人白血病耐药细胞株传代培养及注意事项
人白血病耐药细胞株安全性:所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。收到细胞后,在倒置镜下zui好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。具体步骤如下:(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换 10ml新鲜培养液后继续培养。(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒放于37℃培养箱1-3分钟预热,之后翻转培养瓶10-30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。如果没有特别说明,收到细......阅读全文
人白血病耐药细胞株传代培养及注意事项
人白血病耐药细胞株安全性:所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。收到细胞后,在倒置镜下zui好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。具体步骤如下:(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放
人乳腺癌阿霉素耐药细胞株细胞特性
人乳腺癌阿霉素耐药细胞株细胞特性:1)组织来源于实验动物的眼球。2)细胞鉴定:广谱角蛋白(PCK)免疫荧光染色为阳性。3)经鉴定细胞纯度高于90%。4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。5)细胞生长方式:扁平的椭圆形、梭形或不规则形,不规则细胞,贴壁培养。运输和保存:视
人乳腺癌阿霉素耐药细胞株检测步骤
人乳腺癌阿霉素耐药细胞株检测步骤:1. 将凋亡细胞裂解后高速离心,其上清液中含有核小体2. 在微定量板上吸附组蛋白体3. 加上清夜使抗组蛋白抗体与核小体上的组蛋白结合4. 加辣过氧化物酶标记的抗DNA抗体使之与核小体上的DNA结合5. 加酶的底物,测光吸收制检测原理:细胞发生凋亡或坏
如何构建耐药细胞株?
肿瘤细胞对化疗药物产生耐药性是肿瘤治疗失败的重要因素之一,成为目前阻碍肿瘤治疗的绊脚石。因此,探索肿瘤细胞产生耐药的原因以及如何改善肿瘤细胞对化疗药物耐药仍是目前研究的热点和难点。肿瘤细胞耐药的产生是一个复杂的过程,它的机制广泛牵涉到药物代谢学、病理学、生理学等多个学科,这就决定了肿瘤细胞对化疗药物
体内耐药细胞株的建立实验
体内耐药细胞株的建立实验是通过细胞与低剂量的药物长期接触,引起细胞本身生物化学过程的改变,细胞膜上出现Pgp(或P-170)糖蛋白,使细胞逐渐对药物耐受。实验方法原理细胞与低剂量的药物长期接触,引起细胞本身药物化学过程的改变,细胞膜上出现Pgp糖蛋白,使细胞逐渐对药物耐受,随着药物浓度的递增,其耐受
体内耐药细胞株的建立实验
实验方法原理 细胞与低剂量的药物长期接触,引起细胞本身药物化学过程的改变,细胞膜上出现Pgp糖蛋白,使细胞逐渐对药物耐受,随着药物浓度的递增,其耐受程度逐渐加强。实验材料 小鼠瘤株试剂、试剂盒 肝素生理盐水仪器、耗材 离心机实验步骤 一、材料准备1. 动物选择:根据欲建立的耐药细胞株,选择合适的动
新型抗白血病药物耐药机制研究
转录基因的表观调控在肿瘤等疾病的发展过程中起着重要作用。其中,核小体组蛋白赖氨酸N-端残基的乙酰化,对遗传表观基因的调控尤为重要。乙酰化赖氨酸存在于近两千个蛋白质中,参与了许多细胞变化过程。Bromodomains是包含110个氨基酸的蛋白质功能结构域,可选择性识别组蛋白末端乙酰赖氨酸位点,参与
人如何感染严重耐药结核?
