不方便。 提供了一种电子地上衡结构的改进,其目的在于克服现有的技术缺点,通过改进电子地上衡结构,使其更紧

从科学的春天到建设创新型国家

全国人大常委会副委员长、中国科学院院长 路甬祥 1978年3月18日,中共中央在北京隆重召开的全国科学大会,实际上不仅是对科技界的拨乱反正,也是我国改革开放的先声。时任中国科学院院长、86岁高龄的郭老在大会闭幕式上,满怀激情地说:“这是革命的春天,这是人民的春天,这是科学的春天!让我们张开双臂,热

从分子电子学的沉浮看创新

  最近,创新和创业的话题很热。IEEE Spectrum 2015/10发表“The Booms and Busts of Molecular Electronics”的文章,正好说明创新的重要和艰难,不但搞电子的网友会有兴趣,对其他有志创新的朋友也会有启发。   40年前,纽约大学的研究生Ari

从潮汐中提取能量的新型磁性材料

  MAGNETIDE(潮汐磁能)项目的目的是研发一种新型发电机,可通过潮汐变化所产生的机械能转化为电能。研究人员调整了发电机的设计,以便装入使用粉末注射成型(PIM:英语Powder Injection Moulding)科技制造出的成分,可降低成本并提高30%的运作效率。“这些发电机添加了通

从青蛙身上提取抗流感的“灵丹妙药”

  流感是一种常见的疾病,中招后浑身无力,大脑反应迟缓,昏昏欲睡,最重要的是不能呼吸,睡觉都变成了一场灾难。全球每年约有300~500万例严重的流行性感冒发生,其中有5%-10%的成年人和20%-30%的儿童都难逃一劫。青蛙的生存环境远比人类复杂恶劣,更何况它们还以携带诸多病菌的昆虫为食。面对如此糟

关于酵母葡聚糖的酸碱综合法提取法介绍

  将酵母分散到NaOH溶液中搅拌,然后加入水,离心收集沉淀。沉淀再分散到NaOH溶液中,离心收集沉淀。沉淀用水洗3遍,用HCl浸提后,离心收集沉淀,干燥后得到酵母β-(1,3)-D葡聚糖产品。  明酸碱结合法提取的产品纯度较高,蛋白质含量少,收率也较高,但是这种方法过程复杂,操作繁琐,耗时较长,且

酵母转化的几种方法

Modified Yeast Transformation Inoculate cells from an overnight culture into 50 ml YEPD and incubate at 30°C with shaking. Typically, add 0.1 to 0.2 m

酵母菌的检测方法

(1) 取洁净的血球计数板一块,在计数室上盖上一块盖玻片。(2) 将酵母菌液摇匀,用滴管吸取少许,从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘滴入一小滴(不宜过多),使菌液沿两玻片间自行渗入计数室,勿使产生气泡,并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌液。也可以将菌液直接滴加在计数室上,然后加盖盖玻片(勿使

粮食运动粘度计在粮食糊化过程中的改进方法

  粮食在贮藏和加工生产过程中,由于环境的各种因素和时间的变化,会导致粮食某些特征也会发生变化。粮食运动粘度仪是粮食检测仪器中一项重要的仪器,它的测量结果也是衡量粮食陈化的一个非常重要的指标,粮食的陈化程度直接影响着粮食的用途。粮食运动粘度计可以用来测定以及分析粮食的粘度,在测定过程中,需要用到粮

从哺乳动物细胞中制备核和细胞质提取物

核提取物的制备核提取物制备优化细胞质(S-100)组分的制备实验方法原理实验材料转瓶或单层培养的哺乳动物细胞(如HeLa细胞)                                                          试剂、试剂盒PBS                    

从哺乳动物细胞中制备核和细胞质提取物

实验方法原理 实验材料 转瓶或单层培养的哺乳动物细胞(如HeLa细胞)试剂、试剂盒 PBS低渗缓冲液高盐缓冲液含1. 2 mol L KCl透析缓冲液液氮仪器、耗材 贝克曼 JS4. 2 转子或相当的转子50 mL 圆锥形刻度聚丙烯离心管(对较小体积的提取物也可用 15 mL 的离心管)Doun

