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胶体金在快速斑点渗滤技术中的应用

ELISA法在临床实验室已得到普遍的应用,特别是用于各型肝炎标志物的检测。但ELISA法由于操作程序复杂,时间较长,需要洗板机、酶标检测仪等贵重仪器。给实验室带来不便。ELISA法需时较长的主要原因,是由于液相中的抗原(或抗体)需经扩散才能与固相上的抗原或抗体反应,不适当地缩短反应时间,将使灵敏度降至临床要求以下。为满足临床快速检测的需要,近年来发展了多种简便、快速的免疫学检测方法,快速斑点渗滤法即为其中一种,其标记物质用胶体金即称为快速斑点免疫金渗滤法(Dot-im2munogoldfiltrationassay),又称滴金免疫法。快速斑点渗滤法的基本原理仍是间接法或夹心法。间接法测抗体:固定于膜上的特异性抗原+标本中的相应抗体+金标记的抗体或SPA显色(将某一检疫传染病标准抗原固定于NC膜上制成检测试纸,取一滴待检样品滴加到膜上,再滴加金标记的抗抗体)。夹心法测抗原:固定于膜上的多克隆抗体+标本中待测抗原+金标记的特异性单克......阅读全文

免疫胶体金的制备及其在医学检验中的应用

  摘要免疫胶体金技术是四大免疫标记技术之一,问世二十多年来发展十分迅速,在生物医学各研究领域特别是在医学检验中得到了日益广泛的应用。本文从胶体金技术的基本原理、制备方法、标记技术和实际应用等几个方面对胶体金技术作了较系统介绍。  1971年Faulk 和Taytor将胶体金引人免疫化学,此

胶体金标记技术(制备方法和应用)

胶体金标记技术是以胶体金作为示踪标志物或显色剂,应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。由于它不存在内源酶干扰及放射性同位素污染等问题,且利用不同颗粒大小的胶体金还可以作双重甚至多重标记,使定位更加精确。因此已成为继荧光素、酶、同位素及乳胶标记技术之后的一种新型标记技术。现已广泛应用于电镜、流式细

胶体金及金标检测技术研究进展

继三大标记技术(荧光素、放射性同位素和酶)之后,一种固相标记免疫测定技术--免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique, ICG)逐渐发展起来。它是以胶体金作为标记物,利用抗原抗体特异性反应,对抗原或抗体物质进行定性乃至定量研究的标记技术。近年来,该技术因其操作简

免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique)

(一)  原理 免疫胶体金技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,称为胶体金。胶体金在弱碱环境下

免疫胶体金技术的基本知识

一、免疫胶体金技术的基本知识1、胶体金的概念氯金酸(HAuCl4)在还原剂作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,形成带负电的疏水胶溶液。由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。2、免疫金标记技术胶体金颗粒表面负电荷与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。胶体金对蛋白质有很强的吸附功能,蛋白质

免疫胶体金(Immune colloidal gold)基本原理和常用的免疫胶...

免疫胶体金(Immune colloidal gold)基本原理和常用的免疫胶体金胶体金是一种常用的标记技术,是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术,有其独特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用。在临床使用的免疫印迹技术几乎都使用其标记。同时在流式、电镜、免疫、分子生物学

人类免疫缺陷病毒实验室检测技术研究进展

 人类免疫缺陷病毒(HIV)检测的主要目的是用于获得性免疫缺陷综合症(AIDS)即艾滋病的病原体诊断。本文就近年来HIV检测的研究进展综述如下。         1 抗原检测  &

POCT的临床应用与存在的问题

 随着经济的发展、社会的进步和人口整体素质的提高,新的技术、新的理念和新的思维引入医学检验领域,使医学检验技术呈现两大发展趋势。一方面是在疾病诊断治疗及维护人体健康过程中(特别是健康信息档案的建立)需要掌握的个人健康信息量越来越大,使临床检验向高分析速度,高自动化程度,高智能化水平,高信息

POCT的临床应用与存在的问题

     随着经济的发展、社会的进步和人口整体素质的提高,新的技术、新的理念和新的思维引入医学检验领域,使医学检验技术呈现两大发展趋势。一方面是在疾病诊断治疗及维护人体健康过程中(特别是健康信息档案的建立)需要掌握的个人健康信息量越来越大,使临床检验向高分

