丙肝病毒PCR检测操作规程

1. 样品处理:① 取50UL被检血清/血浆,加入试剂A200ul,试剂B50ul,用混匀器充分混匀到无颗粒状态。② 14000rpm离心5分钟。③ 取出上清80-100ul,加入等体积试剂C,混匀,14000rpm离心10分钟。④ 轻轻将液体全部倒掉,在滤纸上沾干残留部分。⑤ 加入200-400ul 75%预冷酒精,颠倒混匀,14000rpm离心5分钟。⑥ 轻轻倒掉液体,在滤纸上沾干残留部分,最后65℃烘箱烘干或94℃快速烘干备用。2. 反转录及PCR扩增① 反转录取 PCR Mix Ⅰ 28ul/人份×人份数加入 RT-Enzyme M......阅读全文

丙肝病毒PCR检测操作规程

1. 样品处理:① 取50UL被检血清/血浆,加入试剂A200ul,试剂B50ul,用混匀器充分混匀到无颗粒状态。② 14000rpm离心5分钟。③ 取出上清80-100ul,加入等体积试剂C,混匀,14000rpm离心10分钟。④ 轻轻将液体全部倒掉,在滤纸上沾干残留部分。⑤ 加入200-400u

丙肝病毒的检测方法

丙肝的主要传播途径是血液传播,尤其是会在不卫生的输血过程当中进行传播,检查丙型肝炎的方法主要是通过验血来对丙型肝炎病毒的抗体进行检测,丙肝病毒RNA的正常值是不超过500的,如果你体内的丙肝病毒RNA远远超过这个数字,很有可能证明你已经感染了丙肝病毒,需要进行及时的抗病毒治疗。

丙肝病毒定量检测方法

丙肝病毒检测手段,目前检测丙肝病毒核酸,使用的试剂是国产的和进口的两种类型的试剂。这两种类型的试剂检测灵敏度是不一样的,因为丙肝病毒有一个特点,在血清当中的浓度是比较低的,所以有时候病毒水平低的情况下,用灵敏度不高的试剂,可能病毒在低水平情况下,就会漏检,现在国产的试剂检测水平,病毒在100cps/

丙肝病毒暴露后,何时检测丙型肝炎?

  导语:一般来说,丙肝病毒(HCV)侵入人体后不会马上产生抗体,往往需要一段时间才能产生足够的可检测到的抗体。从病毒感染到能够从血中检测到抗-HCV的这段时间,称为丙肝病毒感染的“窗口期”。在这段“窗口期”时间内,尽管血清抗-HCV阴性,但实际上血液内已经存在丙肝病毒的复制,并具有传染性。   

丙肝检测结果注释

丙肝核心抗原(HCVcAg)丙肝抗体(HCVAb)丙肝RNA(HCV RNA)简要意义---没有感染丙肝病毒或早于14天感染,低于试剂最低检测灵感度-+-没有感染丙肝病毒或丙肝病毒感染后病毒已清除+-+丙肝病毒感染早期,丙肝抗体检测窗口期,有传染性--+早期丙肝病毒感染,12-14天感染,低于抗原最

丙肝核心抗原检测对丙肝诊断意义大

丙型肝炎呈全球性流行,每年新发丙型肝炎病例约3.5万例。我国一般人群抗-HCV阳性率为3.2%。在感染30年后HCV相关性肝细胞癌发生率平均为1%~3%。HCV感染的实验室检查是丙型肝炎诊断的重要依据,所以检测方法的选择和及早检出HCV非常重要。现行的HCV检测技术为HCV抗体检测和HCV RNA检

丙肝抗病毒治疗指南

  对于丙型肝炎,只要诊断确立,个管急性还是慢性符合适应症者,应尽早给予抗病毒治疗,急性丙肝抗病毒有效率可达80%-90%,效果比乙肝好。当前治疗丙肝,国内外尚无特效药,唯有IFNα治疗有一定疗效,当前被认为治疗丙肝的首选药物。另外,IFNα加病毒唑(RBV)联合治疗,IFNα和其他各种免疫促进剂如

以丙肝病毒血清样本为例介绍如何提高RNA病毒核酸检测...

