HILIC模式下的色谱柱平衡操作

【ACE色谱柱】HILIC模式下的色谱柱平衡摘要 为了得到稳定及可重复的保留时间,在分析之前用流动相充分平衡HILIC柱,必须确保在固定相表面存在稳定的吸附水层。相似的,在执行一轮梯度洗脱运行后,色谱柱需要用梯度开始的条件重新平衡,形成稳定的吸附水层。 平衡 在液相色谱中,为了得到稳定及可重复的保留时间,必须用流动相充分平衡色谱柱到稳定状态。在等度或者梯度模式下,色谱柱没有充分的时间平衡,是导致重复分离性差的常见原因。 等度洗脱 反向色谱中,在分析之前,为了充分平衡色谱柱,应用至少十倍柱体积的流动相流过色谱柱。表1 显示通用液相色谱柱规格的近似柱体积。如果升高使用温度,必须延长平衡时间使色谱柱的温度达到稳定平衡。 表1.全多孔颗粒填装的常用液相色谱柱规格的近似柱内容积 HILIC模式......阅读全文

HILIC模式下的色谱柱平衡操作

【ACE色谱柱】HILIC模式下的色谱柱平衡摘要    为了得到稳定及可重复的保留时间,在分析之前用流动相充分平衡HILIC柱,必须确保在固定相表面存在稳定的吸附水层。相似的,在执行一轮梯度洗脱运行后,色谱柱需要用梯度开始的条件重新平衡,形成稳定的吸附水层。 平衡    在液相色谱中,为了得到稳定及

ACE-HILIC色谱柱方法开发指南Ⅴ--HILIC法平衡要点

HILIC法平衡时间在RPLC模式下,可再现保留所需的典型柱平衡约为10倍柱体积。图14中可清楚反映这一点但是,对于HILIC分离则不同。通常,HILIC色谱柱的平衡时间比RPLC色谱柱的更长。这是该技术的一个特点,也是可再现保留所必需的。在固定相粒子周围建立和形成稳定的水合层对可再现HILIC色谱

ACE-HILIC色谱柱方法开发指南Ⅲ--HILIC法色谱条件

HILIC流动相HILIC模式中用作流动相的溶剂类似于RPLC模式下所用的溶剂。流动相条件是各种HILIC保留机制的关键因素。通过改变洗脱液中有机组分和水组分的比例,可以改变分析的保留率。在HILIC模式下,保留因子建议保持在1.5-10之间。有机改性剂HILIC中最常用的有机改性剂是非质子溶剂乙腈

HILIC色谱柱的优势特点介绍

色谱柱法是指用气体作为流动相的色谱法。由于样品在气相中传递速度快,因此样品组分在流动相和固定相之间可以瞬间地达到平衡。另外加上可选作固定相的物质很多,因此HILIC色谱柱法是一个分析速度快和分离效率高的分离分析方法。近年来采用高灵敏选择性检测器,使得它又具有分析灵敏度高、应用范围广等优点。 HILI

HILIC色谱柱的维护和保养

液相色谱是样品组分在柱填料与活动相之间质量交换而达到分离的目的,因此要求活动相具备以下的特点:  a、活动相对样品具有一定的溶解能力,保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保存在柱中)。  b、活动相具有一定惰性,与样品不产生化学反应(特殊情况除外)。  c、活动相的黏度要尽量小,以便在使用较长的分析

色谱柱的平衡

关于峰形的变化多加一节番外——关于色谱柱的平衡,这一点也是一般书中不会多讲的,但是实际工作中很容易遇到的,所以小编单独开一节。当然,由于引起峰形异常的原因非常明确——仅仅是柱子未平衡完全,所以下文中主要谈到的是如何平衡以及不合理的平衡措施所产生的影响。 色谱柱平衡未完全也会引起峰形的变化,当然,未平

色谱柱的平衡

关于峰形的变化多加一节番外——关于色谱柱的平衡,这一点也是一般书中不会多讲的,但是实际工作中很容易遇到的,所以小编单独开一节。当然,由于引起峰形异常的原因非常明确——仅仅是柱子未平衡完全,所以下文中主要谈到的是如何平衡以及不合理的平衡措施所产生的影响。 色谱柱平衡未完全也会引起峰形的变化,当然,未平

HILIC色谱柱的四大优势

HILIC色谱柱法是指用气体作为流动相的色谱法。由于样品在气相中传递速度快,因此样品组分在流动相和固定相之间可以瞬间地达到平衡。另外加上可选作固定相的物质很多,因此HILIC色谱柱法是一个分析速度快和分离效率高的分离分析方法。近年来采用高灵敏选择性检测器,使得它又具有分析灵敏度高、应用范围广等优点。

HILIC色谱柱的清洗溶剂如何选择?

