生物样品分离技术盐析法
盐析法利用不同蛋白质在高浓度的盐溶液中溶解度不同程度的降低来沉淀除去蛋白质。在低盐浓度下,蛋白质溶解度随着盐浓度的升高而增加,称为盐溶作用。当盐浓度不断升高时,不同蛋白质的溶解度又以不同程度下降,并先后析出沉淀,称为盐析作用。这是由蛋白质分子内及分子间电荷的极性基团的静电引力造成的。由于水中加入了少量的盐,增加了溶液的极性,减弱了蛋白质分子间的作用力,促使其溶解度增大。当盐浓度增加到一定程度时,水活度被降低,蛋白质表面的电荷大量被中和,水化膜被破坏,白质分子又相互聚集沉淀析出盐析法的优点是对设备和条件要求低,安全,应用范围广泛,一般可在室温下操作常用的中性盐有硫酸铵、硫酸镁、硫酸钠、氯化钠、磷酸钠等。硫酸铵的盐析能力强,饱和液浓度大,溶解度受温度影响小,一般不会使蛋白质变性。缺点是缓冲能力差,pH值常在4.5～5.5。盐析时要注意以下几个问题。①盐的饱和度影响 盐的饱和度是影响蛋白质盐析的重要因素,不同的......阅读全文
生物样品分离技术盐析法
盐析法利用不同蛋白质在高浓度的盐溶液中溶解度不同程度的降低来沉淀除去蛋白质。在低盐浓度下,蛋白质溶解度随着盐浓度的升高而增加,称为盐溶作用。当盐浓度不断升高时,不同蛋白质的溶解度又以不同程度下降,并先后析出沉淀,称为盐析作用。这是由蛋白质分子内及分子间电荷的极性基团的静电引力造成的。由于水中加入了少
生物样品分离技术膜分离法
膜分离技术包括超滤、反渗析、电渗析、微孔过滤等。利用膜分离技术可将样品小分子化合物和大分子的蛋白质很好地分离。超滤是一种除去样品中蛋白质和其他大分子的方法,是能用分子分离的薄膜分离技术,依靠薄膜两侧压力差作为推动力来分离溶液中不同分子量的物质。与沉淀法相比,其优点是适用于小量样品,不用稀释样品也不用
生物样品分离技术加热法
加热法当待测组分热稳定性好时,可采用加热的方法将一些热变性蛋白质沉淀。加热温度视待测组分的热稳定性而定,通常可加热到90℃。蛋白质沉淀后可用离心或过滤除去,这种方法最简单,但只能除去热变性蛋白质。
生物样品分离技术凝胶色谱法
利用分子大小不同的物质在流过凝胶固定相时的保留时间不同,大分子首先流出,小分子最后流出,可将待测小分子化合物与大分子蛋白质分离。这时待测小分子化合物的浓度被流动相所稀释,必要时还要进行浓缩后再用色谱分析。
生物样品分离技术柱色谱法
用能吸附蛋白质的材料装填成小柱,使欲除蛋白质的样品流过小柱,样品中的蛋白质被柱填料吸附,欲测组分不被吸附,从小柱中流出。现已有厂家将这种小柱做成商品出售,称为预柱。这种预柱可以直接连在HPLC的进样装置上,含蛋白质的样品通过预柱后可直接进入HPLC系统分析。如分析尿中的某些代谢产物时,可将样品通过预
生物样品分离技术等电点沉淀法
利用蛋白质在等电点时溶解度最低,用酸、碱调节pH值,可使蛋白质沉淀析出,但这时沉淀不完全,可与有机溶剂沉淀法、盐析法联合使用。
血清IgG的分离制备—盐析法
原理IgG是免疫球蛋白（Immunoglobulin，简称IgG）的主要成分之一，分子量约为15万~16万，沉降生活费数约为7s。IgG是动物和人体血浆的重要成分之一。血浆蛋白质的成分多达70余种，要从血浆中分离出IgG，首先要进行尽可能除去其他蛋白质成分的粗分离程序，使IgG在样品中比例大为增高，
食品样品预处理传统方法盐析法
向溶液中加入某种无机盐,使溶质在原溶剂中的溶解度大大降低而从溶液中沉淀析出。这种方法叫作盐析。如在蛋白质溶液中,加入大量的盐类,特别是加入重金属盐,使蛋白质从溶液中沉淀出来。在进行盐析工作时,应注意溶液中所要加入的物质的选择,它不会破坏溶液中所要析出的物质,否则达不到盐析提取的目的。
蛋白质盐析分离法介绍
摘要 : 盐析的发生是由于盐浓度增大到一定数值时使水活性降低，导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和，水化膜逐渐被破坏，引起蛋白质分子之间相互聚集并从溶液中析出，最后经离心机分离后获得沉淀物和上清液。一、蛋白质盐析分离的原理：蛋白质在稀盐溶液中溶解度会随着盐浓度的增大而上升(盐溶)，当盐浓度增大到一定数值
