干细胞领军人物Cell子刊重大突破

日本神户理化学研究所进化生物学中心的干细胞生物学家Yoshiki Sasai近年来成为干细胞研究领域的领军人物。Sasai曾成功地将神经干细胞诱导生成精细结构,并利用干细胞培育出视杯、大脑皮层精细组织层和初级的生成激素的垂体。布鲁塞尔自由大学干细胞科学家Luc Leyns评价他的一系列论文是近年来最令人着迷的干细胞论文。 近日Sasai领导他的研究小组再度取得重大的突破性成果,成功地利用人类胚胎干细胞生成的第一个视网膜组织。相关论文发表在《细胞干细胞》(Cell stem cell)杂志上。 Sasai和同事们曾经开发出一种新型的细胞培养方法,将胚胎干细胞进行悬浮而非贴壁培养。在这样的条件下,当给予适当的生长因子组合时,培育的胚胎干细胞会自身形成复杂的三维结构。 在去年的Nature杂志上,Sasai研究小组报告称以这种方式培育的小鼠胚胎干细胞重演了发育机制,自动形成了称作视杯的杯状分层结构,这......阅读全文

胚胎干细胞培养

Media and Solution required for ES Cell Culture (Bowtell Lab)   Routine Culturing of ES Cells (Bowtell Lab)  Routine Splitting and freezing of cells (

胚胎干细胞培养技术大全

MEDIA AND SOLUTIONS REQUIRED FOR ROUTINE ES CELL CULTURERoutine Culturing of ES CellsISOLATION OF PRIMARY MOUSE EMBRYO FIBROBLASTSMITOMYCIN C TREATMEN

小鼠胚胎干细胞培养实验

体外分化法             实验方法原理 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择(第3步),在有bFGF存

小鼠胚胎干细胞培养实验

体外分化法             实验方法原理 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择(第3步),在有bFGF存

小鼠胚胎干细胞培养实验

实验方法原理 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择(第3步),在有bFGF存在的情况下扩增(第4步)并最终分化在第5步。细胞全程培养在37℃,5%CO2,100%湿度条件下。一般体外诱导向神经细胞方向分化,也可以采用低浓度的RA进

小鼠胚胎干细胞培养实验步骤

   一般培养-保持胚胎干细胞处于未分化状态   培养基   细胞复苏   冻存细胞   明胶包被   细胞传代    体外分化   培养基   包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板(使用或不使用盖玻片)   体外分化方法   注:以下培养针对于小鼠的R1胚胎干细胞系,其它胚胎

小鼠胚胎干细胞培养实验步骤

1、一般培养——保持胚胎干细胞处于未分化状态 培养基细胞复苏冻存细胞明胶包被细胞传代 2 、体外分化 培养基:包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板(使用或不使用盖玻片) 体外分化方法 注:以下培养针对于小鼠的R1胚胎干细胞系,其它胚胎干细胞的培养可以参考。不过人的胚胎干细胞培养不可以采用下面的pr

小鼠胚胎干细胞培养实验步骤(一)

一般培养-保持胚胎干细胞处于未分化状态培养基细胞复苏冻存细胞明胶包被细胞传代体外分化培养基包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板(使用或不使用盖玻片)体外分化方法注:以下培养针对于小鼠的R1胚胎干细胞系,其它胚胎干细胞的培养可以参考。不过人的胚胎干细胞培养不可以采用下面的protocol,需要用专用

小鼠胚胎干细胞培养实验步骤(三)

ITSFn and N3(分化培养基):配制一20×不含DMEM/F12的溶液。分装在15ml 离心管中,(稀释为1×,ITSFn 7.05ml,N3 12.55ml),0.2μm滤膜过滤,贮存在-20℃。将该溶液加入DMEM/F12中制备培养基,贮存于4℃。 贮存液          DMEM(高

小鼠胚胎干细胞培养实验步骤(四)

第3步--ITSFn培养基在最少量培养基中选择神经前体细胞1.在胚状体接种在组织培养皿一天后将培养基换成ITSFn培养基2.并非所有胚状体在这一时期都已经发生粘附,因此在移除培养基时要小心谨慎以使大部分胚状体留在培养皿内。3.保持细胞在ITSFn中培养大约10天,根据需要更换培养基--大约每隔一天。

小鼠胚胎干细胞培养实验步骤(二)

Geltin(明胶)包被准备500ml 0.1%geltin溶液1.将0.5 g明胶溶解在500ml无钙镁的PBS中(50-65℃水浴15~30分钟)。2.最好在溶液没有冷却的情况下通过0.22 μm滤膜过滤,贮存在4℃。包被培养板或培养皿1.加入足量的明胶溶液覆盖培养平面(15 cm培养皿加2ml