  一般而言,HILIC色谱柱用淋洗液保存即可。若需要长时间保存,需要向柱内泵入3%硼酸溶液,然后取下柱子,用无孔接头将柱子两端堵死,放在通风干燥处保存。短时间不用,建议每周开机一次。  当色谱柱被玷污后,柱效会有所下降,保留时间缩小,分离度下降。清洗时,将色谱柱与抑制器分离,让废液直接排出流速不宜

ACE-HILIC色谱柱方法开发指南Ⅱ--HILIC的分离机制

HILIC分离机制HILIC是一种复杂的分离技术,通过多种相互作用模式来实现保留。这些相互作用的权重(中哪种是主要作用)是基于固定相、流动相和分析物的理化特性。为了得到可靠和稳健的HILIC方法,了解潜在的不同相互作用(了解可能存在的不同相互作用)是很有帮助的。这样可以为待进行的方法开发合理选择色谱

ACE-HILIC色谱柱方法开发指南Ⅵ--HILIC应用实例(二)

较早洗脱峰的保留窗口(时间段)非常窄,这表示:等度HILIC可用于分离分析物。(等度方式的HILIC可以被用于分离这些化合物)10mM甲酸铵,pH3.0(溶于MeCN/H2O中)(94:6 v/v)被选为等度条件(图20)。在这些条件下,峰4和5要保留得更多(好),但峰2和3仍未解析出(被分离)。根

ACE-HILIC色谱柱方法开发指南Ⅵ--HILIC应用实例(一)

ACE HILIC法开发平台和工作实例图17显示了HILIC方法开发的流程图。一般方法是:收集分析物相关的信息(如果已知的话),针对三个ACE HILIC相(用三款不同的ACE HILIC色谱柱在不同的pH洗脱液条件下)执行梯度或等度HILIC筛选实验(取决于样本分析物的亲水性范围),然后再优化色谱

如何平衡色谱柱?

平衡过程中,将流速缓慢地提高   用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线(缓冲盐或离子对试剂度如果较低,则需要较长的时间来平衡)色谱柱的再生  进行色谱柱再生时,应使用一个谦价的泵,我们建议zui好不使用您的高效液相色谱仪上的泵。      表1 建议用来冲洗的溶剂体积      色谱柱尺寸 柱体积

ACE-HILIC色谱柱方法开发指南Ⅰ--HILIC的优劣势剖析

引言亲水作用色谱(HILIC)采用与反相液相色谱(RPLC)类似的洗脱液,为亲水性或极性到(至)极性很强的分析物提供了适宜的保留和分离替代方法(适宜的保留和分离提供了替代方法)。RPLC的特征在于保留较少或无保留,所以这类亲水性分析物(log P 值约为零或更小的那类分析物)的保留是一种挑战(这些亲

ACE-HILIC色谱柱方法开发指南Ⅳ--HILIC仪器兼容性

ACE HILIC色谱柱检测器兼容性HILIC是一种能很好兼容众多主流检测器的技术。因此,检测的(检测器的)选择受检测器可用性、所需的检测限制和分析物的理化特性(即:具有发色团或电荷)等综合因素的影响。 UV-Vis检测器UV-Vis检测器是分析试验室中最常见的检测器之一。根据仪器的不同,一次可记录

TSKGEL-HILIC系列色谱柱促销

  为答谢广大客户平素的厚爱,TSK-GEL HILIC 系列色谱柱 ,近日起至2011年12月31日将实行半价促销  东曹(上海)生物科技有限公司   电话(Tel): 021-3461-0856   传真(Fax): 021-3461-0858   网址: www.separations.

HILIC色谱柱的四大优势介绍

色谱柱法是指用气体作为流动相的色谱法。由于样品在气相中传递速度快,因此样品组分在流动相和固定相之间可以瞬间地达到平衡。另外加上可选作固定相的物质很多,因此HILIC色谱柱法是一个分析速度快和分离效率高的分离分析方法。近年来采用高灵敏选择性检测器,使得它又具有分析灵敏度高、应用范围广等优点。 HILI

色谱柱的平衡及组成

色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成,压力不高于70 kg/cm2 时,也可采用厚壁玻璃或石英管,管内壁要求有很高的光洁度。为提高柱效,减小管壁效应,不锈钢柱内壁多经过抛光。也有人在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度,其效果与抛光相同。还有

反相色谱柱的平衡方法

聚合物基质的反相色谱柱采用了聚甲基丙烯酸酯聚合物,制备而成具有不同孔径和粒径大小的各种规格的产品。TSKgel 聚合物基质反相色谱柱适用于较宽的pH范围,即使在高pH下也具有很好的重复性。这类色谱柱在pH2-12下表现出极其稳定的化学特性。因此,在硅胶基质色谱柱适用受限的碱性pH下仍然可以使用。  

反相色谱柱的平衡方法

反相色谱柱的平衡方法    聚合物基质的反相色谱柱采用了聚甲基丙烯酸酯聚合物,制备而成具有不同孔径和粒径大小的各种规格的产品。TSKgel 聚合物基质反相色谱柱适用于较宽的pH范围,即使在高pH下也具有很好的重复性。这类色谱柱在pH2-12下表现出极其稳定的化学特性。因此,在硅胶基质色谱柱适用受限的

