用碘克沙醇梯度溶液从哺乳动物肝脏中分离细胞核
试剂和器材: 1. OptiPrepTM(600g碘克沙醇,ρ=1.32g/ml);2. OptiPrepTM稀释剂(OptiPrepTM diluent,OD):150mmol/L KCl、30mmol/L MgCl2、120mmol/L三甲基甘氨酸-KOH,pH7.8; 3. 匀浆介质(HM):0.25mol/L蔗糖、25mmol/L KCl、5mmol/L MgCl2、20mmol/L三甲基甘氨酸-KOH,pH7.8;按要求向OptiPrepTM稀释剂和匀浆介质中加入蛋白酶抑制剂4. 高转矩桥式电动机(半导体开关控制);5. Potter-Elvehjem匀浆器,20—40ml,孔隙约0.07mm;6. 高速离心机,带可容纳15—50ml离心管的吊桶式转子;7. 注射器,带金属套管针(内径约0.8mm);8. 尼龙滤网;实验方法:所有......阅读全文
用碘克沙醇梯度溶液从哺乳动物肝脏中分离细胞核
试剂和器材: 1. OptiPrepTM(600g碘克沙醇,ρ=1.32g/ml);2. OptiPrepTM稀释剂(OptiPrepTM diluent,OD):150mmol/L KCl、30mmol/L MgCl2、120mmol/L三甲基甘氨酸-KOH,pH7.8; 3. 匀浆介质(HM):
利用碘克沙醇梯度溶液分离动物细胞核
实验概要本实验使用碘克沙醇密度梯度溶液从动物肝脏中分离纯化了动物细胞核。主要试剂1. OptiPrepTM(600g碘克沙醇,ρ=1.32g/ml);2. OptiPrepTM稀释剂(OptiPrepTM diluent,OD):150mmol/L KCl、30mmol/L MgCl2、120mmo
原代细胞培养后,碘克沙醇梯度溶液分析主要细胞器
试剂和器材: 1. OptiPrepTM(600g/L的碘克沙醇);2. 匀浆介质:0.25mmol/L蔗糖溶液、1mmol/L乙二胺四乙酸、20mmol/L Hepes-NaOH,pH7.4;3. OptiPrepTM稀释液:0.25mmol/L蔗糖、6mmol/L乙二胺四乙酸、120mmol/L
碘克沙醇梯度提取哺乳动物原代细胞过氧化物酶体
试剂和器材: 1. OptiPrepTM(600g/L的碘克沙醇);2. 匀浆介质:0.25mmol/L蔗糖溶液、1mmol/L乙二胺四乙酸、1g/L乙醇、5mmol/L 3-吗啉基丙磺酸(MOPS),pH7.2;3. 稀释剂:6mmol/L乙二胺四乙酸、6g/L乙醇、30mmol/L MOPS,p
使用碘克沙醇的注意事项
使用非离子型造影剂的一般注意事项 :有过敏、哮喘和对含碘制剂有过不良反应的需特别注意。对这些病例可考虑使用预防用药,如类固醇,H1,H2组胺受体拮抗剂等。 使用本品后发生严重反应的风险较小。但是,含碘造影剂可激发过敏样反应或其它过敏反应的表现。因此应预先进行急救措施的训练并预备必须的抢救药物和
简述碘克沙醇的药理作用
注射时,有机结合碘在血管/组织中吸收射线。 在对健康志愿者静脉内注射碘克沙醇后进行检查,大多数的血液动力学、临床化学和血凝参数与注射前的数值比较,未发现显著偏差。所观察到的少量实验室参数的改变是极小的且无临床意义。 碘克沙醇注射液对病人肾功能只产生轻微的影响。对于血清肌酐水平在1.3-3.5
简述碘克沙醇的物化性质
辅料 :氨丁三醇,氯化钠,氯化钙,EDTA钙钠,盐酸调节pH,注射用水。 性状 :本品为无色或淡黄色的澄明液体。 碘克沙醇是一非离子型、双体、六碘、水溶性的X线造影剂。与全血和其它相应规格的非离子型单体造影剂相比,所有临床使用浓度的纯碘克沙醇水溶液具有较低的渗透压。通过加入电解质,本品和正常
关于碘克沙醇的用法用量介绍
给药剂量取决于检查的类型、年龄、体重、心输出量和病人全身情况及所使用的技术。通常使用的碘浓度和用量与其它当今使用的含碘X线造影剂相似,但在一些研究中使用较低碘浓度的碘克沙醇注射液也得到足够的诊断信息。与其它造影剂一样,在给药前后应给病人充足的水分。 下列推荐的剂量可作为指导,用于动脉内注射的单
从肝脏组织中制备细胞核实验
实验材料 大鼠 试剂、试剂盒 裂解缓冲液 浓蔗糖溶液
从肝脏组织中制备细胞核实验
实验材料大鼠试剂、试剂盒裂解缓冲液浓蔗糖溶液仪器、耗材超速离心机组织研磨器实验步骤1. 配制裂解缓冲液和浓蔗糖溶液(PMSF 在使用前添加),冰上放置。裂解缓冲液:0.25 mol/L 蔗糖网织红细胞标准缓冲液(RSB)0.25 mol/L 蔗糖(超级纯)10 mmol/ Tris-HCl (pH7
