D萤光素Protocol在生物发光检测中的应用

D-萤光素,萤火虫萤光素酶的化学发光底物,广泛用于体外生物发光、体内活体成像。萤萤之光,照亮您的科研之路! ■ Q: D-萤光素的作用原理D-萤光素 (D-Luciferin) 是萤火虫萤光素酶 (Firefly Luciferase) 的化学发光底物。在ATP 和萤光素酶存在下,萤光素能够被氧化发光 (图 1) 。当萤光素过量时,发光亮度与萤光素酶浓度呈正相关。通过萤光素/萤光素酶生物发光体系,可以非常灵敏、高效地检测基因表达、肿瘤生长、药物反应等。图 1. D-萤光素发光原理 ■ Q: 游离态和盐形式的 D-萤光素,怎么选? 目前市面上主要有 3 种 D-萤光素,D-萤光素游离酸 (HY-12591A)、钠盐 (HY-12591) 和钾盐 (HY-12591B)。D-萤光素钠盐、钾盐易溶于水,而游离酸形式难溶于水,需要适当的碱中和才能溶于水。配成溶液后,这 3 种形式的 D-萤光素生物活性相当。......阅读全文

D萤光素-Protocol-在生物发光检测中的应用

D-萤光素,萤火虫萤光素酶的化学发光底物,广泛用于体外生物发光、体内活体成像。萤萤之光,照亮您的科研之路! ■ Q: D-萤光素的作用原理D-萤光素 (D-Luciferin) 是萤火虫萤光素酶 (Firefly Luciferase) 的化学发光底物。在ATP 和萤光素酶存在下,萤光素能够被氧化发

关于萤光素酶的生物发光介绍

  生物发光现象是在生物体内,由于生命过程的变化,化学反应将化学能转化为光能而发光的现象。生物发光在英语中名为bioluminescence,该词为合成词,是由希腊语中代表生命的bios与拉丁语中意为光的lumen组合而成。大部分发光与三磷酸腺苷(ATP)有关,发光的化学反应不限于在细胞内外发生。对

萤火虫萤光素酶在ATP检测中的应用

前言:生物发光是一种在生物体内由酶将化学能转化为光能的现象,在自然界中有超过30种生物发光体系,而我们所熟知的萤火虫的发光体系就是其中研究最早,应用也最广泛的一种。萤火虫的发光现象是由其体内的萤光素酶(luciferase)的催化下三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP

萤光素酶的应用

萤光素酶可以在实验室中用基因工程的方法生成,并被用于多种不同的实验。萤光素酶的基因可以被合成并插入到生物体中或转染到细胞中。研究者利用基因工程已经使得小鼠、家蚕、马铃薯等一些生物可以合成萤光素酶。间接体外成像是一种强大的研究手段,可以对整个动物体中的细胞群落进行分析:将不同类型的细胞(骨髓干细胞、T

概述萤光素酶的应用

  萤光素酶可以在实验室中用基因工程的方法生成,并被用于多种不同的实验。萤光素酶的基因可以被合成并插入到生物体中或转染到细胞中。研究者利用基因工程已经使得小鼠、家蚕、马铃薯等一些生物可以合成萤光素酶。间接体外成像是一种强大的研究手段,可以对整个动物体中的细胞群落进行分析:将不同类型的细胞(骨髓干细胞

萤光素酶的应用介绍

萤光素酶可以在实验室中用基因工程的方法生成,并被用于多种不同的实验。萤光素酶的基因可以被合成并插入到生物体中或转染到细胞中。研究者利用基因工程已经使得小鼠、家蚕、马铃薯等一些生物可以合成萤光素酶。间接体外成像是一种强大的研究手段,可以对整个动物体中的细胞群落进行分析:将不同类型的细胞(骨髓干细胞、T

上转发光技术在食品病原微生物检测中的应用

近年来,由食源性致病微生物引发的疫情不断发生,食品安全已成为世界各国共同面临和关注的问题,由病原微生物引起的食源性疾病是影响食品安全最主要的因素之一。快速而准确地检测出被称为“头号杀手”的食品致病菌,是确保食品安全的首要任务,因此建立一种快速、准确、便捷的检测技术,对于从源头制止食源性致病菌污染,预

IVIS-视角-|-使用生物发光成像实时监测体内葡萄糖摄取

  在活体成像技术中,一些新的光学探针及光调控技术的出现,拓展了该技术的应用领域。上期给大家分享了检测活性氧的探针,能够在活体水平监测局部炎症中活性氧自由基(ROS)的释放,以及基于肿瘤微环境中高ROS水平介导的自发光动力效应,实现肿瘤诊疗一体化。   今天给大家分享一篇2019年发表在《Na

