双因子杂交试验中F2的重组类型

重组类型是指性状重组类型,即与亲本(不是F1)不一样的性状类型。设亲本为黄圆(AABB)和绿皱(aabb),F2有9:3:3:1的性状比例,9指黄圆,3、3指绿圆、黄皱,1指绿皱。重组类型为绿圆和黄皱,所占比例为(3+3)/16=3/8。......阅读全文

果蝇的双因子杂交材料、原理和步骤

一、实验目的:通过两对性状个体杂交,观察F2的分离现象及其比例,了解两对非等位基因间的自由组合。同时掌握果蝇的杂交技术,并学会记录交配结果和掌握统计处理方法。 二、实验材料: 灰体残翅 EEvgvg 黑檀体长翅 eeVgVg 三、实验原理: 果蝇的灰体基因(E)

双因子杂交试验中F2的重组类型

重组类型是指性状重组类型,即与亲本(不是F1)不一样的性状类型。设亲本为黄圆(AABB)和绿皱(aabb),F2有9:3:3:1的性状比例,9指黄圆,3、3指绿圆、黄皱,1指绿皱。重组类型为绿圆和黄皱,所占比例为(3+3)/16=3/8。

果蝇单因子杂交实验(图)

根据孟德尔的颗粒遗传学理论,基因是一个独立的结构与功能单位.在杂合状态时不发生混淆,完整地从一代传递到下一代.由该基因的显隐性决定其在下一代的性状表现。单因子杂交是指一对等位基因间的杂交。孟德尔第一定律指出,一对杂合状态的等位基因保持相对的独立性,其自交后代中表型分离比为 3 : l 。本实验将观察

双杂交和其他双成分系统实验

            实验材料 载体和酵母菌 试剂、试剂盒 缓冲液和溶液 SDS 凝胶上样缓冲液 SDS 聚丙烯酰胺凝胶

果蝇的单因子杂交材料、原理和步骤

一、实验目的: 通过实验深刻理解孟德尔分离定律;学习遗传学实验结果记录及统计处理方法。 二、实验材料: 野生型:长翅(+ / +) 突变型:残翅(vg / vg) 三、实验原理: 果蝇

果蝇的双因子实验

实验方法原理 自由组合定律的实质是基因的分离是独立的,而在配子中非等位基因自由组合,产生四种比例相同的配子。因此在杂种二代会出现四种表型,比例为9:3:3:1。这一实验是利用果蝇的两对相对性状:长翅与残翅、黑檀体与灰体且分别位于不同染色体上这一特征进行的长翅灰体×残翅黑檀体的双因子杂交实验,旨在验证

双杂交和其他双成分系统实验(一)

实验材料 载体和酵母菌试剂、试剂盒 缓冲液和溶液SDS 凝胶上样缓冲液SDS 聚丙烯酰胺凝胶核酸和寡核苷酸抗体培养基仪器、耗材 专用设备实验步骤 第一阶段  诱饵-LexA 融合蛋白的鉴定材料缓冲液和溶液将贮存液稀释到适当浓度。2XSDS 凝胶上样缓冲液100 mmol/L Tris-Cl(pH6.

双杂交和其他双成分系统实验(四)

21. 测定转录活化。这个实验可以利用牙签重新划线培养或利用多支管/蛙形器来进行,在分析大量阳性克隆时,多支管/蛙形器是非常有用的(有关蛙形器的详细情况请参见图 18-10)。1) 通过直接划线培养测定a. 使用一个平头牙签分别在下面的 4 个平板上复制和主板上相同的栅格。使用相同的牙签在四个平板上

双杂交和其他双成分系统实验(五)

离心机和转子Sorvall RT6000 离心机,H1000B MPC 和 H6000A MPC 转子(离心微量滴定板用)专用设备玻璃珠(直径 0.45 mm, 无菌;Sigma)微量滴定板(24 孔或 96 孔 [可选])重复用移液管可选,请参见步骤 1。附加试剂此方案的步骤 2 需要第 1 章方