关于碘克沙醇的基本信息介绍
碘克沙醇为注射用造影剂,适用于锥管内造影、心脑血管造影、静脉内尿路造影。其作用原理是结合碘在血管或组织内吸收X射线造成影像显示。碘克沙醇对心血管参数以及股血管血流的影响较少,但是对高龄肾功能不全冠脉介入患者使用时应注意。 中文名称:碘克沙醇 中文别名:5,5'-((2-羟基-1,3-
碘克沙醇及Ficoll400分离纯化大鼠胰岛细胞的效果对比
实验概要本实验的目的是分别使用碘克沙醇和Ficoll-400密度梯度液纯化大鼠胰岛细胞, 比较两者分离纯化大鼠胰岛细胞的收获量、纯度、活性和功能。主要方法为将20只SD大鼠随机分为碘克沙醇纯化组和Ficoll-400纯化组,以胶原酶P消化分离SD大鼠胰腺,分别采用碘克沙醇及Ficoll-400密度梯
关于碘克沙醇的药代动力学介绍
碘克沙醇在体内快速分布,平均分布半衰期约为21分钟。表观分布容积与细胞外液量(0.26 l/kg 体重)相同,这表明碘克沙醇仅分布在细胞外液。 没有检测到代谢物。蛋白结合率低于2%。 平均排泄半衰期约为2小时。碘克沙醇主要由肾小球滤过经肾脏排泄。健康志愿者经静脉注射后,约80%的注射量在4小
用缠绕法从哺乳动物细胞中分离DNA
实验方法原理 本方法由 Bowtell 法(1987) 改进而成,可同时从许多不同细胞或者组织样品中制备 DNA。本方案中的主要步骤包括将 DNA 沉淀在细胞裂解液和乙醇的交界面上,接着将沉淀的 DNA 缠绕到一个 Shepherd 氏钩
用缠绕法从哺乳动物细胞中分离DNA
实验方法原理 本方法由 Bowtell 法(1987) 改进而成,可同时从许多不同细胞或者组织样品中制备 DNA。本方案中的主要步骤包括将 DNA 沉淀在细胞裂解液和乙醇的交界面上,接着将沉淀的 DNA 缠绕到一个 Shepherd 氏钩上。缠在钩上的 DNA 从乙醇溶液中转出溶于所选择
用缠绕法从哺乳动物细胞中分离DNA
实验方法原理本方法由 Bowtell 法(1987) 改进而成,可同时从许多不同细胞或者组织样品中制备 DNA。本方案中的主要步骤包括将 DNA 沉淀在细胞裂解液和乙醇的交界面上,接着将沉淀的 DNA 缠绕到一个 Shepherd 氏钩上。缠在钩上的 DNA 从乙醇溶液中转出溶于所选择的液体缓冲液。
关于吸入用硫酸沙丁胺醇溶液的简介
吸入用硫酸沙丁胺醇溶液,适应症为本品适用于对传统治疗方法无效的慢性支气管痉挛的常规处理及治疗严重的急性哮喘发作。 成份:本品主要成分为:沙丁胺醇,其化学名称为:1-(4-羟基-3-羟甲基苯基)-2-(叔丁氨基)乙醇 分子式:C13H21NO3 分子量:239.31 性状:本品为无色至淡黄
使用吸入用硫酸沙丁胺醇溶液过量的介绍
过量使用本品最常见的体征和症状是—过性的β-激动剂药理学作用所介导的事件。(参见【注意事项】和【不良反应】) 沙丁胺醇用药过量会引起低钾血症,应监测血钾水平。 对于有心脏症状(如心动过速,心悸)表现的患者,应考虑中断本品治疗,并给予恰当的对症治疗,如给予具有心脏选择性的β-阻滞剂。对患有支气
关于吸入用硫酸沙丁胺醇溶液的用药禁忌介绍
一、孕妇及哺乳期妇女用药 妊娠:只有当用药后对孕妇预期的收益大于对胎儿的危险时,方可使用。与其它大多数药物一样,有关人类在妊娠早期应用沙丁胺醇的安全性的研究报道非常少见;但是,对动物的研究表明,当剂量非常高时,它会对胎儿造成某些危害。 哺乳:由于沙丁胺醇可能由乳汁分泌,故正在哺乳的母亲应慎
使用吸入用硫酸沙丁胺醇溶液的注意事项
哮喘的控制应常规按照阶梯治疗原则进行,并通过临床和肺功能试验监测患者的治疗反应。不应仅用或主要使用支气管扩张剂来治疗患有严重的或不稳定哮喘的患者。 严重哮喘需要规律的医疗评估,包括肺功能测试,因为患者存在发生严重发作甚至致命的危险。医生应该考虑对这些患者使用最大推荐剂量的吸入性类固醇制剂和/或
用差速离心法从大鼠肝脏中分离原代细胞重线粒体组分
试剂和器材1. 甘露醇缓冲液:0.2mol/L甘露醇、50mmol/L蔗糖溶液、10mmol/L KCl、1mmol/L乙二胺四乙酸、10mmol/L Hepes-NaOH,pH7.4;2. 玻璃棒;3. Dounce匀浆器(20—30ml宽松配制,Wheaton B型);4. 高转矩桥式电动机(半
沙丁胺醇怎么用?