使用生物发光成像实时监测体内葡萄糖摄取

在活体成像技术中,一些新的光学探针及光调控技术的出现,拓展了该技术的应用领域。上期给大家分享了检测活性氧的探针,能够在活体水平监测局部炎症中活性氧自由基(ROS)的释放,以及基于肿瘤微环境中高ROS水平介导的自发光动力效应,实现肿瘤诊疗一体化。 今天给大家分享一篇2019年发表在《Nature Me

D二聚体检测在骨折患者中的应用

D-二聚体是纤维蛋白单体经过活化因子XIII交联后,再经过纤维溶解酶水解所产生的一种特异性降解产物,是一个特异性的继发性纤溶症的重要指标,其含量的升高反映高凝状态、继发纤溶亢进和血栓形成。近年来由于血栓性疾病的增多,临床上对D-二聚体(D-dimer)的检测需求越来越大。D-二聚体的检测方法,从传统

亲和素-生物素系统在ELISA中的应用

亲和素是一种糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每个分子由4个亚基组成,可以和4个生物素分子亲密结合。维生素H,分子量244.31,存在于蛋黄中。用化学方法制成的衍生物,生物素-羟基琥珀亚胺酯(biotin-hydroxysuccinimide,BNHS)可与蛋白质、糖类和酶等多种类型的大小分子

绿萤光蛋白的发光原理

我们知道,荧光的发光是被一定波长光激发后,电子被激发到高能级,随后向低能级跃迁的过程中发出比激发光波长更长的荧光,这也就是上面提到的受激辐射。我们将能接受光辐射,并跃迁发出颜色光的基团叫做生色团。绿色荧光蛋白含有一个三肽的单位Ser(65)-Tyr(66)-Gly(67),在蛋白质折叠的时候,这三个

关于Promega萤光素酶技术发光史里程碑介绍

  1990年12月,Promega首次提出萤火虫萤光素酶(Luc)作为一种新兴报告基因技术的应用可能性。当时的人们认为,萤火虫萤光素酶具备的生物发光特性、极高的灵敏度和快速简单的检测流程等特点,可能会对分子生物学家的研究产生重要的影响。几个月后,第一代萤火虫萤光素酶报告基因载体和检测试剂在Prom

简述亲和素-生物素系统在ELISA中的应用

  亲和素是一种糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每个分子由4个亚基组成,可以和4个生物素分子亲密结合。维生素H,分子量244.31,存在于蛋黄中。用化学方法制成的衍生物,生物素-羟基琥珀亚胺酯(biotin-hydroxysuccinimide,BNHS)可与蛋白质、糖类和酶等多种类型的大小

双萤光素酶报告基因检测

  萤光素酶报告基因系统广泛应用于真核生物基因表达和细胞生理学研究,包括受体活性、转录因子、细胞信号转导、mRNA加工和蛋白质折叠等。萤光素酶是理想的报告基因,因为哺乳动物细胞中不含内源性萤光素酶,一旦转录完成立刻就生成功能性的萤光素酶。单萤光素酶报告基因实验往往会受到各种实验条件的影响,而双萤光素

生物检测技术在食品检测中的应用探析

  摘 要:在社会不断发展的进程当中,人们对于养生这一话题的关注度越来越高,如何实现身体健康,保障生命健康权利已经成为社会大众的要事。这就使得社会对于食品安全的关注度不断上升,食品检测工作的质量倍受关注。生物检测技术是进行食品检测工作的重要技术基础,加强生物检测技术在食品检测工作中的应用,可以大大提

生物检测技术在食品检测中的应用探析

  在社会不断发展的进程当中,人们对于养生这一话题的关注度越来越高,如何实现身体健康,保障生命健康权利已经成为社会大众的要事。这就使得社会对于食品安全的关注度不断上升,食品检测工作的质量倍受关注。生物检测技术是进行食品检测工作的重要技术基础,加强生物检测技术在食品检测工作中的应用,可以大大提高食品检

关于D二聚体检测在临床应用中的常见问题

   近年来,D-二聚体作为体内交联纤维蛋白水解的标志性产物,其临床诊断价值 已得到普遍认同。它以其高度的敏感性和阴性预示能力,在深静脉血栓(DVT)和肺栓塞(PE)的排除、弥散性血管内凝血(DIC)的诊断及溶栓治疗监测等方面具有良好的临床应用价值。虽然D-二聚体检测已得到推广普及,但在D-

萤光素酶的反应机制

萤光生成反应通常分为以下两步:萤光素 +ATP→ 萤光素化腺苷酸(luciferyl adenylate) +PPi萤光素化腺苷酸 +O2→ 氧萤光素 +AMP+ 光这一反应非常节省能量,几乎所有输入反应的能量都被转化为光。与之形成鲜明对比的是人类使用的白炽灯,只有约10%的能量被转化为光,剩余的能

