酶标记物的纯化及鉴定
常用的纯化方法有葡聚糖凝胶G-200/G-150过柱层析纯化和50%饱和硫酸铵沉淀提纯等。常用免疫电泳或双相扩散法进行鉴定。1.出现沉淀线表示酶标记物中的抗体（抗原）具有免疫活性。2.沉淀线经生理盐水漂洗后，滴加酶的底物溶液，若沉淀线上显色，则酶标记物中的酶活性仍保留。......阅读全文
酶标记物的纯化及鉴定
常用的纯化方法有葡聚糖凝胶G-200/G-150过柱层析纯化和50%饱和硫酸铵沉淀提纯等。常用免疫电泳或双相扩散法进行鉴定。1.出现沉淀线表示酶标记物中的抗体（抗原）具有免疫活性。2.沉淀线经生理盐水漂洗后，滴加酶的底物溶液，若沉淀线上显色，则酶标记物中的酶活性仍保留。
酶标记物的纯化及鉴定
常用的纯化方法有葡聚糖凝胶G-200/G-150过柱层析纯化和50%饱和硫酸铵沉淀提纯等。常用免疫电泳或双相扩散法进行鉴定。1.出现沉淀线表示酶标记物中的抗体（抗原）具有免疫活性。2.沉淀线经生理盐水漂洗后，滴加酶的底物溶液，若沉淀线上显色，则酶标记物中的酶活性仍保留。
放射免疫分析标记物的纯化及鉴定
(1)纯化不论使用何种制备方法,要获得合格的标记化合物,都必须将反应物经过仔细的分离、纯化。另外,一些标记化合物,经过一定时间的存放后,可发生脱碘和自身辐射造成蛋白质被破坏形成碎片,会出现不纯物,故需对标记物重新纯化。125I标记反应后的混合液需进行分离纯化以除去游离 I 和其他试剂,纯化标记物的方
酶标抗体结合物的纯化
在酶标记的溶液中，出现的是各种交联物的混合物，有酶-抗体、酶-抗体-酶、抗体-抗体、酶-酶，甚至还有游离的酶和抗体。在这中间，除了抗体-酶和酶-抗体-酶外，其它都应该给予除去。1、50%饱和硫酸铵沉淀法。此法只能除去游离的酶及酶-酶聚合体。而不能除去其它不需要者。但是此法对酶标抗体的损耗少。2、过S
发光产品及标记物介绍
当底物发生化学反应而产生的能量以光的形式释放出来的时候，我们称这个过程为化学发光。鲁米诺（luminol）是最常用的化学发光试剂之一，被过氧化物氧化后它会产生一种激发态的产物--aminophthalate。这种产物衰变至低能态的同时释放出光子。ZL添加物可以提高鲁米诺反应的发光强度和持续时间（稳定
DNA酶切及鉴定
实验概要限制酶主要存在原核细胞中。多数来源于细菌，有的来源于蓝藻和链霉菌，极少数来源于支原体等微生物中，存在原核细胞的限制酶能在特异的识别位点切断外源DNA，如感染的噬菌体。而宿主细胞内的DNA则因它的一些特异识别位点常常由于其中一个碱基的甲基化被保护起来，从而使此位点不再成为限制酶的底物。限制性内
酶的分离纯化和纯度鉴定的实验方法及其原理
分离蛋白质混合物的各种方法主要是根据蛋白质在溶液中的以下性质：1）分子大小；2）溶解度；3）电荷；4）吸附性质；5）对其它分子的生物学亲和力等进行分离. 常见的分离提纯蛋白质的方法有：1、盐析与有机溶剂沉淀：在蛋白质溶液中加入大量中性盐,以破坏蛋白质的胶体性质,使蛋白质从溶液中沉淀析出,称为盐析.常
酶标记抗体试剂及器材的介绍
(1)0.1M PH6.8磷酸缓冲盐水(PBS)：取0.2M Na2HPO4 49ml, 0.2M NaH2PO4 51ml，NaCl1.8克，加蒸馏水至200ml。 (2)1.25%戊二醛液：取25%戊二醛50μl与PH6.8的PBS1ml混合。 (3)1M PH9.5碳酸盐缓冲液：取1M
溶菌酶的制备、纯化和鉴定
实验概要制备、纯化和鉴定溶菌酶实验原理溶菌酶,全称为1,4-β-N-溶菌酶,又称粘肽N-乙酰基胞壁酰水解酶,属于α-乳白蛋白家族。人们对溶菌酶的研究始于上世纪初,英国细菌学家Fleming发现人的唾液、眼泪中存在有溶解细菌细胞壁的酶,因其具有溶菌作用,故命名为溶菌酶；此后人们在微生物、植物、无脊椎动
代谢途径延伸策略为生物标记物的鉴定提供新思路