肺结核(即肺部结核,最常见的感染部位)患者通常具有传染性,并可通过咳嗽、打喷嚏或只是交谈传播该病,因为这会驱使结核细菌扩散到空气中。人只要吸入少量这些病菌,即受到感染(虽然只有少数人感染结核病)。有时候如果这些细菌来自耐药结核患者,它们早已具有耐药性。形成耐多药结核或严重耐药结核的第二个途径是患者自
microRNA-芯片联合应用探究胃癌细胞株原发性耐药分子机制
microRNA 芯片与表达谱芯片的联合应用——探究胃癌细胞株的原发性耐药的分子机制 药物耐受是肿瘤治疗领域的一大难题,一般分为两种类型:其一为原发性耐药,即先前未经治疗的肿瘤细胞天生就对某种药物不敏感;其二是获得性耐药,指经过治疗的肿瘤细胞再次接受该药物治疗时变得不敏感。 目前,
HepG2/ADR细胞人细胞阿霉素耐药株注意事项
1. 上述操作方案的数据可作为参考,实际操作已实验室配备的耗材为准,2. 冻存时含 10%DMSO,事先加 9ml 培养液是为了稀释 DMSO,理论上 1%DMSO对细胞性3. 隔着 PE 手套能有效防止水浴过程中导致污染4. 重悬的体积只是作为参考,具体的根据需要可进行调整5. 由于复苏过程中已经
GBCSD人胆囊癌细胞传代培养
细胞培养过程中,传代是非常重要的环节,若操作不当会给细胞带来不可逆转的伤害,原代细胞因其培养难度高且传代次数有限,细胞消化的步骤需要格外细心与谨慎。根据其丰富的原代细胞培养经验,总结出一套细胞消化的方法,有效降低了消化步骤对细胞的操作。文韧生物现分享给大家:1. 当细胞达到80-90%融合时需要传代
简述注射用三氧化二砷的药理毒理
急性早幼粒细胞白血病(APL)是急性髓性白血病的一种亚型,其重要的细胞遗传学特征是t(15;17)染色体易位,累及15号染色体上早幼粒细胞性白血病基因(PML)和17号染色体上的维甲酸受体基因(RARα),产生异常的PML-RARα融合基因,表达癌蛋白PML/RARα,已知PML/RARα既能阻
NEJM:微小突变引发常见白血病耐药性
最近,一个多结构研究小组发现,一个微小突变,使常见白血病——慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者对brutinib(一种高效精确的靶向抗癌药物)产生了耐药性。2014年5月28日在《新英格兰医学杂志》(New England Journal of Medicine)发表的一篇通讯中,研究人员阐述了该
NEJM:微小突变引发常见白血病耐药性
最近,一个多结构研究小组发现,一个微小突变,使常见白血病——慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者对brutinib(一种高效精确的靶向抗癌药物)产生了耐药性。2014年5月28日在《新英格兰医学杂志》(New England Journal of Medicine)发表的一篇通讯中,研究人员阐述了该
HepG2/ADR细胞人细胞阿霉素耐药株培养注意事项
1. 收到HepG2/ADR细胞人细胞阿霉素耐药株。后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。2. 仔细阅读HepG2/ADR细胞人细胞阿霉素耐药株。说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致。若由
-人二倍体细胞狂犬病疫苗的主要功能
人二倍体细胞狂犬病疫苗(HDCV)为美国Wistar研究所首创,将固定毒株(PV,PM和HEP等)在人二倍体细胞株 WI-38(第一个人二倍体细胞株)适应传代培养,随后法国Merieux研究所改用胎儿肺细胞株MRC-5培养病毒,以此为基础生产的狂犬病HDCV于1974年12月在法国被批准应用;
人二倍体细胞狂犬病疫苗的功能作用
人二倍体细胞狂犬病疫苗(HDCV)为美国Wistar研究所首创,将固定毒株(PV,PM和HEP等)在人二倍体细胞株 WI-38(第一个人二倍体细胞株)适应传代培养,随后法国Merieux研究所改用胎儿肺细胞株MRC-5培养病毒,以此为基础生产的狂犬病HDCV于1974年12月在法国被批准应用;
关于人二倍体细胞狂犬病疫苗的简介
人二倍体细胞狂犬病疫苗(HDCV)为美国Wistar研究所首创,将固定毒株(PV,PM和HEP等)在人二倍体细胞株 WI-38(第一个人二倍体细胞株)适应传代培养,随后法国Merieux研究所改用胎儿肺细胞株MRC-5培养病毒,以此为基础生产的狂犬病HDCV于1974年12月在法国被批准应用;紧
人二倍体细胞狂犬病疫苗的概念和功能