胚胎干细胞所发育感光细胞可融入视网膜

  据《自然—生物技术》上一项研究报告显示,在皮氏培养皿中培养小鼠胚胎干细胞所产生的感光细胞能与患有视网膜疾病的成年小鼠的视网膜相融合。这意味着,通过细胞疗法来矫正因视网膜疾病或损伤造成的失明的研究又迈进了一步。     在与年龄相关的黄斑退化和各种遗传视网膜疾病中,视网膜的功能会因为一种被称为“感

小鼠胚胎干细胞培养实验——体外分化法

小鼠胚胎干细胞培养可以:(1)细胞保种;(2)用于干细胞研究;(3)用于细胞生理学、形态学等研究;(4)动物克隆。实验方法原理胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择(第3步),在有bFGF存在的情况下扩增(第4步)并最终分化在第5步

胚胎干细胞培养标准操作规程(SOP)

一、细胞多能性胚胎干细胞产生于小鼠胚泡1.表达绿色荧光蛋白(EGFP)的B5-ES细胞。由Dr. Nagy的实验室制备。  2.D3-ATCC; CRL-1934. 我们得到时大约传了17代。  3.J1-由Dr. Jaenish的实验室友情提供。我们得到时大约传了7-9代。  4.J1rtTA-r

一种新的人胚胎干细胞培养方法

  为了能够适用于医学移植,人类胚胎干细胞(hESCs)需要保持一种“未分化”状态,即它们没有变换成其他类型的细胞。为了确定培养hESCs的最好方法能使它们保持未分化状态,也能生长、增殖和存活,研究人员经常使用动物来源的血细胞“饲养层”,通常来自于小鼠(小鼠胚胎成纤维细胞MEFs)。然而,这种方法存

干细胞领军人物Cell子刊重大突破

  日本神户理化学研究所进化生物学中心的干细胞生物学家Yoshiki Sasai近年来成为干细胞研究领域的领军人物。Sasai曾成功地将神经干细胞诱导生成精细结构,并利用干细胞培育出视杯、大脑皮层精细组织层和初级的生成激素的垂体。布鲁塞尔自由大学干细胞科学家Luc Leyns评价他的一系列论

干细胞领军人物Cell子刊重大突破

  日本神户理化学研究所进化生物学中心的干细胞生物学家Yoshiki Sasai近年来成为干细胞研究领域的领军人物。Sasai曾成功地将神经干细胞诱导生成精细结构,并利用干细胞培育出视杯、大脑皮层精细组织层和初级的生成激素的垂体。布鲁塞尔自由大学干细胞科学家Luc Leyns评价他的一系列论

欧阳宏伟小组实现用胚胎干细胞培养修复肌腱

  后腿膝盖部髌肌腱断裂的小白鼠,通过植入从胚胎干细胞分阶段分化而来的肌腱后,又恢复了正常的活动能力。浙江大学医学院欧阳宏伟教授带领课题组完成的这项研究成果,为应用胚胎干细胞治疗肌腱等软组织损伤提出了一条现实的实现途径。相关论文近日发表在目前干细胞领域最高影响因子的杂志《干细胞》(STEM CELL

科学家利用胚胎干细胞培养出“体外卵泡”

  在繁殖过程中,卵泡为卵母细胞提供了一个充满液体的囊性生殖环境,并提供生殖细胞所需的减数分裂和生长信号。近年来,使用多能干细胞重建生殖细胞发育即体外配子技术,已在哺乳动物物种(包括小鼠和人类)中得到应用。在小鼠中从多能干细胞衍生的原始生殖细胞样细胞 (PGCLC)培育出功能性卵母细胞,这对于应用于

科学家利用胚胎干细胞培养出“体外卵泡”