以丙肝病毒血清样本为例介绍如何提高RNA病毒核酸检测灵敏度这段时间普通民众都是谈新冠病毒色变,无非印证了一句话「人们对不了解的事物才会感到恐惧」。为了减少我们的恐惧感,让我们来深入了解新闻发布会上不断提及的「新冠病毒核酸检测」吧。首先分享中国疾控中心发布的检测新冠病毒的引物、探针序列:推荐选用针对新

简述丙肝抗病毒治疗指南

  对于丙型肝炎,只要诊断确立,个管急性还是慢性符合适应症者,应尽早给予抗病毒治疗,急性丙肝抗病毒有效率可达80%-90%,效果比乙肝好。当前治疗丙肝,国内外尚无特效药,唯有IFNα治疗有一定疗效,当前被认为治疗丙肝的首选药物。另外,IFNα加病毒唑(RBV)联合治疗,IFNα和其他各种免疫促进剂如

我国丙肝病毒疫苗研发取得突破

  最近,中国科学院上海巴斯德研究所黄忠课题组与钟劲课题组合作,在丙型肝炎病毒(HCV)疫苗研究中取得突破性进展。其研究成果“糖基化类型的改变增强丙型肝炎病毒亚单位疫苗的免疫原性及保护性中和抗体的诱导能力”已在国际学术期刊Journal of Virology在线发表。  HCV感染是慢性肝炎的主要

丙肝病毒的生物学特性

  HCV病毒体呈球形,直径小于80nm(在肝细胞中为36~40nm,在血液中为36-62nm ),为单股  正链RNA病毒,在核衣壳外包绕含脂质的囊膜,囊膜上有刺突。HCV仅有Huh7, Huh7.5, Huh7.5.1三种体外细胞培养系统,黑猩猩可感染HCV,但症状较轻。  基因结构  HCV-

病毒性肝炎--丙肝知多少?

病毒性肝炎是由多种肝炎病毒引起的,以肝脏炎症和坏死病变为主的一组传染病。临床上主要表现为疲乏、食欲减退、肝肿大、肝功能异常等,部分患者会出现黄疸。在一些病人中,会导致肝纤维化、肝硬化,甚至发展为肝细胞癌(HCC)。目前全球约有数亿人感染肝炎病毒,每年造成几百万人死亡。在第六十九届世界卫生大会上,世界

Nature揭开丙肝病毒的关键结构

  丙肝病毒(HCV)的感染往往会导致慢性肝炎、肝硬化和肝癌。日前,Rutgers大学的科学家们确定了一个HCV表面蛋白的核心结构,文章于二月十九日发表在Nature杂志上。   Rutgers大学的副教授Joseph Marcotrigiano指出,这项研究描述了丙肝病毒的关键外部区域,该区

怎么看丙肝病毒RNA检查?

丙肝病毒RNA定量检查对丙肝的治疗起着至关重要的作用,丙肝病毒携带者和患者每6个月要做一次该项检查,以便对体内病毒复制情况有所监控了解,但大家在检查后通常对结果并不了解,     其实临床上对于丙肝病毒的检查可以分为:定性和定量检查两个部分,定性检查也是我们常说的阴性还是阳性,而定量检查就是具体的检

庚型肝炎病毒抗体检测操作规程

庚型肝炎病毒(HGV)呈世界性分布,与人类急性和(或)慢性肝炎有关。主要以血液途径传播,如输血及血制品、静脉吸毒、使用污染的注射器、经常接触血源等。HGV为单股正链RNA病毒,基因组全长9 392个核苷酸。基因结构分为:5’非编码区、编码区(结构区和非结构区)、3’非编码区,结构区编码核心蛋白和包膜

血液检测与输血安全

    近年,输血安全引起了社会的广泛关注,预防输血感染风险,血液检测是至关重要环节。江门市中心血站严格按照《血站实验室质量管理办法》、《献血者健康检查要求》和《血站技术操作规程》等相关法规要求开展献血前后检测工作,以保障献血者和受血者的安全。      一、献血前需现场扎手指取样验血筛查。筛查项目

PCR检测HCVRNA的临床应用

丙肝是世界广泛流行的传染病,我国丙肝感染率为3.2%,其中约有60~85%可发展成慢性肝炎,其中约有20%发展成肝硬化,少数会发展成原发性肝癌。丙肝是由丙型肝炎病毒(Hepatitis CVirus,HCV)引起的一种血液传播性疾病。丙肝病毒慢性感染可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化,部分患者可

PCR法检测乙肝病毒(HBV)

