过氧化物酶染色实验原理
过氧化物酶是广泛存在于生物体中的一类酶,大部分含有血红素,是一种结合蛋白。它可以催化H2O2或相关有机过氧化合物与有机、无机化合物的氧化反应。血细胞所含过氧化物酶主要为髓过氧化物酶(MPO),MPO是一类糖蛋白,是人类中性粒细胞含量最多的蛋白质,约占细胞干重的3%~5%.用MPOPHMPZE探针与正常人染色体中期细胞作原位杂交,证明MPO基因定位在染色体17q11~q22,为单拷贝基因。对HL60细胞系中MPO的生物合成和加工过程研究发现,最初产生的MPO是分子量为89,000的前体,有大、小亚单位各一个,对内糖苷酶敏感,无MPO活性,MPO前体还需进一步进入溶酶体,经蛋白切割后才能成熟并具有活性。这提示MPO前体转录时或转录后的加工缺陷可产生异常的MPO,使后者在早幼粒细胞发育过程中不能包装到嗜苯胺蓝颗粒中。在临床白血病研究中,用全长MPOcDNA作探针进行RNA印迹法杂交,或用MPOcDNA探针作反转录聚合酶链反应(RT......阅读全文
Hoechst染色实验
Hoechst染色时无需用DAB来显色,它直接结合细胞的DNA ,经过紫外光激发后发出蓝色荧光。试剂、试剂盒Hoechst染料二甲基亚砜染料二苯亚胺甲基水杨酸仪器、耗材荧光显微镜水浴锅烘箱培养箱实验步骤1. 用水按1:500稀释1 mg/ml 的Hoechst 染液至终浓度2 μg/ml。将稀释染
糖类染色实验
实验方法原理 糖原由多糖衍化而来,是单纯的多糖。糖原易溶于水,所以用特殊的 Carnoy 固定液或无水乙醇直接固定才能较好地保存糖原,常用高碘酸(periodic acid)-Shiff 反应(PAS)染色法。实验材料 石蜡组织切片试剂、试剂盒 高碘酸蒸馏水碱性复红盐酸 焦亚硫酸钠(偏重亚硫酸钠)双
Hoechst染色实验
基本方案 试剂、试剂盒 Hoechst染料 二甲基亚砜染料 二苯亚胺 甲基
Hoechst染色实验
试剂、试剂盒 Hoechst染料二甲基亚砜染料二苯亚胺甲基水杨酸仪器、耗材 荧光显微镜水浴锅烘箱培养箱实验步骤 1. 用水按1:500稀释1 mg/ml 的Hoechst 染液至终浓度2 μg/ml。将稀释染液加于切片上或将玻片浸于染液中,置室温2 min。2. 室温下,在水中洗2 min,晾干
荚膜染色实验
实验方法原理 荚膜是包围在细菌细胞外的一层粘液状或胶质状物质,其成分为多糖、糖蛋白或多肽。由于荚膜与染料的亲和力弱不易着色;而且可溶于水,易在用水冲洗时被除去。所以通常用衬托染色法染色,使菌体和背景着色,而荚膜不着色合在菌体周围形成一透明圈。由于荚膜含水量高。制片时通常不用热固定,以免变形影响观察。
鞭毛染色实验
实验方法原理 鞭毛染色的基本原理,是在染色前先用媒染剂处理含使它沉积在鞭毛上,使鞭毛直径加粗,然后再进行染色。实验材料 苏云金芽孢杆菌假单胞菌金黄色葡萄球菌试剂、试剂盒 硝酸银鞭毛染色液0.01% 美蓝水溶液仪器、耗材 载玻片盖玻片凹载玻片无菌水凡士林显微镜实验步骤 1. 菌种的准备 要求用活跃生长
钙质染色实验
钙质沉积于骨组织或病理变化的组织中,多见于组织坏死、动脉粥样硬化和肿瘤等钙化的组织。在茜素的作用下,可与钙形成有色的螯合物(钙质)成分。实验方法原理钙质即钙化物质,在各种组织中都可以形成钙质,这种钙盐沉积物也可被称为钙盐沉着,形态多样化,有的呈颗粒状和片块状等。其主要成分为磷酸钙和碳酸钙。常用 Da
钙质染色实验
实验方法原理 钙质即钙化物质,在各种组织中都可以形成钙质,这种钙盐沉积物也可被称为钙盐沉着,形态多样化,有的呈颗粒状和片块状等。其主要成分为磷酸钙和碳酸钙。常用 Dahl-McGec-Russell 茜素红 S 法染色。实验材料 石蜡组织切片试剂、试剂盒 二甲苯无水乙醇中性树胶蒸馏水茜素红乙酸淡绿氢
核酸染色实验
实验方法原理 在一般情况下,通过盐酸水解后使 DNA 残基分解碱基,然后从碳键处打断糖苷键而游离出醛基,再与无色复红液(Schiff)进行反应,形成紫红色的复合物(DNA)。常用 Feuhgen-Rossenbeck 染色法(孚尔根染色法)。实验材料 石蜡组织切片试剂、试剂盒 Schiff 试剂染色
