人白血病耐药细胞株传代培养及注意事项
人白血病耐药细胞株安全性:所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。收到细胞后,在倒置镜下zui好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。具体步骤如下:(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换 10ml新鲜培养液后继续培养。(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒放于37℃培养箱1-3分钟预热,之后翻转培养瓶10-30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。如果没有特别说明,收到细......阅读全文
细胞传代培养具体的操作步骤和注意事项
悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代,或用离心法后,加入新培养基后再吹打分散进行传代贴壁细胞实验需准备超净台喷洒酒精,紫外照射30min。准备好培养瓶/皿,离心管,10%DMEM,0.25%胰酶,D-hanks液等,带上手套,口罩等,倒去旧培养基,用D-hanks液清洗一遍,去除沉
细胞传代培养
实验概要 细胞生长至高密度时,即须分殖至新的培养瓶中,一般稀释比例为1:3 至1:6,依细胞种类而异。实验材料 无菌磷酸生理缓冲液(Dulbecco’s phosphate-buffered saline, Ca /Mg free, D-PBS,GibcoBRL 21600-010)
细胞传代培养
一、原理细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱和,为使细胞能继续生长,同时也将细胞数量扩大,就必须进行传代(再培养)。传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以,而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。二、材料和试剂1、细胞:贴壁细胞株2、试剂
人胰腺癌裸小鼠模型的建立实验
实验方法原理 将人胰腺癌细胞株8988 接种于裸鼠腋窝处皮下,每周测量肿瘤大小,第42d 处死小鼠。肿瘤组织及相关脏器送病理及电镜检查,放射免疫法检测相关抗原。皮下肿瘤组织细胞及细胞株培养,HE 染色。 实验材料 裸小鼠BALB c nu-nu胰腺癌细胞株8988 试剂、
人胰腺癌裸小鼠模型的建立实验
实验方法原理 将人胰腺癌细胞株8988 接种于裸鼠腋窝处皮下,每周测量肿瘤大小,第42d 处死小鼠。肿瘤组织及相关脏器送病理及电镜检查,放射免疫法检测相关抗原。皮下肿瘤组织细胞及细胞株培养,HE 染色。实验材料 裸小鼠BALB c nu-nu胰腺癌细胞株8988试剂、试剂盒 RPMI-1640 完全
细胞株的概念
通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株(Cell Strain)。
细胞株的保存
1. 紫外消毒30min后关闭紫外灯,开启超净台正常工作状态,用酒精消毒操作者的双手。2. 将所需的培养基,胰酶确保瓶身干净后放于工作台面内,点燃酒精灯,将培养基和胰酶瓶口用酒精棉球擦拭后,再将瓶口对准在酒精灯上消毒2-3次,旋开瓶盖后再次分别消毒瓶口和瓶盖,分别放于酒精灯的两侧。特别是将培养基瓶放
如何保存细胞株?