随着精准医学等概念的提出，代谢组学技术在生物标记物的发现及相关疾病的诊断、治疗和预后等环节中的重要作用日益彰显。尽管分析仪器的发展极大推动了生物标记物的测定，目前代谢物的首要鉴定手段仍依赖于将样品中所获得的一级、二级信息与在线数据库如HMDB、METLIN中所含标准品的信息进行比对。然而，数据库
土壤微生物的分离、纯化及初步鉴定
实验概要分离、纯化及初步鉴定土壤中的拮抗植物病原菌的放线菌。实验原理土壤是微生物的“天然培养基”，也是最丰富的菌种资源库，我们可以从中分离出众多放线菌，尤其是可以从耕作土壤中筛选出拮抗植物病原菌的放线菌。以耕作有武运粳和苏沪香粳的土壤为样品，应用稀释涂布平板法分离各种微生物。菌落计数后，通过菌落形态
酶标记的概念
中文名称酶标记英文名称enzyme labeling定 义一种免疫标记技术。即将酶与抗体或抗原结合，通过与底物反应而显色，用于示踪组织切片或细胞等标本中的相应抗原或抗体。应用学科免疫学（一级学科），应用免疫（二级学科），免疫学检测和诊断（三级学科）
酶标记抗体
酶标记物包括酶标记抗原、酶标记抗体和酶标记SPA等。酶标记物质量的好坏直接关系到免疫酶技术的成功与否，因此被称为关键的试剂。酶标记物中最常用的是酶标记抗体，它是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成。酶标记抗体的质量主要取决于纯度好、活性强及亲和力高的酶和抗体，其次要有良好的制备方法。目前，高质量的酶(
关于抗原–抗体反应的类型—免疫酶技术是以酶为标记物的介绍
免疫酶技术是以酶为标记物，即用酶标记抗体(或抗原)检测相对应的抗原(或抗体)的一种定位、定性和定量的技术。用化学方法使酶与抗原或抗体结合，形成酶标记物。当酶标记物与相应的抗原或抗体反应而形成酶标记物–抗原(或抗体)的免疫复合物后，与相应的酶底物作用时可生成有色的产物；酶降解底物的程度与所呈现的色
酶的纯化方法
在食品加工过程中使用的酶究竟要达到怎样的纯度主要取决于这样的考虑：一种酶制剂是否含有其他的酶或组分。一种食品级酶制剂必须符合食品法规，但不要求是纯酶，它可以含有其他的杂酶，当然还含有各种非酶的组分。这些杂酶和非酶组分对于食品加工可能会带来有益的或有害的作用。例如，用于澄清果汁的果胶酶往往是从霉菌粗提
酶的纯化介绍
在食品加工过程中使用的酶究竟要达到怎样的纯度主要取决于这样的考虑：一种酶制剂是否含有其他的酶或组分。一种食品级酶制剂必须符合食品法规，但不要求是纯酶，它可以含有其他的杂酶，当然还含有各种非酶的组分。这些杂酶和非酶组分对于食品加工可能会带来有益的或有害的作用。例如，用于澄清果汁的果胶酶往往是从霉菌粗提
质粒DNA的分离、纯化和鉴定
材料、设备及试剂 一、材料 含质粒的E. coli DH5α或JM系列菌株，1.5ml塑料离心管(又称eppendorf管),离心管架。 二、设备 微量取液器(20μl,200μl,1000μl)， 台式高速离心机，恒温振荡摇床， 高压蒸汽消毒器(灭菌锅)， 涡旋振荡器， 电泳仪，琼脂糖平板
血清免疫球蛋白的提取分离、纯化及鉴定4
V 蛋白质含量测定一、双缩脲法测定蛋白质浓度（一）目的了解并掌握双缩脉法测定蛋白质浓度的原理和方法。（二）原理具有两个或两个以上肽键的化合物皆有双缩脲反应，在碱性溶液中蛋白质与硫酸铜形成紫色络合物，在 540nm 处有最大吸收。在一定浓度的范围内，蛋白质浓度与双缩脲反应所呈的颜色深浅成正比，可用比色
血清免疫球蛋白的提取分离、纯化及鉴定3
一、试剂和器材1．试剂(1）消化液30％过氧化氢与硫酸与水的比例为3:2:1，即在1 份的蒸馏水中缓慢加入2 份的硫酸，待冷却后，将其加到3 份的过氧化氢中。临用时配制。(2) 催化剂 硫酸铜（CuSO4·5H2O ）与硫酸钾（K2SO4）以1 : 3 配比研磨混合。(3）40 ％氢氧化钠溶液 (4
血清免疫球蛋白的提取分离、纯化及鉴定2
二、组织样品在生化实验中，经常利用离体组织研究各种物质代谢途径和酶系的作用。或者从组织中分离、纯化核酸、酶以及某些有意义的代谢物质进行研究。但是，在生物组织中，因含有大量的催化活性物质，离体组织的采集必需在冰冷条件下进行，并日需尽快完成测定。否则其所含物质的量和生物活性都将发生变化。一般采用断头法处