从哺乳动物细胞中制备核和细胞质提取物

核提取物的制备 核提取物制备优化 细胞质(S-100)组分的制备             实验方法原理 实验材料

酵母遗传学方法9:酵母免疫荧光

酵母免疫荧光1)细胞制备1.培养5ml酵母至对数生长早期(106~107细胞/ml)。2.直接加1/10体积的甲醛到培养基里固定细胞(加入的甲醛终浓度为3.7%,标准母液是37%)。3.细胞在甲醛中培养至少1小时。4.离心收集细胞,用0.1mol/L磷酸钾(pH7.5)洗一次。5.把细胞悬浮在1ml

酵母细胞中质粒的加工实验

定位突变质粒缺口修复技术和等位基因修复技术实验材料酵母菌株试剂、试剂盒带选择标记的YRp或YCp质粒适当的限制性内切核酸酶相应选择标记突变的酵母菌质粒标记的选择培养基平板仪器、耗材培养皿实验步骤1)将目的基因亚克隆到带恰当的选择标记的YRp或YCp质粒上。2) 在基因内部的两个限制酶酶切位点上切割以

酵母细胞中质粒的加工实验

实验方法原理 在非选择性生长条件下,大多数大肠杆菌/酵母菌穿梭载体的丢失频率大约1%。 在本方案中含质粒的酵母菌株接种于非选择性平板上以分离质粒并可得到单菌落。然后通过影印到选择性平板上可以鉴别丢失了质粒的菌株实验材料 含质粒的酵母菌株试剂、试剂盒 YPD或其他非选择性液体培养基及平板CM缺失成分

酵母核糖核酸(RNA)的提取、水解及组成成分的鉴定

原理 核酸在机体生命活动中具有重要意义,核酸可分为核糖核酸和脱氧核糖核酸两类。酵母中富含的核糖核酸在碱处理下成为可溶性的钠盐与蛋白质等其它成分分开,然后用乙醇提取。加酸水解核酸,可鉴定其组成成分。 用硫酸水解RNA时,可以生成磷酸、戊糖和碱基。各种成分以下列反应鉴定: (1) 磷酸与钼酸

凯氏定氮仪中的老式定氮蒸馏器的改进方法

对于经常使用仪器的科研工作者,有时候会遇到买到的仪器用起来不舒服,或者是随着研究的进展不满足研究的需要,有时候资金不允许我们去采购更先进的仪器,这就需要我们自行去改装原有的仪器,满足更多研究的需要,本文介绍凯氏定氮仪中的老式的微量定氮仪蒸馏器的更改方法。我国现在使用的食物营养成分的数据多是40年代或

邓中翰委员:芯片创新从“点”走向“域”

  来自中国半导体行业协会的统计显示,2020年中国集成电路产业销售收入约8848亿元,年均增长率超过20%。尽管产业发展速度很快,但在一些关键核心技术、重要加工设备方面还存在着瓶颈。 全国政协委员、中国工程院院士邓中翰告诉《中国科学报》,提升芯片核心技术攻关能力,增强发展后劲,不能仅靠单点技术

节能环保从技术创新开始

  人民网1月17日电 日前,北京大学国家发展研究院博士后研究员、山东大学政治学与公共管理学院副教授李金兵,北京大学国家发展研究院国家政策实验室主任、教授唐方方在接受记者采访时表示,传统粗放发展模式下的技术创新虽然能够提高要素产出,推动经济增长,但其却助长了高耗能、低效率、高污染

中国式创新:从“相同”到“不同”

  英国发布的中国创新能力报告指出,“山寨”已成为中国独特的增值方式和竞争力。同时,每天相当于5亿美元的科研投入使中国在“吸收发展期”快速壮大。   说起“山寨”,很多人会认为这是一个贬义词。然而,随着中国“山寨”模式的不断发展壮大,全球已开始重新审视这种日渐成熟的增值方式。   不久前,英国大