简述过氧化物酶染色的临床意义
一、过氧化物酶染色的临床意义: 过氧化物酶染色主要用于鉴别白血病的类型:急性粒细胞白血病多呈阳性、急性单核细胞白血病(AML)多呈弱阳性、急性淋巴细胞白血病(ALL)则呈阴性。 过氧化物酶主要存在于粒细胞中,除早期粒细胞外,其中各阶段呈阳性反应,细胞越成熟阳性程度越强。从幼单核细胞起呈弥散细
瑞氏染色法:染色原理
既有物理的吸附作用,又有化学的亲和作用。各种细胞成分化学性质不同,对各种染料的亲和力也不一样。如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色或蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态
瑞氏染色法染色原理
瑞氏染色法染色原理: 为了观察细胞内部结构,识别各种细胞及其异常变化,血涂片必须进行染色。瑞氏染色法是血细胞分析最经典和最常用的染色法。瑞氏染料: 是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成的复合染料。染色原理: 是染料透入被染物并存留其内部的一种过程,此过程既有物理的吸附作用,又有化学的
革兰氏染色法的染色原理
革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌(G+)和革兰氏阴性菌(G-)两大类,是细菌学上最常用的鉴别染色法。该染色法之所以能将细菌分为G+菌和G-菌,是因为一般认为革兰氏染色是基于细菌细胞壁特殊化学组分进行染色的。 通过初染和媒染后,细胞内形成了不溶于水的结晶紫一碘大分子复合物。革兰氏阳性细菌由
鞭毛染色配制及染色方法实验
实验步骤改良Ryui法一、实验试剂:A液:5%石炭酸: 10ml鞣酸: 2g饱和硫酸铝钾液:10mlB液:结晶紫酒精饱和液应用液:A液10份,B液1份,混合,室温存放。二、染色方法:1. 玻片的处理:要求用新的载玻片,用前须在95%酒精中浸泡24小时以上,用时从酒精中取
革兰氏染色配制及染色方法实验
实验方法原理本染色法是最基本的染色法,可使用于标本涂片或菌落涂片。染色结果将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。实验步骤一、实验试剂:1. 结晶紫溶液:A液:结晶紫:2g,95%乙醇:20ml。B液:草酸铵:0.8g,蒸馏水:80ml。需在用前24小时将A液. B液混合,过滤后装入试剂瓶内备用。2.
鞭毛染色配制及染色方法实验
实验步骤 改良Ryui法一、实验试剂:A液:5%石炭酸: 10ml鞣酸: 2g饱和硫酸铝钾液:10mlB液:结晶紫酒精饱和液应用液:A液10份,B液1份,混合,室温存放。二、染色方法:1. 玻片的处理:要求用新的载玻片,用前须在95%酒精中浸泡24小时以上,用时从酒精中
抗酸染色配置以及染色方法实验
实验方法原理抗酸染色直接用于痰标本时,可以适当曾加标本涂片的厚度,以提高检出率。染厚涂片时,须掌握复染色时间,如果背景过深,影响镜检。实验步骤碱性复红染色法:(萋纳Ziehl-Neelsen法)一、实验试剂:1. 萋纳石炭酸复红溶液:碱性复红乙醇饱和溶液:10ml5%石炭酸溶液: 90m
抗酸染色配置以及染色方法实验
实验方法原理抗酸染色直接用于痰标本时,可以适当曾加标本涂片的厚度,以提高检出率。染厚涂片时,须掌握复染色时间,如果背景过深,影响镜检。实验步骤碱性复红染色法:(萋纳Ziehl-Neelsen法)一、实验试剂:1. 萋纳石炭酸复红溶液:碱性复红乙醇饱和溶液:10ml5%石炭酸溶液: 90m
革兰氏染色配制及染色方法实验
实验方法原理本染色法是最基本的染色法,可使用于标本涂片或菌落涂片。染色结果将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。实验步骤一、实验试剂:1. 结晶紫溶液:A液:结晶紫:2g,95%乙醇:20ml。B液:草酸铵:0.8g,蒸馏水:80ml。需在用前24小时将A液. B液混合,过滤后装入试剂瓶内备用。2.