关于萤光素酶的简介

  萤光素酶(英语:Luciferase)是自然界中能够产生生物发光的酶的统称,其中最有代表性的是一种学名为Photinus pyralis的萤火虫体内的萤光素酶。在相应化学反应中,荧光的产生是来自于萤光素的氧化,有些情况下反应体系中也包括三磷酸腺苷(ATP)。没有萤光素酶的情况下,萤光素与氧气反应

萤光素酶的生产反应

萤光生成反应通常分为以下两步:萤光素 +ATP→ 萤光素化腺苷酸(luciferyl adenylate) +PPi萤光素化腺苷酸 +O2→ 氧萤光素 +AMP+ 光这一反应非常节省能量,几乎所有输入反应的能量都被转化为光。与之形成鲜明对比的是人类使用的白炽灯,只有约10%的能量被转化为光,剩余的能

NanoLuc™萤光素酶技术

  NanoLuc™萤光素酶是Promega公司推出一种新型的萤光素酶,它具有分子量更小(19.1kDa, 171个氨基酸),发光更亮,比任何现有的生物发光酶用途更加广泛的特点,它是目前性能最好的生物发光报告基因之一。NanoLuc™萤光素酶的这些属性为报告基因检测提供了新的功能,在需要更高灵敏

NanoLuc™萤光素酶技术

        NanoLuc™萤光素酶是Promega公司推出一种新型的萤光素酶,它具有分子量更小(19.1kDa, 171个氨基酸),发光更亮,比任何现有的生物发光酶用途更加广泛的特点,它是目前性能最好的生物发光报告基因之一。NanoLuc™萤光素酶的这些属性为报

流式在微生物中的应用——细菌检测

在国外,流式细胞术(Flow cytometry, FCM)已在细菌常规工作中得到广泛的应用[1],而在国内起步较晚。目前已经在实验室研究、工业生产、临床诊断、环境评估等领域的细菌快速检测有所应用。FCM在实验室研究中的细菌检测应用细菌研究中常需要是菌体计数,常规计数方法是平板法和显微技术,缺点是误

常用报道基因的功能对比

道基因的对比报道基因作用方式优点缺点氯霉素乙酰基转移酶(CAT;细菌)CAT通过使乙酰基与抗生素共价连接的方式来解除氯霉素的毒性,报道基因实验通常检测n-丁酰基的一半从辅助因子n-丁酰辅酶A转移到具有放射活性的氯霉素上,被修饰的氯霉素的迁移率发生改变,并且能够掺入有机溶剂。没有内源活性;可使用自动化

D荧光素钾盐及D荧光素使用中的常见问题

1、D-荧光素适合做哪些实验? D-荧光素钾盐和5-氟-荧光素,作为Luciferase的作用底物,常用于以下实验:报告基因分析2. In vivo imaging (动物活体成像)3. In vitro imaging (细胞体外分析)4. ATP测定5. 其它luciferase及其基因相关的分

生物发光技术在生命科学中的应用

  随着发光(luminescence)技术在多种生物实验中的广泛应用,生物发光(bioluminescence)技术越来越成为首选的生物检测手段。在这篇文章中,我们将详细讨论生物发光技术在生物检测中的应用,以及它与其它发光检测手段相比所显示出的优点。   1 生物发光的特点   根据产生光子的

生物发光技术在生命科学中的应用

  随着发光(luminescence)技术在多种生物实验中的广泛应用,生物发光(bioluminescence)技术越来越成为首选的生物检测手段。在这篇文章中,我们将详细讨论生物发光技术在生物检测中的应用,以及它与其它发光检测手段相比所显示出的优点。   1 生物发光的特点   根据产生光子的

生物发光现象的应用

生物发光现象还启发人类从工程角度研究、模拟这种发光效率极高而产热量极少的荧光现象,新一代冷光源的研制就是一例。在应用方面,如军事上观察海洋动物发光的突然爆发,可以判别水下军事设施及其他各种敌对目的物。生化分析中,利用虫荧光素与虫荧光酶加在一起遇到ATP就会发出荧光,而且发光强度正比于ATP浓度的现象

萤光素酶的基本信息

萤光素酶(英语:Luciferase)是自然界中能够产生生物发光的酶的统称,其中最有代表性的是一种学名为Photinus pyralis的萤火虫体内的萤光素酶。在相应化学反应中,荧光的产生是来自于萤光素的氧化,有些情况下反应体系中也包括三磷酸腺苷(ATP)。没有萤光素酶的情况下,萤光素与氧气反应的速