蛋白质的盐析分离法
一、蛋白质盐析分离的原理：蛋白质在稀盐溶液中溶解度会随着盐浓度的增大而上升（盐溶），当盐浓度增大到一定数值时，其溶解度又逐渐下降直至蛋白质析出。盐析的发生是由于盐浓度增大到一定数值时使水活性降低，导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和，水化膜逐渐被破坏，引起蛋白质分子之间相互聚集并从溶液中析出，最后经离心
蛋白质的盐析分离法
一、蛋白质盐析分离的原理：蛋白质在稀盐溶液中溶解度会随着盐浓度的增大而上升（盐溶），当盐浓度增大到一定数值时，其溶解度又逐渐下降直至蛋白质析出。盐析的发生是由于盐浓度增大到一定数值时使水活性降低，导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和，水化膜逐渐被破坏，引起蛋白质分子之间相互聚集并从溶液中析出，zui后经
生物样品蛋白质的常用分离技术
(1)加热法当待测组分热稳定性好时,可采用加热的方法将一些热变性蛋白质沉淀。加热温度视待测组分的热稳定性而定,通常可加热到90℃。蛋白质沉淀后可用离心或过滤除去,这种方法最简单,但只能除去热变性蛋白质。(2)盐析法利用不同蛋白质在高浓度的盐溶液中溶解度不同程度的降低来沉淀除去蛋白质。在低盐浓度下,蛋
分离方法之盐析
盐析少量的盐（如硫酸铵、硫酸钠、氯化铵等）能促进蛋白质的溶解。当向蛋白质中加入的盐溶液达到一定浓度时，反而使蛋白质的溶解度降低而从溶液中析出，这种作用称为盐析。蛋白质的盐析是一个可逆过程，盐析出的蛋白质稀释后仍能溶解，并不影响蛋白质的活性。采用多次盐析和溶解，可以分离提纯蛋白质。制肥皂（高级脂肪酸钠
盐析法是粗分离IgG的重要方法之一
盐析法是粗分离IgG的重要方法原理IgG是免疫球蛋白（Immunoglobulin，简称IgG）的主要成分，分子量约为15万~16万，沉降生活费数约为7s。IgG是动物和人体血浆的重要成分。血浆蛋白质的成分多达70余种，要从血浆中分离出IgG，首先要进行尽可能除去其他蛋白质成分的粗分离程序，使IgG
血清免疫球蛋白（Immunoglobulin，IgG）的分离制备—盐析法
（一）原理IgG是免疫球蛋白（Immunoglobulin，简称IgG）的主要成分之一，分子量约为15万~16万，沉降生活费数约为7s。IgG是动物和人体血浆的重要成分之一。血浆蛋白质的成分多达70余种，要从血浆中分离出IgG，首先要进行尽可能除去其他蛋白质成分的粗分离程序，使IgG在样品中比例大为
何谓盐析？简述分段盐析分离蛋白质的原理
盐析是指向蛋白质溶液中加入高浓度的中性盐，以破坏蛋白质的胶体稳定性，使蛋白质的溶解度降低而从溶液中沉淀析出的过程。改变盐的浓度与溶液的PH值，便可将混合液中的蛋白质逐个盐析分开，这种分离蛋白质的操作称为分段盐析
生物样品的前处理技术机械法进行细胞破碎
机械法主要是通过机械切力的作用使组织细胞破碎,有以下几种装置和方法可用于组织细胞的破碎。①高速组织捣碎机 由调速器、支架、马达、带杆刀叶、有机玻璃管(筒口加盖)等部分组成,操作时将样品配成稀糊状液,放置于筒内(约占1/3体积),固定筒上的盖子,将调速器拨至最慢处,开动马达后逐步加速至所需速度,一
电泳分离技术样品处理方法
根据样品分离目的不同,主要有三种处理方法:还原SDS处理、非还原SDS处理、带有烷基化作用的还原SDS处理。 1)还原SDS处理:在上样buffer中加入SDS和DTT(或Beta巯基乙醇)后,蛋白质构象被解离,电荷被中和,形成SDS与蛋白相结合的分子,在电泳中,只根据分子量来分离。一般电泳均按这种
盐析纸色谱法
盐析纸色谱法 salting-out paper chromatography 是用于蛋白质类分离的一种纸色谱法。在水流动相中加入盐类或有机溶剂如乙醇、丙酮等，使组分的溶解度减小，被纸吸附的作用加强，从而使各蛋白质组分的移动距离有较大差别，从而达到较好的分离。
