斑点金免疫渗滤测定(DIGFA)实验

实验方法原理 斑点金免疫渗滤测定法是在斑点免疫渗滤测定法基础上,改用胶体金标记物代替酶,省去底物显色的步骤。试验方法是以硝酸纤维素膜(NC膜)为载体,将试剂及标本滴加在膜上,通过渗滤而逐步反应。全过程可于数分钟内完成,阳性结果在膜上呈红色斑点。实验材料 细胞样品试剂、试剂盒 PBS吐温-20BSA特异性抗体 抗原金标抗体仪器、耗材 渗滤装置NC膜实验步骤 一、试剂及材料 1. 渗滤装置:为一塑料小盒(4x3x0.6 cm),分为底、盖两层,盖的中央有一个直径0.5 cm的小孔。盒底充填吸水性较强的垫料,盖孔下,紧贴垫料放置一片NC膜。紧闭盒盖,即为渗滤装置。在孔中的NC膜上点加1-2 ml特异性抗体(一抗)或抗原,室温自然干燥,保存于放干燥剂的密封塑料袋中备用。 2. 封闭液:含0.2%BSA和0.05%吐温-20的洗涤液。 3. 洗涤液:50 mo......阅读全文

斑点金免疫渗滤测定(DIGFA)实验

实验方法原理斑点金免疫渗滤测定实验是在斑点免疫渗滤测定法基础上,改用胶体金标记物代替酶,省去底物显色的步骤。试验方法是以硝酸纤维素膜(NC膜)为载体,将试剂及标本滴加在膜上,通过渗滤而逐步反应。全过程可于数分钟内完成,阳性结果在膜上呈红色斑点。实验材料细胞样品试剂、试剂盒 PBS吐温-20BSA特异

斑点金免疫渗滤测定(DIGFA)实验

实验方法原理 斑点金免疫渗滤测定法是在斑点免疫渗滤测定法基础上,改用胶体金标记物代替酶,省去底物显色的步骤。试验方法是以硝酸纤维素膜(NC膜)为载体,将试剂及标本滴加在膜上,通过渗滤而逐步反应。全过程可于数分钟内完成,阳性结果在膜上呈红色斑点。实验材料 细胞样品试剂、试剂盒 PBS吐温-20BSA

斑点免疫渗滤试验(dotymmunogoldfiltrationassay,DIGFA)

斑点免疫渗滤试验的基本原理是:以硝酸纤维素膜为载体,利用微孔滤膜的可滤过性,使抗原抗体反应和洗涤在一特殊的渗滤装置上以液体渗滤过膜的方式迅速完成。斑点免疫渗滤试验最初是从斑点ELISA基础上发展起来建立的,应用的结合物是酶标记的,称为斑点酶免疫渗滤试验。90年代初发展了以胶体金为标记物的斑点免疫渗滤

免疫学技术专题:斑点金免疫渗滤测定法(DIGFA)

基本原理斑点金免疫渗滤测定法是在斑点免疫渗滤测定法基础上,改用胶体金标记物代替酶,省去底物显色的步骤。试验方法是以硝酸纤维素膜(NC膜)为载体,将试剂及标本滴加在膜上,通过渗滤而逐步反应。全过程可于数分钟内完成,阳性结果在膜上呈红色斑点。试剂及材料1. 渗滤装置:为一塑料小盒(4x3x0.6cm

斑点金免疫渗滤试验原理

斑点免疫渗滤试验的基本原理是:以硝酸纤维素膜为载体,利用微孔滤膜的可滤过性,使抗原抗体反应和洗涤在一特殊的渗滤装置上以液体渗滤过膜的方式迅速完成。斑点免疫渗滤试验最初是从斑点ELISA基础上发展起来建立的,应用的结合物是酶标记的,称为斑点酶免疫渗滤试验。90年代初发展了以胶体金为标记物的斑点免疫渗