HILIC色谱柱工作时的几则贴心提示

一般情况下HILIC色谱柱应贮存在4℃-室温下,如果放置于0℃以下的环境里,柱内就会结冰,这也将导致柱效的降低。几天之内的短期放置,应先用溶剂冲洗好色谱柱(如凝胶柱则用蒸馏水来冲洗),再把色谱柱的两头用密封螺丝密封好即可。如果色谱柱长期不用,应使用色谱柱使用说明书中所指明的溶剂来充满色谱柱,再把色谱

hilic色谱柱的分离机理主要包括什么

hilic色谱柱的分离机理主要包括以下三个方面:(1)分配机理(2)离子交换(3)偶极-偶极相互作用。 hilic色谱柱采用了极性改性的固定相,能够在其表面形成一层富水层,从而增强了对一些强极性化合物的保留能力,有效地克服了反相色谱柱对该类化合物保留能力差的缺点。与传统的反相色谱柱不同,hilic色

HILIC色谱柱的清洗溶剂选择看过来!

 一般而言,HILIC色谱柱用淋洗液保存即可。若需要长时间保存,需要向柱内泵入3%硼酸溶液,然后取下柱子,用无孔接头将柱子两端堵死,放在通风干燥处保存。短时间不用,建议每周开机一次。  当色谱柱被玷污后,柱效会有所下降,保留时间缩小,分离度下降。清洗时,将色谱柱与抑制器分离,让废液直接排出流速不宜过

HILIC色谱柱工作时的几则贴心提示

  一般情况下HILIC色谱柱应贮存在4℃-室温下,如果放置于0℃以下的环境里,柱内就会结冰,这也将导致柱效的降低。几天之内的短期放置,应先用溶剂冲洗好色谱柱(如凝胶柱则用蒸馏水来冲洗),再把色谱柱的两头用密封螺丝密封好即可。如果色谱柱长期不用,应使用色谱柱使用说明书中所指明的溶剂来充满色谱柱,再把

色谱柱的平衡和再生技巧

反向色谱柱在经过出厂测试后是保存在甲醇(或乙腈)/水中的。请一定确保您所使用的活动相和甲醇(或乙腈)/水互溶,由于色谱柱在运输过程中可能会干掉,因此在用活动相分析样品之前,应使用分10-20倍的体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱。  假如您所使用的活动相中含有缓冲盐,应留意用含水量很高(约95%)的活动

平衡和维护色谱柱的步骤

平衡色谱柱操作步骤:1.平衡开始时将流速缓慢地提高,用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线(缓冲盐或离子对试剂流速如果较低,则需要较长的时间来平衡)2. 如果使用的流动相中含有缓冲盐,应注意用纯水"过渡"即每天分析开始前必须先用纯水冲洗30分钟以上再用缓冲盐流动相平衡;分析结束后必须先用纯水冲洗30分

简介液相色谱柱的平衡

  反相色谱柱由工厂测试后是保存在乙腈/水中的。新柱应先使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈冲洗色谱柱。请一定确保您分析样品所使用的流动相和乙腈/水互溶。 每天用足够的时间以流动相来平衡色谱柱,您就会在处理问题方面获得最大的"补偿",而且您的色谱柱的寿命也会变得更长!操作步骤:  a. 平衡开始时将流

白度仪色差模式下的操作

  白度仪用于测量物体表面的兰光白度,利用积分球实现绝对光谱漫反射率的测量,由卤钨灯发出的光线,经聚光镜和滤色片成兰紫色光线,进入积分球,光线在积分球内壁漫反射后,照射在测试口的试样上,由试样反射的光线经聚光镜、光栏滤色片组后由硅光电池接收,转换成电信号。     其在色差模式下的两个样品比较色差方

沃特世新品-XBridge-HILIC-液相色谱柱

用于解决强极性化合物的色谱分离难题 6月18日,马萨诸塞州米尔福德–沃特世公司宣布 (WAT:NYSE)XBridge™ 分析色谱柱系列,将增加一个新成员-XBridge HILIC色谱柱。此产品能够有效地提高极性化合物的保留,而如果用传统反相色谱柱,则极性化合物保留很弱。现在全球的用户都可以从沃

HILIC色谱柱跑出来的峰严重拖尾

出峰快结束的时候又出来一个不全的峰,对于这种情况,很有可能是你的柱子不干净,才用梯度洗脱法冲洗柱子。单元泵的话,用几个不同比例的流动相冲洗柱子,至基线稳定。色谱柱走出来的峰型拖尾很严重,这个有好几种原因:流动相的比例,如甲醇:水的比例不一样,出峰时间和拖尾程度不一样的,还有你的柱型是否和检测物质匹配