免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique)大总结

(一) 原理免疫胶体金技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原 抗体的一种新型的免疫标记技术。胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,称为胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分

系统性红斑狼疮的实验室检查及诊断标准

一、检查(一)血常规  多数病人可出现不同程度贫血,一般是正色素性或正常细胞贫血,少数病人可发生自身性溶血性贫血。半数病人白细胞减少,低于4x109/升,淋巴细胞绝对计数降低,常有血小板减少。(二)血沉  约90%以上的活动期系统性红斑狼疮病人的血沉增快,并随病情好转与恶化而减慢

免疫胶体金技术-3

为了得到颗粒均一的免疫金试剂,可将上述初步纯化的结合物再进一步用10%~30%蔗糖或甘油进行密度梯度离心,分带收集不同梯度的胶体金与蛋白的结合物。(2)凝胶过滤法:此法只适用于以BSA作稳定剂的胶体金蛋白结合物的纯化。将胶体金蛋白结合物装入透析袋,在硅胶中脱水浓缩至原体积的 1/5~1/10。再

胶体金快速斑点免疫分析-1

随着免疫分析日益广泛应用于以临床为主以及非临床领域的诊断工业(diagnostic industry),免疫分析向两个方向发展:一类为全自动化的免疫分析;另一类为以硝酸纤维膜为载体的快速免疫分析。前者需要价格昂贵的全自动仪器及与仪器严格配套的各种试剂盒,目前只能在医疗及检测中心应用,虽也能较快速

【共享】POCT的相关技术

POCT 发展很快,主要得益于一些新技术的应用。 POCT 技术的基本原理大致可分为四类: (1) 把传统方法中的相关液体试剂浸润于滤纸和各种微孔膜的吸水材料内 ,成为整合的干燥试剂块 ,然后将其固定于硬质型基质上 ,成为各种形式的诊断试剂条。 (2) 把传统分析仪器微型化 ,操作方法简单化

免疫胶体金技术的测试原理及应用

  测试原理  层析法免疫胶体金检测试剂实际上是免疫金标记技术和抗原抗体反应相结合而形成的一种应用形式,相比ELISA试剂,除标记物不同外,同样服从于抗原抗体反应的特性。此种检测方法具有明显的优点:  *方便使用,体现在操作简单,不需经过特殊培训。  *短时间获得检测结果,一般10-15分钟即可得出

这些快速检验技术,你用过几种?

现在检验科的效率越来越高,各种快速检验技术功不可没。如今,一些快速检验技术在准确性、敏感性、特异性等方面,都不逊于临床诊断使用的传统微生物检验方法,各大医院也在陆续将这些技术方法用作临床诊断,尤其是急诊。下面检验君就带大家盘点一下你用过的和没用过的那些快速检验技术。一、免疫学检验技术免疫学快速检验技

POCT的相关技术

POCT 发展很快,主要得益于一些新技术的应用。 POCT 技术的基本原理大致可分为四类: (1) 把传统方法中的相关液体试剂浸润于滤纸和各种微孔膜的吸水材料内 ,成为整合的干燥试剂块 ,然后将其固定于硬质型基质上 ,成为各种形式的诊断试剂条。 (2) 把传统分析仪器微型化 ,操作方法简单化 ,使之

POCT方法学分析

POCT的技术学分类目前应用的具体技术归纳起来主要有:一、干化学技术干化学技术是将多种反应试剂,干燥在纸片上,用被测样品中所存在的液体作反应介质,被测成分直接与固化于载体上的干试剂进行反应。加上检验标本后产生颜色反应,用眼观定性或仪器检测(半定量)。适用于全血,血清,血浆,尿液等各类样品。例如:前降

IVD行业步入“大检验”时代

  国民健康意识的增强、医疗市场的不断拓宽、检验医学的飞速发展,给体外诊断(IVD)行业带来了千载难逢的发展机遇。经过一批IVD创业者的努力,我国IVD设备水平已经产生质的飞跃,国产IVD设备和试剂如雨后春笋般出现,一些产品已走进欧、美发达国家的医学实验室。面对产业的飞速发展,研发生产、检验医学、临

免疫胶体金技术的应用

  胶体金标记技术由于标记物的制备简便,方法敏感、特异,不需要使用放射性同位素,或有潜在致癌物质的酶显色底物,也不要荧光显微镜,它的应用范围广,除应用于光镜或电镜的免疫组化法外,更广泛地应用于各种液相免疫测定和固相免疫分析以及流式细胞术等。  1.液相免疫测定:将胶体金与抗体结合,建立微量凝集试验检

