CTAB法从干燥材料中提取DNA的方法

从干燥材料中提取(1)粗提①试剂a.1倍 CTAB 提取缓冲液:2倍 CTAB 贮存液稀释1倍,使用前每100mL 加入巯基乙醇0.14mL。b.其他试剂与从新鲜材料中提取相同。②操作a.称取 1g 干燥材料置研钵中,加入3~4g 铝粉研磨。b.将粉末转入离心管中,加入0.6~15mL 1倍 CTAB 提取缓冲液,轻缓地搅拌,使材料充分分散。置56℃水浴中保温10~20min。c.冷却至室温,加入等体积氯仿/异戊醇,颠倒离心管混匀。20℃、8000离心力离心10min。d.将上相转入另一离心管中,加入0.1体积的10% CTAB 溶液,轻轻混合,重复c,d操作。e.加入等体积的1倍 CTAB 沉淀缓冲液轻轻混匀,室温下放置 30min 或更长。f.室温条件下,1500离心力离心10min,去上清液,沉淀纯化。(2)粗提物的纯化①小量制备物的纯化试剂a.Imol/L NaCl。b.65%,80%无水乙醇。操作a.将沉淀溶......阅读全文

CTAB-法从干燥材料中提取DNA的方法

从干燥材料中提取(1)粗提①试剂a.1倍 CTAB 提取缓冲液:2倍 CTAB 贮存液稀释1倍,使用前每100mL 加入巯基乙醇0.14mL。b.其他试剂与从新鲜材料中提取相同。②操作a.称取 1g 干燥材料置研钵中,加入3~4g 铝粉研磨。b.将粉末转入离心管中,加入0.6~15mL 1倍 CTA

CTAB-法从新鲜或冷冻材料提取-DNA的方法

(1)DNA 的粗提①试剂a.2倍 CTAB 提取缓冲液:100mmol/L Tris·Cl(pH8.0),20 mmol/L EDTA,1.4mol/L NaCl,2%CTAB,40mmol/Lβ-巯基乙醇。b.10%CTAB:10%CTAB,0.7mol/L NaCl。c.1倍 CTAB 沉淀缓

CTAB法提取植物总DNA

实验概要CTAB法是一种快速简便的提取植物总DNA的方法,通过实验掌握CTAB法从植物叶片提取DNA的原理和方法。 实验原理CTAB  (hexadecyltrimethylammonium  bromide,十六烷基三甲基溴化铵),是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特

如何从干燥材料中提取DNA

  (1)粗提   ①试剂   a.1倍 CTAB 提取缓冲液:2倍 CTAB 贮存液稀释1倍,使用前每100mL 加入巯基乙醇0.14mL。   b.其他试剂与从新鲜材料中提取相同。   ②操作   a.称取 1g 干燥材料置研钵中,加入3~4g 铝粉研磨。   b.将粉末转入离心管中

采用改进的CTAB法提取细菌总DNA

实验概要通过改进的CTAB法可快速简便的提取细菌总DNA,通过本实验可掌握CTAB法从细菌提取DNA的原理和方法。 实验原理CTAB  (hexadecyltrimethylammonium  bromide,十六烷基三甲基溴化铵),是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特

利用CTAB法提取植物基因组DNA

一、实验原理 CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)是一种去污剂,可溶解细胞膜并能与核酸形成复合物,该复合物在高离子强度(0.7mol/L)的溶液里是可溶的,通过离心可将复合物同蛋白质、多糖类物质分开。在酚仿变性的条件下,去除残留的CTAB和蛋白质等杂质,然后利用异戊醇或无水乙醇将DNA分

从精子中提取DNA的方法

步骤:1、从棉签上取下有检材的棉花并置于1.5塑料离心管中。2、管中加入400微升TNE缓冲液;25%微升sarcosyl(硅鱼精);75微升水;5微升蛋白酶K溶液手混匀,37度保温2小时。3、用一新的灭菌牙签将棉花拧干后管中取出,再用12000rpm离心5分钟。4、.移上清液(内含裂解细胞或雌性片

核酸提取仪CTAB法用途以及步骤

  CTAB为一种阳离子去污剂,其的特性为能够在低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖。在高离子强度的溶液中(>0.7mol/L NaCl),CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物,然而不会沉淀核酸。再利用有机溶剂抽提,将蛋白、多糖、酚类等杂质去除以后,将乙醇加入沉淀,就能够分离出核酸。  用途  主要用