血清免疫球蛋白的提取分离、纯化及鉴定6
VI 凝胶层析法分离纯化蛋白质一、目的了解凝胶层析的基本原理，并学会用凝胶层析分离纯化蛋白质。二、原理凝胶层析也称凝胶过滤、凝胶过滤层析、分子排阻层析和分子筛层析。凝胶是具有一定孔径的网状结构物质，凝胶层析是一种分子筛效应，主要用于分离分子大小不同的生物大分子以及测定其相对分子质量。相对分子质量小的
血清免疫球蛋白的提取分离、纯化及鉴定7
7．低相对分子质量标准蛋白质（上海产），开封后溶于200ml 重蒸水，加200ul2 倍样品缓冲液（还原缓冲液），分装20 小管，-20℃ 保存。临用前沸水浴3-5min。其相对分子质量如下： 标准蛋白质 Mr 兔磷酸化酶B 97400 牛血清白蛋白 66 200 兔肌动
血清免疫球蛋白的提取分离、纯化及鉴定5
（五）操作1．直接测定法在紫外分光光度计上，将未知的蛋白质溶液小心盛于石英比色皿中，以生理盐水为对照，测得280nm 和260nm 两种波长的吸光度。将280nm 及260nm 波长处测得的吸光度按下列公式计算蛋白质浓度。C = 1.45A280 — 0.74A260式中C：蛋白质质量浓度（mg/m
血清免疫球蛋白的提取分离、纯化及鉴定1
血液及组织样品的制备分析组织中某种物质的含量、探索物质代谢的过程和规律，经常使用动物的肝、肾、脑、粘膜和肌肉等组织，也选用全血、血浆、血清或者无蛋白血滤液等血液样品，有时也采用尿液、胃液等完成各种生化实验。掌握以上各种实验样品的正确处理和制备方法是保证生化实验顺利进行的关键。一、血液样品(一）采血测
酶标记的酶具有哪些特性？
用于标记抗体或抗抗体的酶须具有下列特性：有高度的活性和敏感性；在室温下稳定；反应产物易于显现；能商品化生产。 如今应用较多的有辣根过氧化物酶（HRP）、碱性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等，其中以HRP应用最广。
SELDI蛋白质纯化鉴定
实验目标针对血清、血浆、体液、组织、真菌、细菌、细胞培养物以及植物等样本的差异蛋白质组研究，以蛋白质芯片为载体，通过对目标疾病样本组及对照组之间进行鉴定，以期找到能够区分不同组别的差异峰，并通过对差异峰进行蛋白质鉴定找到与目标疾病密切关联的基因/蛋白。 实施方案 一、目标蛋白1.利用SELD
肿瘤标记物的作用
在与恶性肿瘤的斗争中，医生、患者和家属往往最关心(1)如何尽早发现肿瘤的产生、发展、转移？(2)如何尽快知道治疗是否有效？(3)如何提高治疗效果？这些问题涉及到如何提高恶性肿瘤的早期诊出率，如何有效监测治疗效果、以随时调整治疗方案，和使每位患者从每种治疗中得到更多益处等多方面的问题。X线诊断机、
肿瘤标记物的种类
甲胎蛋白（AFP） （1）原发肝癌80%AFP>400ng/ml，近20%AFP正常。AFP可早于影像学6－12月出现异常，为肝癌的早期诊断提供重要依据，建议肝硬化患者定期复查AFP。 （2）病毒性肝炎、肝硬化绝大部分AFP
免疫标记技术常用的标记物介绍
常用的标记物有荧光素、酶、放射性核素及胶体金等。免疫标记技术具有快速、定性或定量甚至定位的特点，是应用最广泛的免疫学检测技术。 常用的免疫荧光素主要有： 1 ．异硫氰酸荧光素 (FITC) ，最大吸收光谱为 490~495nm ，最大发射光谱为 520~530nm ，呈黄绿色荧光。 2 ．
酶标记抗体的概述
酶标记物包括酶标记抗原、酶标记抗体和酶标记SPA等。酶标记物质量的好坏直接关系到免疫酶技术的成功与否，因此被称为关键的试剂。酶标记物中最常用的是酶标记抗体，它是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成。酶标记抗体的质量主要取决于纯度好、活性强及亲和力高的酶和抗体，其次要有良好的制备方法。高质量的酶(如