  在繁殖过程中,卵泡为卵母细胞提供了一个充满液体的囊性生殖环境,并提供生殖细胞所需的减数分裂和生长信号。近年来,使用多能干细胞重建生殖细胞发育即体外配子技术,已在哺乳动物物种(包括小鼠和人类)中得到应用。在小鼠中从多能干细胞衍生的原始生殖细胞样细胞 (PGCLC)培育出功能性卵母细胞,这对于应用于

protocol:小鼠胚胎干细胞培养实验方法和操作步骤2

体外向心肌细胞方向分化胚胎干细胞在体外去除LIF情况下会自然向心肌细胞方向分化,小鼠的R1系一般在第7-8天自然出现搏动的心肌细胞,与胚胎发育时间线是完全一致的。培养基:EB 配制一20×不含DMEM,FBS,LIF的溶液(该溶液也能用于ES培养基--见前述)。分装在50ml 离心管中,(稀释为

protocol:小鼠胚胎干细胞培养实验方法和操作步骤1

1、一般培养:保持胚胎干细胞处于未分化状态培养基细胞复苏冻存细胞明胶包被细胞传代2 、体外分化培养基包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板(使用或不使用盖玻片)体外分化方法注:以下培养针对于小鼠的R1胚胎干细胞系,其它胚胎干细胞的培养可以参考。不过人的胚胎干细胞培养不可以采用下面的protocol,

科学家首次利用胚胎干细胞培养出人造精子

  将为治疗男性不育带来希望,同时也存在巨大的道德和伦理争议      据国外媒体报道,英国科学家首次利用人类胚胎干细胞造出人造精子,这将为治疗男性不育症带来希望,不过这一最新成果也带来了巨大的道德和伦理争议。   医学专家估计这项最新科学成就可能最早在5年内就会被用于体外受精诊所,届时可以

protocol:小鼠胚胎干细胞培养实验方法和操作步骤3

体外分化方法第1步:ES培养基在LIF存在的条件下维持细胞培养第2步:EB培养基使用细菌培养皿去除LIF后胚状体的形成需要4天。1、分散纯化细胞(参见上面的细胞传代部分)2、纯化 2小时后将细胞转入含有ES培养基的50ml Falcon管中,计数细胞取适量体积放入15ml管中离心3分钟。3、用2ml

胚胎干细胞培养有新法-软凝胶基质代替硬培养皿

  据美国每日科学网12月19日报道,美国研究人员发现,利用软凝胶基质代替硬培养皿来培养小鼠胚胎干细胞,无需添加昂贵的生长因子,便可让干细胞培养物长时间维持同质的多能状态。研究人员表示,这一技术在未来的再生医学中有着巨大的应用前景。相关论文发表在《公共科学图书馆・综合》杂志上。  干

英国干细胞疗法助几近失明的眼睛恢复视力

  英国两名“湿性”老年性黄斑变性患者接受胚胎干细胞疗法治疗,原本几近失明的眼睛恢复视力,能够视物、阅读,为治疗这种常见眼疾带来希望。   干细胞 (2).jpg   黄斑是视网膜的重要区域。“湿性”老年性黄斑变性患者的视网膜色素上皮细胞因血管渗漏受损,造成视力模糊不清,严重时失明。   英国

英国干细胞疗法助几近失明的眼睛恢复视力

英国两名“湿性”老年性黄斑变性患者接受胚胎干细胞疗法治疗,原本几近失明的眼睛恢复视力,能够视物、阅读,为治疗这种常见眼疾带来希望。 黄斑是视网膜的重要区域。“湿性”老年性黄斑变性患者的视网膜色素上皮细胞因血管渗漏受损,造成视力模糊不清,严重时失明。 英国穆尔菲尔德眼科医院利用人体胚胎干

英国干细胞疗法助几近失明的眼睛恢复视力

  英国两名“湿性”老年性黄斑变性患者接受胚胎干细胞疗法治疗,原本几近失明的眼睛恢复视力,能够视物、阅读,为治疗这种常见眼疾带来希望。   黄斑是视网膜的重要区域。“湿性”老年性黄斑变性患者的视网膜色素上皮细胞因血管渗漏受损,造成视力模糊不清,严重时失明。   英国穆尔菲尔德眼科医院利用人体胚胎

笹井芳树:培养皿中长出视网膜

视网膜  科学家已经可以诱导干细胞形成视网膜,这为很多眼疾患者带来希望。  在子宫里,一团相同的细胞分化成各种不同的模样,最终形成高度有序的结构,组装成人体的全副器官。这个过程依照内在的“生物学蓝图”有条不紊地进行,引导组织产生折叠、皱褶,精确形成适当的外形和大小。  科学家很熟悉这个由简单到复杂的

一种利用多能干细胞部分恢复视网膜功能的新方法

  眼睛中的光感受器退化是导致视力下降的主要原因之一,最终可能导致失明,目前尚无有效治疗方法。近期,杜克-新加坡国立大学医学院与卡罗林斯卡学院等机构的研究人员开发了一种新方法,能够促进人类胚胎干细胞(hESCs)分化为感光祖细胞,将这些细胞移植到实验模型中可以部分恢复视网膜功能。研究成果发表在《Mo