人二倍体细胞狂犬病疫苗(HDCV)为美国Wistar研究所首创,将固定毒株(PV,PM和HEP等)在人二倍体细胞株 WI-38(第一个人二倍体细胞株)适应传代培养,随后法国Merieux研究所改用胎儿肺细胞株MRC-5培养病毒,以此为基础生产的狂犬病HDCV于1974年12月在法国被批准应用;紧接着
科研人员发现儿童白血病耐药和复发原因
由来自上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心等机构的国内外科研人员组成的课题组,在国际上首次发现磷酸核糖焦磷酸合成酶1(PRPS1)基因突变是儿童急性淋巴细胞白血病治疗出现耐药和复发的重要原因之一。5月11日,相关成果在线发表于《自然—医学》杂志。 儿童白血病治疗出现耐药和复发是导致患者死亡的
人胰腺癌裸小鼠模型的建立实验
人胰腺癌裸小鼠模型的建立用于:(1)胰腺癌的诊断;(2)胰腺癌治疗的研究;(3)观察胰腺癌细胞株在移植前后形态学是否发生变化。实验方法原理将人胰腺癌细胞株8988 接种于裸鼠腋窝处皮下,每周测量肿瘤大小,第42d 处死小鼠。肿瘤组织及相关脏器送病理及电镜检查,放射免疫法检测相关抗原。皮下肿瘤组织细胞
HL60细胞(人原髓细胞白血病细胞)培养注意事项
细胞名称:HL-60(人原髓细胞白血病细胞) 细胞别称:HL 60;HL60 细胞货号:SNL-040 生长特性:悬浮 培养条件:1640+10%FBS+1%P/S 培养环境:空气,95%;二氧化碳(CO2),5%;37℃ 细胞简介:HL-60细胞是源自一位患有急性粒-单核细胞白血病
详解细胞株冻存和复苏实验注意事项
1. 细胞株取材要求新鲜,无菌,解剖小鼠时,注意不要损伤脾脏及其周围的脏器,尤其是肠道等,防止污染脾脏。2. 冲洗脾脏时要尽量洗净血污,去除无用组织,并要防止组织干燥。3. 碾磨后及时用清水冲洗筛网,防止组织、细胞阻塞网孔。4. 计数前,注意吸尽平皿里的细胞,充分混匀,使细胞分散成单个细胞。5. 实
其它动物细胞株操作步骤与注意事项
其它动物细胞株注意事项: (1)欲冷冻保存之细胞应在生长良好(logphase)且存活率高之状态,约为80–90%致密度。 (2)冷冻前检测细胞是否仍保有其特有性质,例如hybridoma应在冷冻保存前一至二日测试是否有抗体之产生。(3)注意冷冻保护剂之品质。DMSO应为试剂级等级,无菌且无色(以0
耶鲁学者PNAS发现克服白血病耐药性的机制
耶鲁大学癌症中心领导的一项最新研究中,研究人员发现了一种新的白血病代谢门控机制,这种机制取决于一种称为PON2的分子,这种分子可能有助于提出白血病的的新治疗方案。 这一研究结果2月1日在线发表在PNAS杂志上。 B细胞是适应性免疫系统的效应细胞,其特征在于能量水平低,可防止转化为白血病。在这
抗肿瘤药物研究及新药筛选(四)
三、抗肿瘤药物筛选及评价 以国立肿瘤研究所(Nationai Cancel Institute NCI)为代表的美国抗肿瘤药物筛选模式经历了三个发展阶段。• 1955-1985年,以动物移植性肿瘤为基本模型,以动物生命延长率和瘤重抑制率为药物活性的基本评价指标,此阶段是以化合物为本位的体内筛选方
如何进行细胞原代培养
如何进行细胞原代培养细胞原代培养和传代培养的区别原代细胞(primary cell) 是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞,称为原代细胞。一般认为,培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。
如何进行细胞原代培养
如何进行细胞原代培养细胞原代培养和传代培养的区别原代细胞(primary cell) 是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞,称为原代细胞。一般认为,培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。
细胞传代培养具体的操作步骤和注意事项
悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代,或用离心法后,加入新培养基后再吹打分散进行传代贴壁细胞实验需准备超净台喷洒酒精,紫外照射30min。准备好培养瓶/皿,离心管,10%DMEM,0.25%胰酶,D-hanks液等,带上手套,口罩等,倒去旧培养基,用D-hanks液清洗一遍,去除沉
细胞传代培养具体的操作步骤和注意事项
悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代,或用离心法后,加入新培养基后再吹打分散进行传代贴壁细胞实验需准备超净台喷洒酒精,紫外照射30min。准备好培养瓶/皿,离心管,10%DMEM,0.25%胰酶,D-hanks液等,带上手套,口罩等,倒去旧培养基,用D-hanks液清洗一遍,去除沉