创新参选:从酵母中提取gDNA的方法改进

2012实验室创新技术大奖”评选活动开展以来,生物通已经陆陆续续收到不少项目,这些项目中有的能减少实验步骤,有的能降低实验成本,还有一些改进了实验设备,让我们的实验过程更加轻松。 生物通将会陆续公布一些项目,以便大家分享这些创新技术。同时为了感谢这些分享实验技巧的参选者,生物通也准备了一些精美礼品寄出,同时近期我们还将进行抽奖,以飨读者。 参选项目:从酵母中提取gDNA的方法改进 背景: 细胞壁是快速裂解酵母细胞的主要障碍。从酵母细胞中制备gDNA的传统方法包括使用破壁酶和玻璃珠,之后通过去垢剂裂解细胞,并利用酚-氯仿提取gDNA。在分析大量样品时,这些方法相当耗时,也相对较贵。 在快速分析时,也可以通过反复冻融裂解细胞。尽管这种方法相对较快,但是在氯仿抽提之后需要将样品转移至新的管中,这对于大量样品的同时抽提就不太方便。另外,还有一种更为简单的SDS处理方法。不过,似乎产量较低,结果重复性不太......阅读全文

创新稀土应用于改进尼龙生产

  美国能源部的创新工房:重要材料研究所(Critical Materials Institute)最近发明了一种新的化学工艺,该工艺可以将铈这种稀土金属运用到改进尼龙的生产中。  该工艺应用铈基材料,将其和钯催化剂一起制成纳米大小的粒子,用来制作环己酮,一种关键的尼龙原料。  传统的制造环己酮的方

新方法可以从羊水中提取丰富的干细胞

  羊水,是存在于未出生胎儿周围的保护性液体,在剖腹产中,羊水经常被当做医疗废物丢弃。然而,越来越多的证据表明羊水是一种珍贵的生物材料,其中含有的干细胞在细胞治疗以及再生医学领域都有潜在的意义。最近,来自Lund大学的研究者们开发出了一种多步骤的手段,其中包含独特的收集设备以及新型的细胞收集与加工技

从棉花组织中提取微量RNA的标准实验方法protocol

Prior to Extractions ・ Bake all necessary glassware, metal spatulas, mortars, and pestles overnight in a 200℃ oven after   wrapping them in aluminum f

改进的QuEChERS方法测定果蔬中31种农药

改进的QuEChERS方法配合GPC_GC_MS在线联用系统测定果蔬中31种农药目的: 建立果蔬中31种农药残留的快速分析方法。方法: 采用改进的QuEChERS前处理方法和GPC- GC - MS在线联用系统, 快速测定果蔬中有机磷、氨基甲酸酯、拟除虫菊酯、有机氯等共31种农药的残留量。结果: 3

酵母菌基因组DNA的提取实验

实验材料 酵母菌试剂、试剂盒 SE缓冲液山梨醇EDTA溶菌酶PVP蛋白酶K缓冲液 Tris仪器、耗材 高速冷冻离心机台式离心机恒温水浴低温冰箱冷冻真空干燥器取液器电泳仪水平电泳槽紫外观测仪实验步骤 1.  1.5 ml  对数生长期细菌细胞。2.  离心,12 000 rpm,1-2 min。3.

酵母菌基因组DNA的提取实验

基本方案             实验材料 酵母菌 试剂、试剂盒

关于酵母葡聚糖的酸法提取法介绍

  对醋酸、蚁酸以及磷酸是否适合于酸水解法提取酵母葡聚糖进行研究,结果表明酸解后提取酵母葡聚糖的主要结构和支链结构基本上并没有改变。采用醋酸对酿酒酵母中β—葡聚糖进行提取,研究发现酸法提取葡聚糖的最佳工艺条件是:提取剂HAc浓度为6%,提取温度为90℃,提取时间6h , 固液比为1:6。在最佳提取工

关于酵母提取物的生产工艺介绍

  ◆干食用酵母(Dried food yeast)  干食用酵母的生产工艺比较简单,直接将洗净的酵母乳质壁分离后进行滚筒干燥,得到的产品即为干食用酵母。该产品有30%的可溶物质,含有丰富的VB,蛋白质和膳食纤维,微量元素等。可应用于健康食品,粉末调味品等产品 [1] 。  ◆干自溶酵母(Dried

