DNA提取中EB的去除实验方法

Removal of Ethidium Bromide from DNA by Extraction with Organic SolventsJoseph SambrookPeter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourne, AustraliaDavid W. RussellUniversity of Texas Southwestern Medical Center, DallasExcerpted From Molecular Cloning: A Laboratory Manual Third EditionABSTRACTEthidium bromide is usually removed from DNA purified through a CsCl gradient by repeated extraction with o......阅读全文

DNA提取中EB的去除实验方法

Removal of Ethidium Bromide from DNA by Extraction with Organic SolventsJoseph SambrookPeter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourn

提取RNA中老混有DNA怎样去除

先用酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提,这时候经常在样品中会有酚残留,所以之后再用氯仿:异戊醇(24:1)抽提,将酚抽干净,以免影响后续的实验.在抽提前还要在DNA样品中加入1/10体积的PH5.2的3M醋酸钠,增加盐浓度,以免DNA沉淀出来的量太少,都被抽走了.还有最好在抽提之前要把DNA样品

RNA提取过程中如何去除DNA污染

方法:1、使用DNA酶DNAse I 消化1小时,恒温37度。2、离心取上清的时候,一定要小心不要取到中间的膜和下面的液体。3、直接加NaOH溶液与提取液混合搅拌,然后离心就可以了.因为RNA可溶于NaOH溶液,而DNA不可溶,离心后的上清液就不含有DNA了。

DNA凝胶电泳实验中EB的作用

1溴化乙锭是一种高度灵敏的荧光染色剂,用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA.2溴化乙锭可以嵌入碱基分子中,导致错配.许多人认为溴化乙锭是强诱变剂,具有高致癌性.溴化乙锭用标准302nm 紫外光透射仪激发并放射出橙红色信号,可用Polaroid 底片或带CCD 成像头的凝胶成像处理系统拍摄.溴化乙

DNA凝胶电泳实验中EB的作用

1溴化乙锭是一种高度灵敏的荧光染色剂,用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA.2溴化乙锭可以嵌入碱基分子中,导致错配.许多人认为溴化乙锭是强诱变剂,具有高致癌性.溴化乙锭用标准302nm 紫外光透射仪激发并放射出橙红色信号,可用Polaroid 底片或带CCD 成像头的凝胶成像处理系统拍摄.溴化乙

DNA凝胶电泳实验中EB的作用

1溴化乙锭是一种高度灵敏的荧光染色剂,用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA。2溴化乙锭可以嵌入碱基分子中,导致错配。许多人认为溴化乙锭是强诱变剂,具有高致癌性。溴化乙锭用标准302nm 紫外光透射仪激发并放射出橙红色信号,可用Polaroid 底片或带CCD 成像头的凝胶成像处理系统拍摄。溴化乙

病毒-DNA-的提取实验——培养细胞中病毒-DNA-的提取

实验材料细胞试剂、试剂盒裂解液TE 缓冲液仪器、耗材培养瓶EP管真空泵实验步骤1. 贴壁培养细胞倾去培养液,加 PBS 洗 2次,加胰蛋白酶消化 (37℃, 5~10 min)后移入Ep管中,2000 r/min 离心 10 min, 弃上清液,用 PBS 悬浮细胞,离心洗涤 2~3次,用 PBS

提取RNA时如何去除DNA的污染

提取RNA时如何去除DNA的污染的方法:注意实验室的标准化问题,注意污染的存在,同时严格按照说明书上的操作应该没有问题。发现DNA污染,用DNAse I 消化1小时,37度离心取上清的时候,一定要小心不要取到中间的膜和下面的液体。直接加NaOH溶液与提取液混合搅拌,然后离心就可以了.因为RNA可溶于

病毒-DNA-的提取实验——拭子标本中病毒-DNA-的提取

实验材料拭子标本试剂、试剂盒TE 缓冲液裂解液蛋白酶K仪器、耗材离心机棉签实验步骤预操作:将采有口腔、鼻腔或生殖道等处分泌物标本的棉签置于 2 ml 生理盐水中,洗下标本。若标本在 4 h 内处理,可置于室温保存,否则需 4℃保存。1. 将生理盐水中的标本以 2 000 r/min 离心 5 min