1. 紫外消毒30min后关闭紫外灯,开启超净台正常工作状态,用酒精消毒操作者的双手。 2. 将所需的培养基,胰酶确保瓶身干净后放于工作台面内,点燃酒精灯,将培养基和胰酶瓶口用酒精棉球擦拭后,再将瓶口对准在酒精灯上消毒2-3次,旋开瓶盖后再次分别消毒瓶口和瓶盖,分别放于酒精灯的两侧。
细胞株的概念
细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。原代培养物经首次传代成功后即为细胞系(cell line), 由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代,或传代次数有限, 可称为有限细胞系(finite cel
稳定细胞株构建
稳转细胞系(稳定表达细胞株)指在细胞中持续稳定表达特定基因或干扰特定基因表达。稳转细胞株的目的基因质粒DNA整合到细胞染色体上,使细胞长期稳定表达该基因。稳转细胞株包括多克隆稳转细胞株和单克隆稳转细胞株。慢病毒感染目的细胞后,通过抗性基因筛选得到的细胞株是多个细胞克隆的组合。单克隆细胞株是从多克隆细
《基因与发育》:造血微环境影响白血病细胞增殖和耐药
8月30日出版的《基因与发育》(Gene and Development)杂志上发表的一篇报道说,造血微环境中的细胞因子影响白血病细胞增殖和对靶向治疗的耐药。 美国田纳西州圣·犹大儿童研究医院的Charles J. Sherr博士说:“对靶向治疗耐药并不是单纯因为白血病细胞本身遗传学改变,耐药是癌症
靶向治疗儿童耐药性白血病的最新疗法出炉
曼彻斯特大学的研究人员已经发现细胞表面的一种蛋白(5T4)是导致几种最常见儿童期白血病产生化疗抵抗的罪魁祸首。早期检测表明,使用抗体药物联合疗法(ADC)靶向作用于蛋白有望改善疗效。 这项由血癌慈善基金资助的研究发表在《血液病学》杂志上。 儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)的存活率在过去几年内
哺乳动物细胞培养过程--培养条件
哺乳动物细胞培养过程 & 培养条件导语:哺乳动物细胞在培养过程中会经过组织提取,原代培养,传代培养等过程。传代培养会根据具体情况分为细胞株培养和细胞系培养。哺乳动物细胞培养过程哺乳动物细胞在培养过程中会经过组织提取,原代培养,传代培养等过程。传代培养会根据具体情况分为细胞株培养和细胞系培养。如下对各
二倍体细胞寿命实验
二倍体细胞( diploid cell)具有有限的增殖能力,此增殖能力决定于供体的物种与年龄,如小鼠细胞分裂约12次,鸡细胞分裂约25次,成年人成纤维细胞体外能倍增20代,胚胎成纤维细胞能倍增50代,故可采用分离的二倍体细胞观察药物对寿命的影响,由于体外细胞的衰老与体内的衰老有一定相关性,可预测
二倍体细胞寿命实验
二倍体细胞( diploid cell)具有有限的增殖能力,此增殖能力决定于供体的物种与年龄,如小鼠细胞分裂约12次,鸡细胞分裂约25次,成年人成纤维细胞体外能倍增20代,胚胎成纤维细胞能倍增50代,故可采用分离的二倍体细胞观察药物对寿命的影响,由于体外细胞的衰老与体内的衰老有一定相关性,可预测
苏木的药理作用
抗炎作用巴西苏木素对角又菜胶所致大鼠脚关节水肿的试验表明其有抗炎活性,并比洋苏木精更强。 抗菌作用对革兰氏阳性和阴性菌均有抗菌作用。 抗肿瘤作用水提取液对人早幼粒白血病细胞株、人红髓白血病细胞株、小鼠淋巴瘤细胞株、小鼠成纤维瘤细胞株均有明显的杀伤作用。 其他作用苏木还有一定的镇痛、利尿、中
β-内酰胺酶耐药及对策
β-内酰胺酶的分类,主要包括分子结构分类(根据氨基酸序列的不同)及根据β-内酰胺酶底物谱和酶抑制剂谱分型(Bush 1995分型)两种。分子结构分类可以将β-内酰胺酶分为A、B、C、D四类,该分类将超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)归于其中A类,质粒型头孢菌素酶(Amp C酶)归
肿瘤细胞体外传代培养及保种
实验材料 肿瘤细胞试剂、试剂盒 液氮EDTA保种液仪器、耗材 恒温水浴锅低温离心机方瓶CO2培养箱-70度冰箱弯管显微镜离心管滤膜实验步骤 一、细胞复苏与培养 将液氮或-80℃保存的肿瘤细胞于37℃ 水浴, 快速溶化, 用8.0ml 培养基混匀已融化的肿瘤细胞悬液, 于1500 转/分, 离心3
肿瘤细胞体外传代培养及保种