常用的免疫胶体金检测技术斑点免疫金渗滤法

斑点免疫金渗滤法应用微孔滤膜(如膜)作载体,先将抗原或抗体点于膜上,封闭后加待检样本,洗涤后用胶体金标记的抗体检测相应的抗原或抗体。

斑点免疫渗滤试验(IFA)的原理

  用于检测各种传染病的抗体和肿瘤标记物等,以及用于检测尿液HCG的“金标”早孕诊断试剂。  原理:将抗原或抗体点加在固相载体硝酸纤维素薄膜上,将膜贴于吸水材料上,依次在膜上滴加标本、免疫胶体金及洗涤液等试剂进行抗体或抗原反应,过量试剂很快渗入吸水材料中。  抗原抗体反应后,形成大分子胶体金复合物,

斑点免疫渗滤试验(IFA)的原理

用于检测各种传染病的抗体和肿瘤标记物等,以及用于检测尿液HCG的“金标”早孕诊断试剂。原理:将抗原或抗体点加在固相载体硝酸纤维素薄膜上,将膜贴于吸水材料上,依次在膜上滴加标本、免疫胶体金及洗涤液等试剂进行抗体或抗原反应,过量试剂很快渗入吸水材料中。抗原抗体反应后,形成大分子胶体金复合物,从而使阳性结

斑点免疫渗滤试验的方法类型

  1.双抗体夹心法测抗原:用抗体结合在微孔滤膜中央,滴加待检标本,抗原抗体反应后,滴加金标抗体,加洗涤液洗涤后,阳性者即在膜中央呈红色斑点。  2.间接法测特异性抗体:用抗原包被在微孔滤膜上,滴加待测标本,滴加洗涤液洗涤后,滴加金标抗抗体,加洗涤液洗涤后,阳性者即在膜中央呈红色斑点。该法由于血清标

胶体金固相免疫测定法方法介绍

胶体金固相免疫测定法(1)斑点免疫金银染色法(Dot-IGS/IGSS)是将斑点ELISA与免疫胶体金结合起来的一种方法。将蛋白质抗原直接点样在硝酸纤维膜上,与特异性抗体反应后,再滴加胶体金标记的第二抗体,结果在抗原抗体反应处发生金颗粒聚集,形成肉眼可见的红色斑点,此称为斑点免疫金染色法(Dot-I

斑点免疫渗滤试验(IFA)的方法类型

1.双抗体夹心法测抗原:用抗体结合在微孔滤膜中央,滴加待检标本,抗原抗体反应后,滴加金标抗体,加洗涤液洗涤后,阳性者即在膜中央呈红色斑点。2.间接法测特异性抗体:用抗原包被在微孔滤膜上,滴加待测标本,滴加洗涤液洗涤后,滴加金标抗抗体,加洗涤液洗涤后,阳性者即在膜中央呈红色斑点。该法由于血清标本中非目

胶体金在快速斑点渗滤技术中的应用

ELISA法在临床实验室已得到普遍的应用,特别是用于各型肝炎标志物的检测。但ELISA法由于操作程序复杂,时间较长,需要洗板机、酶标检测仪等贵重仪器。给实验室带来不便。ELISA法需时较长的主要原因,是由于液相中的抗原(或抗体)需经扩散才能与固相上的抗原或抗体反应,不适当地缩短反应时间,将使灵敏度降

免疫胶体金技术的应用

胶体金标记技术由于标记物的制备简便,方法敏感、特异,不需要使用放射性同位素,或有潜在致癌物质的酶显色底物,也不要荧光显微镜,它的应用范围广,除应用于光镜或电镜的免疫组化法外,更广泛地应用于各种液相免疫测定和固相免疫分析以及流式细胞术等。1.液相免疫测定:将胶体金与抗体结合,建立微量凝集试验检测相应的