病毒-DNA-的提取实验——全血细胞中病毒-DNA-的提取

实验材料全血试剂、试剂盒裂解缓冲液 A裂解缓冲液 B蛋白酶 K仪器、耗材离心机水浴锅实验步骤1. 在 750µl 全血中加入等量裂解缓冲液 A,混匀, 12000 r/min 离心 30 s, 弃上清液。2. 用 1.5mL 裂解缓冲液 A 悬起沉淀,再重复离心 1次,弃上清液。3. 用 117µL

病毒-DNA-的提取实验——新鲜或冷冻组织中病毒-DNA-的提取

实验材料新鲜或冷冻组织试剂、试剂盒匀浆缓冲液裂解液仪器、耗材剪刀匀浆器离心机实验步骤1. 取新鲜或刚解冻的组织去除血水和结缔组织,在冰浴上剪成小碎块。2. 将组织碎块移入预冷的匀浆器中,按 10 ml/g 加入匀浆缓冲液,混匀,制成匀浆液。3. 将匀浆液移人 Ep 管, 5000 r/min 离心1

DNA的提取实验

            实验方法原理 酚为有效的蛋白质变性剂,并且饱和的酚与水相有效的分开.因此,在含核酸的样品加入酚,可将样品中的蛋白质变性后形成沉淀层,位于水相与有机相的界画,从而达到纯化核酸的目的.但酚不能完全抑制RNA酶的活性,而且酚层中含有10-15%的水

DNA的提取实验

掌握核酸提取与纯化的方法,离心技术的合理使用.酚为有效的蛋白质变性剂,并且饱和的酚与水相有效的分开.因此,在含核酸的样品加入酚,可将样品中的蛋白质变性后形成沉淀层,本实验来源于牡丹江医学院 本科 5 年制检验专业实验指导实验方法原理酚为有效的蛋白质变性剂,并且饱和的酚与水相有效的分开.因此,在含核酸

DNA的提取实验

实验方法原理 酚为有效的蛋白质变性剂,并且饱和的酚与水相有效的分开.因此,在含核酸的样品加入酚,可将样品中的蛋白质变性后形成沉淀层,位于水相与有机相的界画,从而达到纯化核酸的目的.但酚不能完全抑制RNA酶的活性,而且酚层中含有10-15%的水,从而溶解一部分poly-(A)RNA。将酚与氯仿联合使用

DNA-污染的柱上去除实验

            试剂、试剂盒 DNA 酶 I 缓冲液 DNA 酶 I 仪器、耗材 细胞裂解液

DNA-污染的柱上去除实验

该方案可用于使用硅基 RNA 结合柱的 RNA 分离策略,例如方案 6。然而,可能不会 实现 100% 除去 DNA。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒DNA 酶 I 缓冲液DNA 酶 I仪器、耗材细胞裂解液实验步骤一、材料1. 酶和酶缓冲液DNA 酶 I,扩

DNA-污染的洗脱后去除实验

            试剂、试剂盒 EDTA DNA 酶Ⅰ DNA 酶Ⅰ缓冲液 RNA 样品 仪器、耗材

DNA-污染的洗脱后去除实验

述方案是 Dilworth 和 Huang 方案的修改(DilworthandMcCarey1992;Huangetal.2000)。它可以用于从大多数商用试剂盒和试剂制备的 RNA 中去除 DNA 污染。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒EDTADNA 酶Ⅰ

DNA-污染的柱上去除实验

试剂、试剂盒 DNA 酶 I 缓冲液 DNA 酶 I仪器、耗材 细胞裂解液实验步骤 一、材料1. 酶和酶缓冲液DNA 酶 I,扩增级(无 RNA 酶)DNA 酶 I 缓冲液,10X2. 细胞和组织利用总 RNA 纯化试剂盒(例如 Madigen 总 RNA 快速纯化系统)获得的细胞裂解液。二、方法1