HIV初筛实验室筛查检验程序

1、筛查试剂必须是经国家食品药品监督管理局注册批准、批批检合格、在有效期内的试剂。推荐使用经临床质量评估敏感性和特异性高的试剂。2、筛查方法(1)、常用的筛查方法是酶联免疫试验(ELISA)目前国内外主要使用第三代(双抗原夹心法)试剂,少数使用第二代试剂。血源筛查仍以第三代ELISA为主,国际上有些

胶体金标记技术在免疫学中的应用

胶体金标记技术由于标记物的制备简便,方法敏感、特异,不需要使用放射性同位素,或有潜在致癌物质的酶显色底物,也不要荧光显微镜,它的应用范围广,除应用于光镜或电镜的免疫组化法外,更广泛地应用于各种液相免疫测定和固相免疫分析以及流式细胞术等。1.液相免疫测定:将胶体金与抗体结合,建立微量凝集试验检测相应的

免疫学检测方法

免疫学检测方法是应用免疫学理论设计的一系列测定抗原、抗体、免疫细胞及其分泌的细胞因子的实验方法。随着学科间的相互渗透,免疫学涉及的范围不断扩大,新的免疫学检测方法层出不穷。免疫学方法的应用范围亦在日益扩大,不仅成为多种临床疾病诊断的重要方法,也为众多学科的研究提供了方便。本章将从抗原、抗体、免疫细胞

即时检验(POCT)的技术原理及分类(2)

二、多层涂膜技术 多层涂膜技术是从感光胶片制作技术移植而来。将多种反应试剂依次涂布在片基上,制成干片。采用多层涂膜技术制成的干片,比干化学纸片平整均匀,用仪器检测,可以准确定量,如目前临床使用的干板化学分析系统,可用于大多数血液化学成分,如蛋白质、糖类、脂类、酶、电解质、非蛋白氮类及一些血

金免疫技术(斑点免疫层析试验)

一、原理金免疫技术是免疫标记技术之一,金盐被还原成原子金后形成金颗粒悬浮(胶体金),这种金颗粒呈红色,并能与蛋白质等大分子物质结合,因此,可用胶体金作为标记物来检测标本中的抗原或抗体。典型的测定方法有斑点买免疫渗滤试验和斑点免疫层析试验等。二、材料1 、HCG金标试纸条2、妊娠尿液 正常尿液三、方法

实验室HIV检测技术概述及进展

艾滋病(AIDS)又称获得性免疫缺陷综合征,是由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染所引起的一种免疫缺陷性疾病。HIV感染的诊断是艾滋病预防控制 工作的重要组成部分,建立敏感实用的检测方法对于监测、诊断或血液筛查,控制艾滋病的流行显得尤为重要。以下本文就HIV的检测技术现状及进展做一综述。1 

胶体金快速斑点免疫分析-2

四、胶体金块快速免疫结合分析的应用应用领域很广,可分为临床应用与非临床应用两类。目前应用多以前者为主。1、临床应用 已应用于临床的很多领域。由于目前它还是定性分析,故主要用以检测正常体认中不存在的生物活性物质(如传染病的抗原及抗体),以及正常情况下体液中含量很低而在某些疾病中升高的生物活性物质。

免疫金标记检测方法标准操作程序

  【目的】  保证免疫金标技术检验准确性  【本SOP适用范围】  免疫金标技术  【原理】  氯化金分子在还原剂作用下聚合形成金颗粒,颗粒与颗粒之间因静电作用而相互排斥,使其保持一个比较稳定的胶体状态,故称作胶体金。利用胶体金颗粒的高电子密度及其表面能结合生物大分子(如抗体、SPA、植物血凝素和

胶体金免疫层析法检测蛋白A抗体实验方法与步骤

摘 要: 目的 建立一种快速、简易的检测血清中抗幽门螺杆菌(Hp)细胞毒素相关蛋白A(CagA)抗体的胶体金免疫层析法(GICA)。 方法 采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记葡萄球菌A蛋白(SPA),将重组 的CagA抗原划线固定于硝酸纤维素膜上,制成免疫层析检测试条。 血清中IgG