抗体的纯化：盐析法
精制抗体的方法很多。一般采用综合技术，避免蛋白变性。如分离IgG时，多结合使用盐析法与离子交换法，以求纯化。提取IgM的方法也很多，如应用凝胶过滤与制备电泳法，或离子交换与凝胶过滤等。一、原理蛋白质在水溶液中的溶解度是由蛋白质周围亲水基团与水形成水化膜的程度，以及蛋白质分子带有电荷的情况决定的。当用
抗体的纯化：盐析法
精制抗体的方法很多。一般采用综合技术，避免蛋白变性。如分离IgG时，多结合使用盐析法与离子交换法，以求纯化。提取IgM的方法也很多，如应用凝胶过滤与制备电泳法，或离子交换与凝胶过滤等。 一、原理 蛋白质在水溶液中的溶解度是由蛋白质周围亲水基团与水形成水化膜的程度，以及蛋白质分子带有电荷的情况决定的。
盐析技术的应用
可以把发黄的白衬衫放在5%食盐水中浸泡1小时，再慢慢搓干净；或将衣服浸于10%的浓盐水中，泡1-2小时，取出用清水漂洗干净。衣领部位的污渍可以单独加一些细盐粒轻轻搓洗效果更佳。应当注意的是衣服应当用凉水浸泡，切勿使用热水。
蛋白质的提取及粗分离实验——硫酸铵盐析法
分离纯化蛋白质，首先要从原材料中提取目的蛋白，然后通过粗分离的方法除去大量杂质，最后进行精细分离，得到目的蛋白。本实验以新型基因重组人TNF为例阐明重组蛋白TNF的提取及初步分离实验方法原理分离纯化蛋白质，首先要从原材料中提取目的蛋白，然后通过粗分离的方法除去大量杂质，最后进行精细分离，得到目的蛋白
生物芯片技术样品制备
RNA样品通常需要首先逆转录成cDNA并进行标记后才可进行检测。目前，由于检测灵敏度所限，尚难以普通探针对极少量的核酸分子进行杂交和检测，所以需要对样品或后续测试信号进行适当的放大。多数方法需要在标记和分析前对样品进行适当程度的扩增，例如通过PCR方法，以使样品核酸的拷贝数有所提高达到检测的灵敏度
盐析法的原理是什么
盐析法的原理是将硫酸铵、硫化钠或氯化钠等加入蛋白质溶液，使蛋白质表面电荷被中和以及水化膜被破坏，导致蛋白质在水溶液中的稳定性因素去除而沉淀。蛋白质在水溶液中的溶解度取决于蛋白质分子表面离子周围的水分子数目，亦即主要是由蛋白质分子外周亲水基团与水形成水化膜的程度以及蛋白质分子带有电荷的情况决定的。蛋白
生物分子的透析分离法
一、生物分子透析分离的原理：天然或人工半透膜只允许小分子通过而阻碍大分子通过，当膜的两侧存在小分子浓度差时，小分子从高浓度一侧向低浓度一侧扩散直到平衡。通过离心机分离不断去除扩散出来的小分子，从而达到分离纯化的目的。二、影响生物分子透析分离的因素：1、半透膜的通透性：半透膜的通透性取决于膜孔径的大小
生物分子的透析分离法
一、生物分子透析分离的原理：天然或人工半透膜只允许小分子通过而阻碍大分子通过，当膜的两侧存在小分子浓度差时，小分子从高浓度一侧向低浓度一侧扩散直到平衡。通过离心机分离不断去除扩散出来的小分子，从而达到分离纯化的目的。二、影响生物分子透析分离的因素：1、半透膜的通透性：半透膜的通透性取决于膜孔径的大小
食品样品预处理传统方法色谱分离法
色谱分离法又称色层分离法,是一种在载体上进行物质分离的方法的总称。根据分离原理的不同,可分为吸附色谱分离、分配色谱分离和离子交换色谱分离等。此类方法的分离效果好,近年来在食品分析中的应用越来越广泛。
生物芯片技术的生物样品的制备
分离纯化、圹增、获取其中的蛋白质或DNA、RNA并用荧光标记， 才能与芯片进行反应。用DNA芯片做表达谱研究时，通常是将样品先抽提MRNA，然后反转录成CDNA。同时掺入带荧光标记的dCTP或dUTP。
微生物分离纯化实验——平板划线分离法
实验方法原理该方法操作简便，普通用于微生物的分离与纯化。其基本原理包括两方面：1. 选择适合于待分离微生物的生长条件，如营养、酸碱度、湿度和氧等要求或加入某种抑制剂造成只利于该微生物生长，而抑制其他微生物生长的环境，从面淘汰一些不需要的微生物。2. 微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落可以是由一个