双杂交和其他双成分系统实验(-一)

实验材料载体和酵母菌试剂、试剂盒缓冲液和溶液SDS 凝胶上样缓冲液SDS 聚丙烯酰胺凝胶核酸和寡核苷酸抗体培养基仪器、耗材专用设备实验步骤第一阶段  诱饵-LexA 融合蛋白的鉴定材料缓冲液和溶液将贮存液稀释到适当浓度。2XSDS 凝胶上样缓冲液100 mmol/L Tris-Cl(pH6.8)20

双杂交和其他双成分系统实验(二)

第二阶段  筛选一个相互作用子材料缓冲液和溶液将贮存液稀释至适当的浓度二甲基亚砜(DMSO)乙醇可选择,请参见步骤 9。冻存转化体用的无菌甘油溶液65% 无菌甘油0.1mol/LMgS0425 mmol/L Tris-Cl(pH8.0)TE(pH7.5)(无菌)TE(pH7.5),含 0.1mol/

双杂交和其他双成分系统实验(三)

第三阶段  阳性相互作用的再次确定材料缓冲液和溶液乙酸铵(7.5 ml/L)氯仿乙醇异丙醇裂解液酶解酶 100T 以 2~5 mg/ml 溶解于拯救缓冲液中或β-葡糖醛酸酶 100000 单位/ml(Sigma)按 1:50 稀释于拯救缓冲液中每次使用均需配置新鲜的溶液。酚(早衡至 pH8.0)拯救

双杂交和其他双成分系统实验(三)

方法转化文库1. 挑选一个在第一阶段的原始对照试验中状态最好的表达诱饵蛋白和 lexAop-lacZ 报道子的酵母菌落,接种于 20 ml CM(Glu)-Ura-His 液体培养基中,30°C 摇动过夜培养。重要:应该在用文库重新转化之前 7~10d 内,将诱饵蛋白和 lexAop-lacZ 报道

双杂交和其他双成分系统实验(二)

方法诱饵-LexA 融合蛋白的构建1.将编码诱饵蛋白的靶 DNA 克隆到 LexA 融合载体(如,pMW101 或 pMW103) 的多聚接头处,以合成一种框架内的 LexA 融合基因。确定诱饵序列的羧基端存在翻译终止序列。形成的质粒作为 pBait。2. 采用下列 LexA 融合基因和报道质粒的组

果蝇的双因子实验——正反交法

通过实验正确理解分离定律的实质,掌握果蝇的杂交技术,并学会记录交配结果和掌握统计处理方法。来源:《遗传学实验教程》实验方法原理自由组合定律的实质是基因的分离是独立的,而在配子中非等位基因自由组合,产生四种比例相同的配子。因此在杂种二代会出现四种表型,比例为9:3:3:1。这一实验是利用果蝇的两对相对

Northern杂交、Southern杂交和Western杂交有什么区别

区别:研究的对象不同。southern主要的对象是DNA,northern研究的对象是RNA,而western研究的对象为蛋白质。1、Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段

Northern杂交、Southern杂交和Western杂交有什么区别

区别:研究的对象不同。southern主要的对象是DNA,northern研究的对象是RNA,而western研究的对象为蛋白质。1、Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段

Northern杂交、Southern杂交和Western杂交有什么区别

区别:研究的对象不同。southern主要的对象是DNA,northern研究的对象是RNA,而western研究的对象为蛋白质。1、Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段

生物方面的双因子实验是什么意思

双因子就是有两个相对性状,有两组自由基因,AA,aa;BB,bb双因子遗传是指两对非等位基因位于两对非同源染色体上的遗传规律。由于两对基因的分离是独立的,配子之间的结合又是自由组合的。所以F2代中会出现9种基因型;4种表现型,比值为9:3:3:1