免疫胶体金技术的应用

  胶体金标记技术由于标记物的制备简便,方法敏感、特异,不需要使用放射性同位素,或有潜在致癌物质的酶显色底物,也不要荧光显微镜,它的应用范围广,除应用于光镜或电镜的免疫组化法外,更广泛地应用于各种液相免疫测定和固相免疫分析以及流式细胞术等。  1.液相免疫测定:将胶体金与抗体结合,建立微量凝集试验检

胶体金标记技术在免疫学中的应用

胶体金标记技术由于标记物的制备简便,方法敏感、特异,不需要使用放射性同位素,或有潜在致癌物质的酶显色底物,也不要荧光显微镜,它的应用范围广,除应用于光镜或电镜的免疫组化法外,更广泛地应用于各种液相免疫测定和固相免疫分析以及流式细胞术等。1.液相免疫测定:将胶体金与抗体结合,建立微量凝集试验检测相应的

免疫学实验弓形虫点免疫金渗滤法介绍

  弓形虫点免疫金渗滤法介绍:  染色试验(MBD)是诊断弓形虫病的可靠和敏感的方法,其在早期感染即出现阳性,并能维持1年之久,但该试验需用活的弓形虫,一般的医学检验室不易进行。补体结合试验阳性反应出现在病程后期并转阴较快,与染色试验结合使用有参考价值。  弓形虫点免疫金渗滤法正常值:   阴性:无

金免疫技术(斑点免疫层析试验)

一、原理金免疫技术是免疫标记技术之一,金盐被还原成原子金后形成金颗粒悬浮(胶体金),这种金颗粒呈红色,并能与蛋白质等大分子物质结合,因此,可用胶体金作为标记物来检测标本中的抗原或抗体。典型的测定方法有斑点买免疫渗滤试验和斑点免疫层析试验等。二、材料1 、HCG金标试纸条2、妊娠尿液 正常尿液三、方法

免疫胶体金技术的测试原理及应用

  测试原理  层析法免疫胶体金检测试剂实际上是免疫金标记技术和抗原抗体反应相结合而形成的一种应用形式,相比ELISA试剂,除标记物不同外,同样服从于抗原抗体反应的特性。此种检测方法具有明显的优点:  *方便使用,体现在操作简单,不需经过特殊培训。  *短时间获得检测结果,一般10-15分钟即可得出

胶体金快速斑点免疫分析1

随着免疫分析日益广泛应用于以临床为主以及非临床领域的诊断工业(diagnostic industry),免疫分析向两个方向发展:一类为全自动化的免疫分析;另一类为以硝酸纤维膜为载体的快速免疫分析。前者需要价格昂贵的全自动仪器及与仪器严格配套的各种试剂盒,目前只能在医疗及检测中心应用,虽也能较快速

胶体金快速斑点免疫分析2

四、胶体金块快速免疫结合分析的应用应用领域很广,可分为临床应用与非临床应用两类。目前应用多以前者为主。1、临床应用 已应用于临床的很多领域。由于目前它还是定性分析,故主要用以检测正常体认中不存在的生物活性物质(如传染病的抗原及抗体),以及正常情况下体液中含量很低而在某些疾病中升高的生物活性物质。

血吸虫病的诊断方法的介绍

  血吸虫病的诊断包括病原诊断和免疫诊断两大部分。病人的确诊需要从粪便中检获虫卵或孵化毛蚴。  1.病原学诊断  从粪便内检查血吸虫虫卵和毛蚴以及直肠黏膜活体组织检查虫卵称病原学检查,是确诊血吸虫病的依据。常用的病原学检查方法有改良加藤法、尼龙袋集卵孵化法、塑料杯顶管孵化法等。  2.免疫学诊断  

免疫胶体金技术3

为了得到颗粒均一的免疫金试剂,可将上述初步纯化的结合物再进一步用10%~30%蔗糖或甘油进行密度梯度离心,分带收集不同梯度的胶体金与蛋白的结合物。(2)凝胶过滤法:此法只适用于以BSA作稳定剂的胶体金蛋白结合物的纯化。将胶体金蛋白结合物装入透析袋,在硅胶中脱水浓缩至原体积的 1/5~1/10。再