肿瘤细胞体外传代培养及保种可应用于:(1)研究癌变机理;(2)抗癌药检测;(3)癌分子生物学研究。实验方法原理肿瘤细胞在组织培养中占有核心的位置,是比较容易培养的细胞。癌细胞形态不规则,细胞界限清晰,对营养要求不高,在体外培养可无限制传代而不凋亡。体外培养的细胞一旦建立细胞系就需要进行一系列细胞生物
细胞培养传代培养的实验步骤和注意事项
实验步骤1.入无菌室之前用肥皂洗手,用75%酒精擦拭消毒双手。2.倒置显微镜下观察细胞形态,确定细胞是否需要传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液置37℃下预热。3.超净台台面应整洁,用0.1%新洁尔灭溶液擦净。4.打开超净台的紫外灯照射台面20min左右,关闭超净台的紫外灯,打开抽风机清洁空气,除去
简述普卡霉素的药理学
普卡霉素对革兰阳性细菌有强大抗菌作用,对HeLa细胞有明显细胞毒作用,对P388白血病、Lewis肺癌、Ca755腺癌、S180及W-256等均有较强的抗肿瘤作用。它可抑制DNA及RNA的合成,主要是后者;本品与DNA形成稳定的复合物,干扰DNA的模板作用,从而选择性地抑制RNA合成。它亦可抑制
从多角度了解人源细胞系
人源细胞系(通过选择的永生细胞株,包括HeLa、OVCAR-3和LNCaP等常见癌症细胞系) 人源细胞系是一个统称,实验室常用的有结肠癌肿瘤细胞系,该细胞系中可检测到活跃的人源。 人神经胶质细胞系,衍化神经营养因子(GDNF)ELISA试剂盒,常用检测步骤: (1)将待检血清用稀释液从1:10
警惕!你所用的专利细胞系可能是错的!
专利细胞系(Patented Cell Lines)是指获得专利保护的细胞系。这意味着在专利期限内,其他人不能随意使用或销售该细胞及利用该细胞制造的产品,除非获得专利持有人的授权或许可。专利细胞系通常用于新药物、生物制品的研究和开发,以及其他生物医学上的应用。例如,某些药物公司可能拥有某些细胞系的专
人T细胞白血病病毒的定义
中文名称人T细胞白血病病毒英文名称human T cell leukemia virus定 义一种与人T细胞白血病相关的反转录病毒。
Science子刊:新型药物组合可有效治疗耐药性白血病
急性髓性白血病(AML)的患者或许找到了治疗疾病的希望,近日,刊登在国际杂志Science Translational Medicine上的一项研究报告中,来自伊丽莎-霍尔研究所(Walter and Eliza Hall Institute)的研究人员通过研究发现了一种新型方法可有效杀灭恶性增
人胃癌细胞实验要点及注意事项
人胃癌细胞实验要点及说明:1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理; 3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费
人胃癌细胞实验要点及注意事项
人胃癌细胞实验要点及说明:1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理; 3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和
小鼠骨髓瘤细胞知识点
1.细胞株稳定,易于传代培养。2.细胞株自身不会产生免疫球蛋白或细胞因子。3.目前最常用的骨髓瘤细胞是NS-1和SP2/O细胞株。4.该细胞是次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转化酶(HGPRT)或胸腺嘧啶激酶(TK)的缺陷株。
小鼠骨髓瘤细胞知识点
1.细胞株稳定,易于传代培养。2.细胞株自身不会产生免疫球蛋白或细胞因子。3.目前最常用的骨髓瘤细胞是NS-1和SP2/O细胞株。4.该细胞是次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转化酶(HGPRT)或胸腺嘧啶激酶(TK)的缺陷株。
细胞传代培养实验
体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代,以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞,并维持细胞种的延续。二氧化碳培养箱是通过在培养箱箱体内模拟形成一个类似细胞/组织在生物体内的生长环境,培养箱要求稳定的温度(37°C)、稳定的CO2水平(5%)、恒定的酸碱度(pH值:7.2-7.4)