如何从动物肝脏中提取DNA？
一、原理： 在浓氯化钠（1—2mol/L）溶液中，脱氧核糖核蛋白的溶解度很大，核糖核蛋白的溶解度很小，在稀氯化钠（0.14 mol/L）溶液中，脱氧核糖核蛋白的溶解度很小，核糖核蛋白的溶解度很大。因此，可利用不同浓度的氯化钠溶液，将脱氧核糖核蛋白和核糖核蛋白从样品中分别抽提出来。 将抽提得的核蛋白用SDS（十二烷基硫酸钠）处理，DNA或（RNA）即与蛋白质分开，可用氯仿—异戊醇将蛋白质沉淀除去，而DNA则溶解于溶液中。向溶液中加入适量乙醇，DNA即析出。 为了防止DNA或（RNA）酶解，提取时加入EDTA（乙二胺四乙酸） 二、实验材料与仪器： 1、小白鼠肝脏 2、匀浆器 3、离心机5000r/min 4、量筒50ml（×1），25 ml（×1），10 ml（×1） 5、 吸管5 ml（×2） 6、水浴锅 7、真空干燥器 三、试剂： 1......阅读全文
病毒－DNA－的提取实验——新鲜或冷冻组织中病毒－DNA－的提取
实验材料新鲜或冷冻组织试剂、试剂盒匀浆缓冲液裂解液仪器、耗材剪刀匀浆器离心机实验步骤1. 取新鲜或刚解冻的组织去除血水和结缔组织，在冰浴上剪成小碎块。2. 将组织碎块移入预冷的匀浆器中，按 10 ml/g 加入匀浆缓冲液，混匀，制成匀浆液。3. 将匀浆液移人 Ep 管， 5000 r/min 离心1
使用Minilys均质器从植物叶子中提取DNA
简介Minilys与Precellys 24均是集研磨、裂解、均质为一体的多功能均质器。专门用来提取各种各样生物样本的DNA、RNA或蛋白质。其工作原理是通过三维高速振动和辅助研磨珠（玻璃珠、陶瓷珠、钢珠等）的敲打，达到对样品进行研磨、裂解、均质的目的。Minilys小巧、简洁，属于个人型均质器，而
CTAB－法从干燥材料中提取DNA的方法
从干燥材料中提取(1)粗提①试剂a.1倍 CTAB 提取缓冲液:2倍 CTAB 贮存液稀释1倍,使用前每100mL 加入巯基乙醇0.14mL。b.其他试剂与从新鲜材料中提取相同。②操作a.称取 1g 干燥材料置研钵中,加入3～4g 铝粉研磨。b.将粉末转入离心管中,加入0.6～15mL 1倍 CTA
Alnylam：从30％到5％，如何降低RNAi疗法的肝脏毒性？
RNAi疗法因为能够有效靶向普通药物无法靶向的蛋白而成为医药界所关注的医疗手段。但是与其它靶向疗法一样，RNAi疗法也会产生脱靶效应，而这些脱靶效应可能造成严重的毒副作用。日前，Alnylam Pharmaceuticals公司的研究人员对N-乙酰半乳糖 (GalNAc) 缀合的RNAi 造成肝
如何从脂肪组织中高效提取RNA？
前言RNA 的提取是肿瘤研究的重要内容。在乳腺癌的研究中，乳腺癌样品通常含有较高含量的脂肪组织和结缔组织，而脂肪组织由于密度小，通常漂浮于液面，使样品难以被充分研磨。若研磨不充分，会导致样品离心后不能得到明确清晰的分层，多数老师都会选择牺牲提取量以保证提取效果。深圳大学医学院的老师们正是遇到了上述的
如何从新鲜或冷冻材料提取－DNA
（1）DNA 的粗提 ①试剂 a.2倍 CTAB 提取缓冲液：100mmol/L Tris·Cl（pH8.0）,20 mmol/L EDTA，1.4mol/L NaCl，2％CTAB，40mmol/Lβ-巯基乙醇。 b.10％CTAB：10％CTAB，0.7mol/
提取RNA时如何去除DNA的污染
提取RNA时如何去除DNA的污染的方法：注意实验室的标准化问题，注意污染的存在，同时严格按照说明书上的操作应该没有问题。发现DNA污染，用DNAse I 消化1小时，37度离心取上清的时候，一定要小心不要取到中间的膜和下面的液体。直接加NaOH溶液与提取液混合搅拌,然后离心就可以了.因为RNA可溶于
如何检测、评价提取的DNA、RNA质量
4.如何检测、评价提取的DNA、RNA质量，计算提取的DNA、RNA浓度：一般通过OD260/OD280来判断他们的含量，纯DNA的比值一般在1.8，大于1.8，小于2时可能有RNA污染，在1.9到2.0时RNA纯度高，小于1.8时可能有蛋白质污染，大于2.0时可能在提取过程中的化学物质残留。提取原
陈旧动物皮张古DNA提取方法比较研究获进展