脂质染色实验_苏丹-III-染色
实验材料冰冻切片试剂、试剂盒苏丹 III乙醇蒸馏水自来水甘油明胶盐酸乙醇Harris 苏木精仪器、耗材弯钩玻璃棒载玻片实验步骤苏丹 III 染色液:苏丹 III 2.5 g,70% 乙醇 500 ml,充分溶解后,室温下形成饱和溶液,可存放较长时间。1. 冰冻组织切片厚 10~20 μm 左右,采用
αNAE染色的原理
血细胞内的α-醋酸萘酚酯酶(α-NAE)将基质液中的α-醋酸萘酚水解,产生α-萘酚,萘酚再与坚牢蓝B偶联,形成不溶性灰黑色或棕黑色沉淀,定位于胞质内。属于非特异性醋酸染色。
过氧化物酶染色(Washburn法)标准操作规程
1. 实验原理:粒细胞和部分单核细胞的溶酶体颗粒中含有过氧化物酶,pox能分解H2O2释放出新生氧,使四甲基联苯胺氧化成联苯胺蓝,后者与亚硝基铁氰化钠结合,再进一步氧化形成稳定的蓝色物质,沉淀于酶活性的细胞质内。 2. 标本采集 2.1 病人准备:了解病人是否对局麻药有
瑞氏染色法的染色原理
染色原理物理吸附与化学亲和作用嗜酸性物质→伊红+ Hb、嗜酸性颗粒嗜碱性物质→亚甲蓝+ 细胞核蛋白、L及B胞质
姬姆萨染色法:染色原理
姬姆萨染液由天青、伊红组成。染色原理和结果与瑞氏染色基本相同。
色素类染色实验
实验方法原理 含铁血黄素是一种血红蛋白源性色素,常规染色为棕黄色大小不等的颗粒,呈点状和团块状分布于细胞内或细胞外。有的存在于血管内。染色反应是由于三价铁离子从蛋白质中被盐酸分离出来,再与亚铁氡化钾反应,生成蓝色的亚铁氰化铁物质,通常用普鲁士(Perls)蓝反应。实验材料 石蜡组织切片试剂、试剂盒
吉姆萨染色实验
实验材料 原位杂交玻片试剂、试剂盒 吉姆萨染色液磷酸钠缓冲液乙醇二甲苯仪器、耗材 染色盘培养箱滤纸实验步骤 1. 将显影的玻片置于玻片架上,浸入盛有水的染色盘中。(1)1个盘:pH6.8 10 mmol/l 磷酸钠缓冲液,所配的25倍稀释的吉姆萨染液。(2)3个盘:水。(3)脱水系列溶液:①3个盘
细菌简单染色实验
实验方法原理常用碱性染料进行简单染色,这是因为:在中性、碱性或弱酸性溶液中,细菌细胞通常带负电荷,而碱性染料在电离时,其分子的染色部分带正电荷(酸性染料电离时,其分子的染色部分带正电荷)。因此碱性染料的染色部分很容易与细菌结合使细菌着色。经染色后的细菌细胞与背景形成鲜明的对比,在显微镜下更易于识别,
脂质染色实验
实验方法原理 实验材料 冰冻切片试剂、试剂盒 油红 O乙醇二甲苯蒸馏水甘油明胶苏丹 III仪器、耗材 弯钩玻璃棒5 ml 染色缸载玻片插板实验步骤 油红 O-乙醇染色液:油红 O(oil red O,上海试剂三厂)2.5 g,70% 乙醇 500 ml,混合后间隔摇动多次,待 24 h 形成饱和液,
吉姆萨染色实验
实验方法原理 吉姆萨染液由天青,伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈
尼氏染色实验
实验方法原理尼氏染色法(Nissl Staining)是用碱性染料染神经组织的一种方法。尼氏体是胞质内的一种嗜碱性物质,广泛见于各种神经元,不同神经元中的尼氏体形状、大小和数量则各有差异。用于尼氏染色的碱性染料主要有焦油紫、亚甲蓝、甲苯胺蓝和硫堇等。我室主要用焦油紫和硫堇染色。尼氏染色法可以染出尼氏