水稻总DNA的快速少量抽提CTAB法

DNA分子是分子生物学研究的基本材料,依不同的实验目的可采取不同的抽提方法获取数量和质量不等的 DNA 。 实验目的:了解植物  DNA 抽提的主要方法,掌握 CTAB 法快速抽提水稻 DNA 。 实验材料及试剂: 水稻  叶片,1.5 × CTAB ,氯仿 / 异戊醇 (24:1) ,

干燥法提取叶黄素的方法介绍

有一种新型的滚筒烘干机,烘干和重击金盏花和叶黄素。当摆锤的波动率在70%~90%时,叶黄素的含量由干燥时长决定;当干燥的时长一致时,70℃下所得叶黄素的量要比60℃干燥条件下少。

植物组织制备基因组DNA实验——CTAB法

实验方法原理加入一定量的异丙醇或乙醇,基因组的大分子DNA即沉淀形成纤维状絮团飘浮其中, 可用玻棒将其取出,而小分子DNA则只形成颗粒状沉淀附于壁上及底部, 从而达到提取的目的。实验材料植物组织试剂、试剂盒CTAB液2-疏基乙醇TE高盐TE氯仿异戊醇仪器、耗材研钵离心机培养箱实验步骤1.  在所需量

植物总DNA的快速少量抽提实验——CTAB法

DNA分子是分子生物学研究的基本材料,依不同的实验目的可采取不同的抽提方法获取数量和质量不等的DNA。实验目的是了解植物DNA抽提的主要方法,掌握CTAB法快速抽提水稻DNA。实验方法原理CTAB法:该方法简便、快速,DNA产量高(纯度稍次,适用于一般分子生物学操作)。 CTAB是一种非离子去污剂,

如何从细胞中提取dna

提取基因组DNA和细胞核DNA是不同的方法提取细胞核要先把细胞破碎分离出细胞核,要在甘油或其他保护剂中进行SDS十二烷基磺酸钠:可破坏细胞膜、核膜,并使组织蛋白与DNA分离CATB是一种抽提液,破坏细胞膜的~具体忘了~DNA不溶于异丙醇,异丙醇可以析出DNA,产生白色絮状沉淀,用枪头挑出就可以了以下

离心机离心法提取食品中的DNA

1、从新鲜或冷冻材料提取 DNA(1)DNA 的粗提①试剂a.2倍 CTAB 提取缓冲液:100mmol/L Tris·Cl(pH8.0),20 mmol/L EDTA,1.4mol/L NaCl,2%CTAB,40mmol/Lβ-巯基乙醇。b.10%CTAB:10%CTAB,0.7mol/L Na

CTAB法抽提核酸

CTAB 法 ①取0. 2g 各中药材样品分别用液氮( Ⅰ) 、玻璃砂( Ⅱ) 、氧化铝( Ⅲ) 研磨。②加入56 ℃ 10 倍预热的缓冲液C 于56 ℃温育30 min , 离心, 取上清液加入等体积氯仿- 异戊醇(24∶1) 抽提(室温, 不能低于15 ℃, 否则CTAB 会沉淀) , 10 0

科学家从古代“口香糖”中成功提取DNA

该技术有望成为考古学研究的重要补充 几十年来,Steven LeBlanc——考古学家、美国马萨诸塞州剑桥市哈佛大学皮博迪博物馆的标本主管——做梦都想找到古代人类的脱氧核糖核酸(DNA),然而存放在博物馆的史前古器物却不可能给他带来任何好运气。直到有一天,LeBlanc想出了一个主意。他将目光投向

DNA的提取方法

一.酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎细胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯萃取,高速离心后取上清,所得DNA大小为100-150kb二.甲酰胺解聚法:破碎细胞同上,然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合,再透析获得DNA可得DNA200kb左右。三.玻璃棒缠绕法:用盐酸胍裂解细胞,将裂解物铺于乙醇上,

植物组织提取高质量的DNA五大方法详解(一)

     蛋白质纯化是旨在从细胞,组织或整个生物体中分离出一种或几种蛋白质。蛋白质纯化对于表征目的蛋白质的功能,结构和相互作用至关重要。蛋白质分离与提取是生命科学研究基础中的基础。植物细胞由于存在细胞壁的结构,因此比动物细胞蛋白的提取相对复杂。        提取植物中的DNA对植物基因工程,植

DNA提取中EB的去除实验方法

Removal of Ethidium Bromide from DNA by Extraction with Organic SolventsJoseph SambrookPeter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourn

SDS法提取小麦DNA

在提取DNA的过程中SDS的主要作用裂解细胞以及是蛋白质与核酸分离。在提取核酸的过程中,经常会用到高温(一般65-70摄氏度)加SDS一起裂解细胞,这样会让核酸释放的更快,更彻底;高温也是裂解细胞的一种方法。但加热本身对SDS没有任何辅助作用。但在低温条件下SDS的溶解度没有那么高,所以会有一定的沉

使用SDS法提取DNA中SDS是什么作用

SDS中文名十二烷基硫酸钠,是一种已知的能够使蛋白质变性的去污剂,它可以用于核酸抽提操作中破坏细胞壁及裂解核酸:蛋白复合物。在较高温度下,破坏蛋白质与DNA的结合,使DNA释放出来。

粗提取植物DNA的实验步骤和原理

提取植物DNA常用的方法是CTAB法。原理:CTAB是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性。在高离子强度的溶液中(>0.7mol/L NaCl),CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物,只是不能沉淀核酸。通过有机溶剂抽提,去除蛋白,多糖,酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分

DNA的不同提取方法及比较

DNA的不同提取方法及比较传统的DNA提取方法传统的DNA 提取与纯化,如 CTAB 法、SDS 法是在裂解细胞的基础上,多次苯酚氯仿等有机溶剂抽提使蛋白质变性沉淀于有机相,而核酸保留在水相,达到分离核酸的目的;加入RNA 酶除去核酸中的RNA; 然后加入异丙醇、乙醇等沉淀DNA;用70

植物DNA提取中怎样检测提取到DNA质量

第一种方法是测量260/280的比例,判断是否有蛋白质的污染。在260nm和280nm处测定DNA溶液的光吸收,A260与A280之比应在1.75-1.80之间。低于此值表明制备物中残留蛋白质成分较高或含有酚,高于此值表明有RNA的残留。第二种方法是凝胶电泳分析,看有无断裂降解。影响DNA提取质量的

病毒-DNA-的提取实验——培养细胞中病毒-DNA-的提取

实验材料细胞试剂、试剂盒裂解液TE 缓冲液仪器、耗材培养瓶EP管真空泵实验步骤1. 贴壁培养细胞倾去培养液,加 PBS 洗 2次,加胰蛋白酶消化 (37℃, 5~10 min)后移入Ep管中,2000 r/min 离心 10 min, 弃上清液,用 PBS 悬浮细胞,离心洗涤 2~3次,用 PBS

DNA提取试剂盒与苯酚氯仿提取DNA法的异同

酚-氯仿方法是提取核酸的经典方法,主要原理是利用核酸、蛋白等杂质在水相和有机相中溶解度不同而重新分配。试剂盒原理是在特定溶液环境下(高盐、低pH)使核酸吸附在固相介质(一般是硅胶膜)上,洗涤去除杂质后,再改变溶液环境使DNA溶解到纯水或TE中。酚氯仿方法经典、便宜,用的都是实验室常用试剂,提纯效率和

用于PCR的模板DNA制备实验——酚氯仿法提取石蜡组织中DNA

模板 DNA 质量直接影响 PCR 结果,是 PCR 成功的关键之一。根据其检测对象(组织细胞材料)的不同,有不同的制备方法,常用的材料有石蜡切片、冰冻切片、血细胞、胸腹水等。实验步骤1. 10 mm 厚石蜡切片 10~15 张,置入消毒后的 1.5 ml Eppendorf 管中。2. 脱蜡 二甲

一种无酚/无氯仿组织研磨从热带木本植物中提...(一)

一种无酚/无氯仿组织研磨从热带木本植物中提取核酸的方法概述:木本热带植物中含有大量复杂的有机化合物,这些有机化合物会抑制提取RNA或DNA所需的化学程序,从而不利于后续研究及应用,如RNA测序和基因表达分析。为了克服这个问题,研究人员必须使用CTAB / PVP缓冲液的提取方案,而不能使用市售的

CsCl法从组织中提取RNA

试剂、试剂盒 液氮 组织胍溶液 十二烷基肌氨酸钠 CsCl 组织重悬液 乙酸钠酚 氯仿 异戊醇 异戊醇 无水乙醇仪器、耗材 组织捣碎机 离心机实验步骤 一 材料与设备1)液氮2)组织胍溶液:590.8 g 异硫氰酸胍溶于 400ulDEPC 处理的水中,加入 25 mmol/LTris-Cl(p

CsCl法从组织中提取RNA

            试剂、试剂盒 液氮 组织胍溶液 十二烷基肌氨酸钠 CsCl 组织重悬液   乙酸钠 酚 氯仿