5月18日，《动物学研究》（Zoological Research）发表了中国科学院古脊椎动物与古人类研究所分子古生物学实验室付巧妹研究团队主导，与云南大学、新疆文物考古研究所、大理大学等合作，完成了以《陈旧动物皮张的古DNA提取方法比较的研究》为题的研究成果。 保存在博物馆中的动物标本通常是
用缠绕法从哺乳动物细胞中分离DNA
实验方法原理 本方法由 Bowtell 法（1987) 改进而成，可同时从许多不同细胞或者组织样品中制备 DNA。本方案中的主要步骤包括将 DNA 沉淀在细胞裂解液和乙醇的交界面上，接着将沉淀的 DNA 缠绕到一个 Shepherd 氏钩上。缠在钩上的 DNA 从乙醇溶液中转出溶于所选择
用缠绕法从哺乳动物细胞中分离DNA
实验方法原理 本方法由 Bowtell 法（1987) 改进而成，可同时从许多不同细胞或者组织样品中制备 DNA。本方案中的主要步骤包括将 DNA 沉淀在细胞裂解液和乙醇的交界面上，接着将沉淀的 DNA 缠绕到一个 Shepherd 氏钩
用缠绕法从哺乳动物细胞中分离DNA
实验方法原理本方法由 Bowtell 法（1987) 改进而成，可同时从许多不同细胞或者组织样品中制备 DNA。本方案中的主要步骤包括将 DNA 沉淀在细胞裂解液和乙醇的交界面上，接着将沉淀的 DNA 缠绕到一个 Shepherd 氏钩上。缠在钩上的 DNA 从乙醇溶液中转出溶于所选择的液体缓冲液。
植物组织中DNA的提取与测定
一、原理 脱氧核糖核酸（deoxyribonucleicacid，DNA）是一切生物细胞的重要组成成分，主要存在于细胞核中，盐溶法是提取DNA的常规技术之一。从细胞中分离得到的DNA是与蛋白质结合的DNA，其中还含有大量RNA，即核糖核蛋白。如何有效地将这两种核蛋白分开是技术的关键。D
DNA提取中的常见问题分析
提取植物DNA时遇到多糖成分的干扰， DNA质量一直不高，如何消除多糖的影响？ 参考见解：一般来说，SDS法提取的DNA会还有较多的多糖，使DNA成胶冻状。而CTAB法提取可基本上除去多糖。如果是植物材料本身含糖量比较高，可用以下方法试一试： 1、 在 DNA 未溶出之前，先用一些缓冲液洗去多糖。如
DNA提取中的常见问题分析
提取植物DNA时遇到多糖成分的干扰， DNA质量一直不高，如何消除多糖的影响？参考见解：一般来说，SDS法提取的DNA会还有较多的多糖，使DNA成胶冻状。而CTAB法提取可基本上除去多糖。如果是植物材料本身含糖量比较高，可用以下方法试一试：1、 在 DNA 未溶出之前，先用一些缓冲液洗去多糖。如可用
提取RNA中老混有DNA怎样去除
先用酚：氯仿：异戊醇（25：24：1）抽提,这时候经常在样品中会有酚残留,所以之后再用氯仿：异戊醇（24：1）抽提,将酚抽干净,以免影响后续的实验.在抽提前还要在DNA样品中加入1/10体积的PH5.2的3M醋酸钠,增加盐浓度,以免DNA沉淀出来的量太少,都被抽走了.还有最好在抽提之前要把DNA样品
动物实验中如何进行动物称重？
动物实验是科学研究的重要手段，是现代科学技术的重要组成部分，因此直接影响着研究课题的成败和水平的高低，它的提高和发展，又会把许多领域课题的研究引入新的境界。特别是在在生命科学研究领域内，动物实验更是重要而且普遍，它在抗体研发、药物研究、新疗法研究、基因表达和敲除等等研究领域都是必不可少而又至关重要的
如何从细胞中提取高质量RNA？必看！
在实验室中，尤其是分子生物类的实验室中不可避免的会遇到细胞总RNA提取实验，所提RNA样品的质量和纯度直接影响下一步的实验，如逆转录，RT-PCR, microarray 等。下面我们来介绍如何提取细胞中的总RNA 。首先，我们要知道什么是总RNA。总RNA包括mRNA和miRNA等，其中mRNA也
如何判断提取的DNA是高纯度的双链DNA
首先：可以通过分光光度计A 260 / A 280的比值,用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是 280 nm.纯净的样品,比值大于 1.8（DNA）或者2.0（RNA）.如果比值低于 1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响.A 230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚
如何提取细胞中的线粒体