酶联免疫斑点实验(ELIspot)——酶联免疫斑点实验(ELIspot)

实验材料血液样品细胞样品试剂、试剂盒70%乙醇PBS脱脂奶粉链霉亲和素检测抗体包被抗体仪器、耗材PVDF膜96孔培养板硝基纤维素底板免疫斑点板酶标板实验步骤一、包被96孔板 用70%乙醇浸润96孔板中的PVDF膜30 s 加入捕获抗体(PBS稀释),4℃过夜 倒空板中包被液,轻轻在纸上拍干,用PBS

临床化学检查方法介绍抗登革病毒IgG抗体介绍

抗登革病毒IgG抗体介绍:  登革热病毒(Dengue virus)和森林脑炎病毒(forest encepha-litis Virus)分别是引起登革热和森林脑炎的病原体,登革热流行在广东、广西、海南一带,而森林脑炎发生在东北、西北的森林地区。这两种病毒与乙脑病毒同属黄病毒,形态结构也相似,它们的

免疫学实验抗登革病毒IgG抗体介绍

  抗登革病毒IgG抗体介绍:   登革热病毒(Dengue virus)和森林脑炎病毒(forest encepha-litis Virus)分别是引起登革热和森林脑炎的病原体,登革热流行在广东、广西、海南一带,而森林脑炎发生在东北、西北的森林地区。这两种病毒与乙脑病毒同属黄病毒,形态结构也相似

酶联免疫斑点实验(ELIspot)_酶联免疫斑点实验(ELIspot)2

实验方法原理ELISPOT技术原理,一句话概括就是:用抗体捕获培养中的细胞分泌的细胞因子,并以酶联斑点显色的方式将其表现出来。实验材料细胞试剂、试剂盒PBSPBST乙醇包被抗体封闭液抗体稀释液检测抗体酶联亲和素AEC显色液PHA刺激物U-Cytech无血清培养基仪器、耗材ELISPOT读数仪超净工作

免疫胶体金的应用特点

1971年Faulk 和Taytor将胶体金引入免疫化学,此后免疫胶体金技术作为一种新的免疫学方法,在生物医学各领域得到了日益广泛的应用。在医学检验中的应用主要是免疫层析法( immunochromatography)和快速免疫金渗滤法(Dot-immuogold filtration assay

斑点酶联免疫吸附测定

实验概要斑点酶联免疫吸附测定法(DotELISA,DELISA)是以纤维素膜代替免疫酶固相载体法中常用的聚苯乙烯微量反应板而建立的一种免疫检验方法。DELISA不仅保留了常规ELISA的优点,而且还弥补了抗原或抗体对载体包被不牢等不足,所以具有敏感性高,特异性强,被检样品用量少,节省材料,不需特殊仪

斑点酶联免疫吸附测定

实验概要斑点酶联免疫吸附测定法(DotELISA,DELISA)是以纤维素膜代替免疫酶固相载体法中常用的聚苯乙烯微量反应板而建立的一种免疫检验方法。DELISA不仅保留了常规ELISA的优点,而且还弥补了抗原或抗体对载体包被不牢等不足,所以具有敏感性高,特异性强,被检样品用量少,节省材料,不需特殊仪

斑点酶联免疫吸附测定

实验概要斑点酶联免疫吸附测定法(DotELISA,DELISA)是以纤维素膜代替免疫酶固相载体法中常用的聚苯乙烯微量反应板而建立的一种免疫检验方法。DELISA不仅保留了常规ELISA的优点,而且还弥补了抗原或抗体对载体包被不牢等不足,所以具有敏感性高,特异性强,被检样品用量少,节省材料,不需特殊仪