分子杂交技术Northern杂交的简介

  Northern杂交与Southern杂交很相似。主要区别是被检测对象为RNA,其电泳在变性条件下进行,以去除RNA中的二级结构,保证RNA完全按分子大小分离。变性电泳主要有3种:乙二醛变性电泳、甲醛变性电泳和羟甲基汞变性电泳。电泳后的琼脂糖凝胶用与Southern转移相同的方法将RNA转移到硝

杂交育种的杂交方式介绍

单杂交即两个品种间的杂交(单交)用甲×乙表示,其杂种后代称为单交种,由于简单易行、经济,所以生产上应用最广,一般主要是利用杂种第一代。复合杂交即用两个以上的品种、经两次以上杂交的育种方法。如果单交不能实现育种所期待的性状要求时,往往采用复合杂交,其目的在于创造一些具有丰富遗传基础的杂种原始群体,才可

体细胞杂交的杂交实验

不同种植物的原生质体可在人工诱导条件下融合,所产生的杂种细胞,即异核体经过培养可再生新壁,分裂形成愈伤组织,进而分化产生杂种植株。由于进行融合的原生质体来自体细胞,故该项技术也叫体细胞杂交。原生质体融合能使有性杂交不亲合的植物种间进行广泛的遗传重组,因而在农业育种上具有巨大的潜力。在植物遗传操作研究

southern杂交与northern杂交的区别

研究的对象不同。southern主要的对象是DNA,northern研究的对象是RNA。Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上。

southern杂交与northern杂交的区别

研究的对象不同。southern主要的对象是DNA,northern研究的对象是RNA。Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上。

杂交育种的杂交类型介绍

品种内杂交同一品种不同生态型间的杂交。品种间杂交(种内杂交)品种间杂交是指两个遗传基础不同的品种间、自交系间、自交不亲和系间或雄性不育系与恢复系间的杂交。种间杂交(属内杂交)同一属不同物种间的杂交。渐渗杂交将一些基因从一个物种转移到另一个物种的基因组中被称为“渐渗杂交”  。同一属或同一科不同属的不

Northern杂交

实验方法原理 转移并固定到膜上的 RNA 样品可以与特异的探针杂交,从而用来对所感兴趣的 RNA 进行定位。视实验人员和条件的差异,可以从多种方法中选择任意一种来标记和检测探针。用抑制非特异吸收探针的封闭试剂处理膜之后,在适于探针和固定的靶 RNA 杂交的条件下将膜同探针孵育,而后广泛洗

细胞杂交

在悬浮或单层培养细胞体系中融合细胞,用 PEG 处理细胞的时间应很短,以减少细胞的死亡。通常,在使用选择性培养基前,需给细胞 24 h 的恢复期。实验材料PEG试剂、试剂盒完全培养基无血清培养基NaOH仪器、耗材皮氏培养皿通用容器实验步骤PEG 1000 ( Merck):(a) 髙压处理PEG,将

细胞杂交

            实验材料 PEG 试剂、试剂盒 完全培养基 无血清培养基 NaOH

Northern杂交

转移并固定到膜上的 RNA 样品可以与特异的探针杂交,从而用来对所感兴趣的 RNA 进行定位。视实验人员和条件的差异,可以从多种方法中选择任意一种来标记和检测探针。用抑制非特异吸收探针的封闭试剂处理膜之后,在适于探针和固定的靶 RNA 杂交的条件下将膜同探针孵育,而后广泛洗膜以去除非特异结合的探针,

Western杂交

Western杂交l      组织印迹的Western杂交在硝酸纤维素膜上制备组织印迹1.在塑料板上放置两层Whatman 1号滤纸,在滤纸上方放上一张普通纸,然后铺上一层硝酸纤维素膜。2.用双面刀片从植物组织如大豆的茎上切取一块切片(厚度约为1mm)。如果组织表面是湿的,则在Kimwipes纸上