从有限的细胞中提取-RNA-实验

实验材料 LCM 帽子试剂、试剂盒 乙醇 糖原RNA 提取试剂盒 超纯水仪器、耗材 移液器实验步骤 一、材料1. 缓冲液、试剂和溶液75% 乙醇 (超纯水配制)糖原,5 mg/ml(Ambion,Austin,TX)StratageneRNA 提取试剂盒(200345,StratageneCloni

如何从冻存的细胞提取RNA

1). 将冻存管从液氮或冰箱中取出;2). 不待细胞溶解,将Trizol500ul-1ml直接放入冻存管中,此时Trizol会冻成冰状;3). 将冻存管缓慢融化,并用加样器吹打混匀;4). 将细胞裂解液移至Eppendorf管中,16000′g离心1min,吸出管底絮状沉淀;注释:该步骤并非必要,多

从有限的细胞中提取-RNA-实验

            实验材料 LCM 帽子 试剂、试剂盒 乙醇 糖原 RNA 提取试剂盒  超纯

从有限的细胞中提取-RNA-实验

RNA 样品可以在-80°C 中保存 6 个月。总细胞 RNA 采用 StratageneRNA 提取试剂盒,按照说明书进行。另外,也可选用 PicoPureRNA 提取试剂盒,尤其是细胞较少时。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。实验材料LCM 帽子试剂、试剂盒乙醇糖原R

酵母提取物琼脂培养基配方

中文名酵母提取物琼脂培养基配方英文名YEAST EXTRACT AGAR用途用于水质微生物菌落总数计数。(ISO标准)标准ISO配方(g/L)成分             含量(g/L) 胰蛋白胨        6.0g 酵母提取物     3.0g 琼脂粉          12.0g 最终  

酵母前体mRNA剪接提取物实验

真核生物前体 mRNA ( pre-mRNA ) 的剪接分为两步,即先从前体切去内含子,然后将两个外显子连接在一起形成成熟的  mRNA。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方法原理剪接反应的典型做法是使用核提取物,即 S100 提取物补充 SR 蛋白或粗提取物的部分纯化组分,最常使

酵母前体mRNA剪接提取物实验

            实验方法原理 剪接反应的典型做法是使用核提取物,即 S100 提取物补充 SR 蛋白或粗提取物的部分纯化组分,最常使用的是 HeLa 细胞的提取物。前体 mRNA 底物通常采用噬菌体聚合酶体外转录的方法来制备。

酵母基因组DNA简易高效提取方案

1. 10ml菌液过夜培养至饱和(OD600值为2-3) 2. 离心沉降细胞(Sorvall中以2000rpm的速度),然后以冷的、等体积的无菌蒸馏水洗涤 3. 将细胞沉淀在200μl 裂解缓冲液中重悬浮,然后加入约300μl 玻璃珠和200μl的1:1苯酚:氯仿混和液 4. 漩涡摇匀1-2min 

怎样从总RNA中提取mRNA

大多数真核细胞mRNA的3’端通常具有由20-30个腺苷酸组成的polyA尾巴,寡聚胸腺嘧啶脱氧核糖核苷(OligoT)可以与之配对结合,这就是提取mRNA最基本的原理。具体到实验手段上,现在磁珠法、纤维素柱层析法都有在用。磁珠法一般是用生物素标记OligoT,亲和素标记磁珠(生物素和亲和素间具有高

怎么从悬浮细胞中提取蛋白

细胞比较简单,只有细胞膜,抽提过程中,很容易破坏细胞膜,从而得到蛋白,相应蛋白中受到其他物质干扰也比较少,样品较为干净。但是用组织的时候,组织由细胞组成,但是从组织中抽提丹巴就要复杂,做组织匀浆以后,再分离组织碎片和蛋白,但是分离过程可能没有那么好,组织中含有的各种杂质,杂蛋白就比细胞中要多,要复杂

CsCl法从组织中提取RNA

试剂、试剂盒 液氮 组织胍溶液 十二烷基肌氨酸钠 CsCl 组织重悬液 乙酸钠酚 氯仿 异戊醇 异戊醇 无水乙醇仪器、耗材 组织捣碎机 离心机实验步骤 一 材料与设备1)液氮2)组织胍溶液:590.8 g 异硫氰酸胍溶于 400ulDEPC 处理的水中,加入 25 mmol/LTris-Cl(p