DNA-污染的洗脱后去除实验

试剂、试剂盒 EDTADNA 酶ⅠDNA 酶Ⅰ缓冲液RNA 样品仪器、耗材 水浴锅实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂用焦碳酸二乙酯(DEPC) 处理过的水EDTA,25 mmol/L2. 酶和酶缓冲液DNA 酶Ⅰ, 扩增级(无 RNA 酶)DNA 酶Ⅰ缓冲液,10X3. 核酸和寡核苷酸RNA

DNA的提取方法

一.酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎细胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯萃取,高速离心后取上清,所得DNA大小为100-150kb二.甲酰胺解聚法:破碎细胞同上,然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合,再透析获得DNA可得DNA200kb左右。三.玻璃棒缠绕法:用盐酸胍裂解细胞,将裂解物铺于乙醇上,

病毒-DNA-的提取实验

实验方法原理 实验材料 全血试剂、试剂盒 裂解缓冲液 A裂解缓冲液 B蛋白酶 K仪器、耗材 离心机水浴锅实验步骤 1. 在 750µl 全血中加入等量裂解缓冲液 A,混匀, 12000 r/min 离心 30 s, 弃上清液。2. 用 1.5mL 裂解缓冲液 A 悬起沉淀,再重复离心 1次,弃上清液

动物DNA提取实验

实验方法原理 在浓氯化钠(1-2 mol/L)溶液中,脱氧核糖核蛋白的溶解度很大,核糖核蛋白的溶解度很小,在稀氯化钠(0.14 mol/L)溶液中,脱氧核糖核蛋白的溶解度很小,核糖核蛋白的溶解度很大。因此,可利用不同浓度的氯化钠溶液,将脱氧核糖核蛋白和核糖核蛋白从样品中分别抽提出来。 将抽提得的

质粒DNA提取实验

碱解法SDS碱裂解法(试剂盒提取)实验方法原理碱裂解法是基于DNA的变性与复性差异而达到分离目的的。碱性使质粒DNA变性,再将pH值调至中性使其复性,复性的为质粒DNA,而染色体DNA不会复性,缠结成网状物质,通过离心除去。实验材料大肠杆菌                              

质粒DNA提取实验

            实验方法原理 碱裂解法是基于DNA的变性与复性差异而达到分离目的的。碱性使质粒DNA变性,再将pH值调至中性使其复性,复性的为质粒DNA,而染色体DNA不会复性,缠结成网状物质,通过离心除去。

dna提取实验步骤

利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA,将沉淀溶于水中,使DNA充分溶解于水中,离心后收集上清液。在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M。加入2倍体积95%乙醇,立即用搅拌法搅出。分别用66%,80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,既得DNA样品。此法提取的DNA中

质粒DNA提取实验

实验方法原理 质粒多为一些双链、环状的DNA分子,是独立于细菌染色体之外进行复制和遗传的辅助性遗传单位。质粒是进行分子生物学实验操作,进行遗传工程改良物种等工作时最主要的DNA载体。 提取质粒的基本步骤分为三步:①细菌的培养和质粒的扩增②细菌菌体的裂解③质粒DNA的纯化实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒

植物DNA提取实验

机械法             实验方法原理 这是一种快速简便提取植物总DNA的方法。先将新鲜的叶片在液氮中研磨,以机械力破碎细胞壁,然后加入十六烷三甲基溴化铵分离缓冲液,使细胞膜破

植物DNA提取实验

实验方法原理 真核细胞基因组在提取过程中一般有以下几步,首先是机械法破细胞抽提;然后去除蛋白质,糖类等细胞内杂质污染;最后纯化出DNA。实验材料 幼嫩的植物材料试剂、试剂盒 液氮CTAB抽提缓冲液NaACTris-HCl EDTA氯仿异戊醇TE buffer仪器、耗材 瓷研钵离心管离心机实验步骤 一

动物DNA提取实验

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