多聚酶链反应(polymerase chainreaction,PCR)是一种模拟天然DNA复制过程,在体外扩增特异性DNA(或RNA)片段的新技术。本实验是将待检双链DNA经94℃高温变性成单链作模板,然后加入一对人工合成的寡核苷酸引物,引物分别与待扩增DNA片段的两端互补,经55℃低温退火,

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PCR技术应用九:检测人COX病毒

  柯萨奇病毒(Coxsackie viruses简称Cox.病毒)是1948年Dalldorf等采用新生小鼠研究脊髓灰质炎病毒时,在纽约附近的Coxsackie分离发现的一种肠道病毒,属小RNA病毒科,可分为A、B二组.A组有23型(A1-22,24),B组有6型(B1-6),与A组的A9型有共同

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PCR法检测乙肝病毒(HBV)主要用于对病毒性肝炎的诊断、疗效观察及预防研究工作。实验方法原理多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是一种模拟天然DNA复制过程,在体外扩增特异性DNA(或RNA)片段的新技术。本实验是将待检双链DNA经94℃高温变性成单链作模板,

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            实验方法原理 多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是一种模拟天然DNA复制过程,在体外扩增特异性DNA(或RNA)片段的新技术。本实验是将待检双链DNA经94℃高温变性成单链作模板,然后加入一对人工合

美发现阻断丙肝病毒复制的方法

  美国科学家日前找到一种阻断丙型肝炎病毒复制的方法,这有可能为治疗丙肝找到新途径。   美国斯坦福大学研究人员在《科学—转化医学》(Science Translational Medicine)杂志网站上报告说,他们通过试管试验合成的一种蛋白质能够生成阻止丙肝病毒聚集或复制的化合物,从而破坏丙肝

PNAS:丙肝病毒利用线粒体的“断腕”

  日前,加州大学的研究人员向人们展示了丙肝病毒破坏线粒体的具体机制,文章发表在四月十五日的美国国家科学院院刊PNAS杂志上。这项研究不仅为揭示了丙肝病毒引发肝脏疾病的原因,还解释了为何丙肝病毒能够建立长时间的持续性感染。文章指出,线粒体可以作为对抗丙肝病毒的重要靶点。   丙型肝炎(hepati

乙肝和丙肝病毒的细胞系

  来源于一种人类肝肿瘤的细胞系表现出了乙肝和丙肝的感染和疾病进展,类似于在正常肝细胞中见到的,这提示它可能是一种开发肝炎疫苗和抗病毒疗法的模型。用于研究人类乙肝(HBV)或丙肝(HCV)病毒感染的实验细胞系已经被开发出来了,但是这些细胞系不支持这些病毒的整个生命周期。现有的细胞系的这些局限性为理解

人丙肝病毒核心抗原ELISA-检测试剂盒使用说明

本试剂仅供研究使用  标本:血清或血浆试验原理:HCV-cAg试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知HCV-cAg浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将HCV-cAg和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合

PCR检测输血传播病毒DNA的临床应用

在急慢性输血后肝炎、散发性肝炎、急性重型肝炎及肝硬化病例中,有部分病例无法用已建立的甲、乙、丙、丁、戊型肝炎的实验室诊断方法进行病原学分型。继1995年发现庚型肝炎病毒(HGV)后,1997年日本学者Nishizawa等[1]报道了应用代表性分析法发现了一种可能与输血后肝炎相关的病毒,暂时称为输血传

RTPCR技术检测猪流感病毒

 根据猪流感病毒siv的M 基因的序列,设计合成了1对引物,建立了检测猪流感的RT-PCR方法。应用该方法对Hl、H3、H9亚型的猪流感病毒进行基因扩增,均获得了分子量为460bp的特异性目的片段,而对PRRSV、PCV2、PI 、CSFV进行同条件检测,结果均为阴性;SIV扩增产物测序结果与SIV

乙型肝炎病毒DNA荧光PCR定量检测

Ct值是荧光定量PCR的一个指标,代表达到设定阈值所需要的循环数。一般Ct值越小定量值越高。通俗地将,这个检测结果的意义是:通过荧光定量PCR的方法检测血液中乙肝病毒DNA的量。仪器测得Ct值为18.20,根据Ct值与定量DNA之间的换算公式,计算出每毫升血中含有82450000(八千多万)个乙肝病