看你的目的，是要分离线粒体蛋白（不需要线粒体有活性），还是要做线粒体功能？但是方法一般是把细胞磨碎（有特殊的匀浆器），然后密度梯度离心。如果需要纯度很高，那还要超速离心。需要提醒的就是，这样提取线粒体需要大量，大量的细胞。说明书上说，如Hela，要1-2ml。。。。就是说细胞离下来，得有1-2个ml
如何鉴定提取质粒DNA的质量和含量
紫外分光光度计定量。方法用大肠杆菌DH5α感受态细胞克隆丰量的pMD-18T重组质粒，紫外分光光度计定量后，根据重组质粒分子量计算其拷贝数，稀释成梯度浓度的荧光实时定量PCR的标准品，取1.0×106、1.0×104和1.0×102拷贝/μl高中低3个浓度的标准品，反复冻融1、6、11、15次和21
从微量样本中同时提取mRNA和天然蛋白
有时，细胞就是那么少，但又要开展多项分析，着实让人为难。丹麦哥本哈根大学的研究人员开发出一种新方法，能从微量的样本中同时提取mRNA和天然蛋白。这项成果发表在《BioTechniques》5月刊上。 在生物学研究的许多领域，样本量往往很有限，特别是人体细胞和组织，如卵泡和胚胎干细胞。但是，研究
哺乳动物中制备基因组DNA实验——制备DNA
在DNA提取过程中应尽量避免使DNA断裂和降解的各种因素，以保证DNA的完整性，为后续的实验打下基础。一般真核细胞基因组DNA有107-9bp，可以从新鲜组织、培养细胞或低温保存的组织细胞中提取，常是采用在EDTA以及SDS等试剂存在下用蛋白酶K消化细胞，随后用酚抽提而实现的。实验材料动物组织试剂、
用碘克沙醇梯度溶液从哺乳动物肝脏中分离细胞核
试剂和器材： 1. OptiPrepTM（600g碘克沙醇，ρ=1.32g/ml）；2. OptiPrepTM稀释剂（OptiPrepTM diluent，OD）：150mmol/L KCl、30mmol/L MgCl2、120mmol/L三甲基甘氨酸-KOH，pH7.8； 3. 匀浆介质（HM）：
如何从“种子”中探索生命密码？
一粒种子为什么能长成一棵参天大树？一窠鸟蛋为什么会孵化出一只只鸟儿？而我是谁？我究竟从哪儿来？是谁创造我的身体，操纵着我的意识、情感以及记忆？也许人类生命的所有信息也存储在一颗颗”种子”中。我们要如何从这些“种子”中探索生命的密码？未来科技又该如何破译其中的谜团，带给我们一些怎样的启迪？ 破译
DNA提取中EB的去除实验方法
Removal of Ethidium Bromide from DNA by Extraction with Organic SolventsJoseph SambrookPeter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourn
DNA提取中的常见问题分析2
A260/280比值较低？或者A260/280比值较高？参考见解：用水作为洗脱液比较偏低，或者蛋白质残留，但如果操作过程中使用了苯酚，则更可能是苯酚残留。而比较高可能是大量RNA残留，没有使用RNaseA，或RNaseA活性下降。A260 值提示的含量与电泳检测时提示的含量有可见的误差则为苯酚残留。
钠在DNA提取中的作用和意义
DNA(脱氧核糖核酸)是细胞核内包含遗传信息的分子。提取DNA涉及一系列步骤,以轻轻地打开细胞,打开核膜,从蛋白质中分离出DNA,然后使其从溶液中沉淀出来。根据膜的结构,DNA及其电负性,使用各种化学物质即可完成此操作。脱除蛋白质后,可使用氯化钠或其他含钠化合物稳定DNA,并有助于沉淀。DNA的结构
DNA怎么提取
DNA提取的几种方法(1).浓盐法利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同，将二者分离，常用的方法是用1M 氯 纳提取化钠抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的 氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间，而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将DNA 钠盐
DNA提取仪
DNA提取仪也叫核酸纯化仪，是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸的提取工作的仪器。