怎样从总RNA中提取mRNA

大多数真核细胞mRNA的3’端通常具有由20-30个腺苷酸组成的polyA尾巴,寡聚胸腺嘧啶脱氧核糖核苷(OligoT)可以与之配对结合,这就是提取mRNA最基本的原理。具体到实验手段上,现在磁珠法、纤维素柱层析法都有在用。磁珠法一般是用生物素标记OligoT,亲和素标记磁珠(生物素和亲和素间具有高

核糖核酸从哪提取而成

核糖核酸(缩写为RNA,即Ribonucleic Acid),存在于生物细胞以及部分病毒、类病毒中的遗传信息载体。RNA由核糖核苷酸经磷酸二酯键缩合而成长链状分子。一个核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和碱基构成。RNA的碱基主要有4种,即A(腺嘌呤)、G(鸟嘌呤)、C(胞嘧啶)、U(尿嘧啶),其中,U(尿

CsCl法从组织中提取RNA

            试剂、试剂盒 液氮 组织胍溶液 十二烷基肌氨酸钠 CsCl 组织重悬液   乙酸钠 酚 氯仿

关于苹果渣中果胶提取方法的介绍

  植物中果胶多以原果胶形式存在,原果胶是不溶于水的物质,但是在酸的作用下可以转变成水溶性果胶,中国是苹果浓缩汁生产大国,苹果浓缩汁生产过程中每年产生100万t以上苹果渣,合理利用苹果渣、变废为宝,不仅有利于保护环境,也有利于提高苹果附加值。干苹果渣中果胶的含量为15%~18%,且以高甲氧基果胶为主

DNA提取中EB的去除实验方法

Removal of Ethidium Bromide from DNA by Extraction with Organic SolventsJoseph SambrookPeter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourn

Nature:从酵母到鳕鱼,科学家用新方法预警渔业危机

该图显示了1992年北大西洋鳕鱼捕捞业的崩溃。  1990年,北大西洋的渔民们捕捞到了超过20万吨的鳕鱼;在1992年,他们却几乎一无所获。鳕鱼捕捞的崩溃造成成千上万的加拿大渔民和工人失去了工作,而北方鳕鱼渔业也就此一蹶不振。现在,物理学家通过研究实验室酵母发现了一种新方法以预知这样的衰退再次逼近的

粗纤维测定方法的改进

纤维是指食用植物细胞壁中的碳水化合物和其他物质的复合物。纤维虽然不能被人体消化吸收, 营养价值很低, 但它能吸收和保留水份, 使粪便体积增大, 可促进肠道蠕动, 对血浆中胆固醇有阻止形成和降低作用, 因此, 纤维素有可以预防结肠癌、阑尾炎和心脏病等多种疾病的作用, 是人类食物中不可缺少的重要组成部分

酵母遗传学方法12:酵母菌落PCR方法

酵母菌落PCR方法1.在冰上配制反应混合液:2μl                  10×菌落PCR缓冲液1.2μl                 25mmol/L MgCl20.4μl                 10mmol/L dNTPs10pmol                引物

酵母RNA的提取及含量测定(地衣酚显色法)

一、实验目的  (1)熟悉酵母RNA的提取方法(2)掌握地衣酚显色法测定酵母RNA含量的原理和方法二、实验原理  RNA与浓盐酸共热时,即发生降解,形成的核糖继而转变成糠醛,后者与3, 5-二羟甲苯反应呈鲜绿色,该反应需用三氯化铁和氯化铜作催化剂,反应产物在670nm处有最大吸收。RNA在20-25

酵母RNA的提取及组份鉴定(稀碱法)

实验原理由于RNA的来源和种类很多,因而提取制备方法也很各异。一般有苯酚法、去污剂法和盐酸胍法。其中苯酚法又是实验是最常用的。组织匀浆用苯酚处理并离心后,RNA即溶于上层被酚饱和的水相中,DNA和蛋白质则留在酚层中。向水层加入乙醇后,RNA即以白色絮状沉淀析出,此法能较好的除去DNA和蛋白质。上述方

美国大学研究称葡萄藻中的酶有助从植物中提取燃料

   美国德州农工大学的科学家们在研究绿色微藻——布朗葡萄藻过程中发现了一种能够产生碳氢化合物的酶,利用这种酶可实现从植物中提取燃料。该研究发表在最新一期的《自然—通讯》杂志上。   布朗葡萄藻可产生大量的液态碳氢化合物,用于生产汽油、煤油和柴油。目前在地下储藏的石油大多也是由这些海藻产生的。