吸入给药:沙丁胺醇通常通过吸入给药,这是最常见和最有效的使用方式。成人和儿童可以通过气雾剂吸入器或粉雾剂吸入器来使用。吸入给药方式可以使药物直接作用于呼吸道,起效快,副作用相对较小。 对于成人:一次剂量通常为2-4mg,一日3-4次。在急性发作时,可以每4小时重复一次,但24小时内不应超过8次
从用紫杉醇稳定的微管中分离微管相关蛋白
实验材料脑组织试剂、试剂盒PME 缓冲液仪器、耗材匀浆器实验步骤一、通过盐柚提从用紫杉醇稳定的微管中分离微管相关蛋白1. 得到沉降下来的经紫杉醇稳定了的微管。或者可以通过加紫杉醇到 20 μmol/L 来稳定用组装/解聚方法制备的微管。2. 于 37℃ 在微管中加 NaCl 使终浓度为 0.35 m
用甲酰胺从哺乳动物细胞中分离高分子质量DNA
实验方法原理 本方案是 Kupiec 等所述方法(1987) 的改良版本,包括用蛋白酶 K 消化细胞和组织,用高浓度甲酰胺分离 DNA-蛋白质复合物(染色质用火棉胶袋充分透析去除蛋白酶和有机溶剂等过程。甲酰胺是一种离子化溶剂,能分离蛋白质-DNA 复合物并使蛋白变性和释放,但他并不明显影
用甲酰胺从哺乳动物细胞中分离高分子质量DNA
实验方法原理 本方案是 Kupiec 等所述方法(1987) 的改良版本,包括用蛋白酶 K 消化细胞和组织,用高浓度甲酰胺分离 DNA-蛋白质复合物(染色质用火棉胶袋充分透析去除蛋白酶和有机溶剂等过程。甲酰胺是一种离子化溶剂,能分离蛋白质
用甲酰胺从哺乳动物细胞中分离高分子质量DNA
本方案是 Kupiec 等所述方法(1987) 的改良版本,包括用蛋白酶 K 消化细胞和组织,用高浓度甲酰胺分离 DNA-蛋白质复合物(染色质用火棉胶袋充分透析去除蛋白酶和有机溶剂等过程。甲酰胺是一种离子化溶剂,能分离蛋白质-DNA 复合物并使蛋白变性和释放,但他并不明显影响蛋白酶 K 的活性。本实
分离核仁实验—从人肝脏或胎盘组织中分离核仁
实验材料组织试剂、试剂盒NKM仪器、耗材粗孔滤纸Teflon-玻璃匀浆器实验步骤1. 准备溶液:NKM:0.13 mol/L NaCl,5 mmol/L KCl,8 mmol/L 乙酸镁2.2 mol/L 蔗糖,10 mmol/L MgCl20.88 mol/L 蔗糖0.34 mol/L 蔗糖,含
关于吸入用硫酸沙丁胺醇溶液的药理药动学介绍
一、药理毒理 沙丁胺醇是选择性β2-肾上腺素能受体激动剂,对可逆性气道阻塞是起效快(5分钟之内)、短效(4至6小时)的支气管扩张剂。在治疗剂量下,作用于位于支气管平滑肌上的β2-肾上腺素能受体,由于它起效迅速,故特别适合应用于治疗和预防哮喘急性发作。 二、药代动力学 静脉注射沙丁胺醇的半衰
从哺乳动物细胞或组织分离DNA
1. 根据样品类型,从下列方法中选一个作为步骤 1 进行操作。(1) 细胞样品① 单层培养的细胞以用冰预冷的 TBS 将单层细胞洗涤 2 次,用刮棒把细胞刮入约 0.5 ml 的 TBS 中,将细胞悬液转移到冰浴的离心管中,用 1 mlTBS 冲洗培养皿,并入离心管中的细胞悬液。于 4℃ 以
AAV腺病毒纯化完整和空壳分离新办法(一)
现状基于腺相关病毒(AAV)的各种血清型载体被公认在人类基因治疗和基因疫苗接种应用中具有高潜力。在制造AAV载体期间,不必要的,不完全的颗粒共同产生。它们缺乏重组病毒基因组,仅由空衣壳蛋白组成。空衣壳增加了用于医学应用的AAV病毒的所需剂量,并且被认为引起针对载体衣壳的免疫反应,导致不必要的副作用。