PCR临床基因扩增检验实验室的规范化设置及其管理
临床基因扩增检验实验室的规范化设置详见《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》(卫医发[2002]10号文)附件《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》。为避免污染,必须严格遵循《临床基因扩增检验实验室设置标准》设置临床基因扩增检验实验室。 临床基因扩增检验实验室四个隔开的工作区域中每一区域都须有专用的仪器设备。各区域都必须有明确的标记,以避免设备物品如加样器或试剂等从其各自的区域内移出从而造成不同的工作区域间设备物品发生混淆。进入各个工作区域必须严格遵循单一方向顺序,即只能从试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区(简称扩增区)至产物分析区,避免发生交叉污染。在不同的工作区域应使用不同颜色或有明显区别标志的工作服,以便于鉴别。此外,当工作者离开工作区时,不得将各区特定的工作服带出。 清洁方法不当也是污染发生的一个主要原因,因此实验室的清洁应按试剂贮存和准备区至扩增产物分析区的方向进行。不同的实验区域应有其各......阅读全文
PCR临床基因扩增检验实验室的规范化设置及其管理
临床基因扩增检验实验室的规范化设置详见《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》(卫医发[2002]10号文)附件《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》。为避免污染,必须严格遵循《临床基因扩增检验实验室设置标准》设置临床基因扩增检验实验室。 临床基因扩增检验实验室四个隔开的工作区域中每一区域都须有
临床基因扩增检验实验室基本设置标准
根据《临床检验扩增检验实验室管理暂行办法》,制定本标准 一、 临床基因扩增检验实验室区域设置原则 (一) 临床基因扩增检验实验室区域设置原则 1、 试剂储存和准备区 2、 标本制备区 3、 扩增反应混合物配制和扩增区 4、 扩增产物分析区 如使用全自动分
临床基因扩增检验实验室管理暂行办法
第一章 总 则第一条 为规范临床基因扩增检验实验室管理,保证临床基因扩增检验质量,使临床诊断和治疗更为科学、合理,特制定本办法。第二条 临床基因扩增检验技术指以临床诊断治疗为目的,以扩增检测DNA或RNA为方法的检测技术,如聚合酶链反应(PCR)、连接酶链反应(LCR)、转录依赖的放大系统(TAS)
临床基因扩增检验实验室管理暂行办法
第一章 总 则第一条 为规范临床基因扩增检验实验室管理,保证临床基因扩增检验质量,使临床诊断和治疗更为科学、合理,特制定本办法。第二条 临床基因扩增检验技术指以临床诊断治疗为目的,以扩增检测 DNA 或 RNA 为方法的检测技术,如聚合酶链反应( PCR )、连接酶链反应( LCR )、转录依赖的放
临床基因扩增检验实验室标本扩增区的污染防治
下述工作在本区内进行:DNA或cDNA扩增。此外,已制备的DNA模板和合成的cDNA(来自样本制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。在巢式PCR测定中,通常在第一轮扩增后必须打开反应管,因此巢式扩增有较高的污染危险性,第二次加样必须在本区内进行。不能
临床基因扩增检验技术
PCR技术是由Cetus公司和加利福尼亚大学1985年联合创造的,主要贡献者为Kary B mulis和HeneryA、Erlich。该方法首先被应用于人β-珠蛋白DNA的扩增及镰刀状红细胞贫血病的产前诊断。自85年首次报道PCR方法以来,PCR被广泛应用于分子克隆、序列分析、基因突变、遗传病、传染
临床基因扩增检验实验室质量保证
(一)标本的采集 常用于基因扩增检测的临床标本包括EDTA或枸橼酸钠抗凝全血或骨髓、血清或血浆、痰、脑脊液、尿及分泌物等。采血液等样本时,应使用一次性密闭容器,如真空采血管。当使用非密闭采样系统时,如尿、分泌物和骨髓的采样,必须注意防止来自采样者的皮屑或分泌物的污染。采样时必须戴一次性手套。
临床基因扩增检验实验室工作规范(三)
(七)污染 在实际工作中,常见有以下几种污染类型:扩增片段的污染(产物污染);天然基因组DNA的污染、试剂污染(贮存液或工作液)以及标本间交叉污染(如气溶胶从一个阳性标本扩散到原本阴性的标本)。临床基因扩增检验实验室中污染的最主要来源是扩增产物的污染。由于一旦发生污染后,再围绕实验室来寻找污染源不仅
临床基因扩增检验实验室工作规范(三)
(七)污染 在实际工作中,常见有以下几种污染类型:扩增片段的污染(产物污染);天然基因组DNA的污染、试剂污染(贮存液或工作液)以及标本间交叉污染(如气溶胶从一个阳性标本扩散到原本阴性的标本)。临床基因扩增检验实验室中污染的最主要来源是扩增产物的污染。由于一旦发生污染后,再围绕实验室来寻找污染源不仅
临床基因扩增检验实验室工作规范(一)
为使基因扩增检验技术有效地应用于临床,更好地为疾病的预防、诊断和治疗服务,保证检验质量,特制定本规范。一、临床基因扩增检验实验室的规范化设置及其管理临床基因扩增检验实验室的规范化设置详见《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》(卫医发[2002]10号文)附件《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》。为
临床基因扩增检验实验室工作规范(二)
(四)扩增产物分析区下述操作在本区内进行:扩增片段的测定。核酸扩增后产物的分析方法多种多样,如膜上或微孔板上探针杂交方法(同位素标记或非同位素标记)、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、Southern转移、核酸测序方法等。目前国内的商品试剂盒绝大部分均采用非同位素标记的微孔板上探针杂交方法,即PC
临床基因扩增检验实验室样本的处理办法
(一)标本的采集 常用于基因扩增检测的临床标本包括EDTA或枸橼酸钠抗凝全血或骨髓、血清或血浆、痰、脑脊液、尿及分泌物等。采血液等样本时,应使用一次性密闭容器,如真空采血管。当使用非密闭采样系统时,如尿、分泌物和骨髓的采样,必须注意防止来自采样者的皮屑或分泌物的污染。采样时必须戴一次性手套。
PCR基因扩增
实验概要PCR扩增目标DNA片段。实验原理多聚酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性、退火、延伸三个基本反应步骤构成。 1. 模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃
临床基因扩增检验实验室建设整体方案(三)
3、PCR实验室可开展的项目已执业登记医学检验科(分子生物学专业或者临床细胞分子遗传学专业)可开展的项目名称请参考《医疗机构临床检验项目目录(2013年版医疗机构临床检验项目目录(2013年版)》。项目列举如下:项目类型项目临床指引肝炎艾滋系列传染病检测产品乙型肝炎病毒HBV-DNA乙型肝炎病人抗病
临床基因扩增检验实验室建设整体方案(一)
PCR实验室整体解决方案三部曲分为三个部分1、 临床基因扩增检验实验室建设整体服务方案2、 区域精准医学中心联防联控建设方案3、 一站式快速分子诊断筛查移动实验室建设(方舱实验室)好久没跟大家互动了,笔者留下了几篇烂尾的文章,就消失无踪了,究其原因,一来国家政策对
临床基因扩增检验实验室建设整体方案(二)
一、PCR实验室建设整体服务方案为XXXX医疗机构提供专业的临床基因扩增检验实验室设计与建设、质控体系搭建、人才技能培训、实验室运营管理经验输出、区域化供应等服务支持。1、服务流程1)确认意向,签订合同:客户需求了解,项目效益评估,装修现场条件评估。2)建设规划,布局设计:指导分区布局设计和平面布置
临床基因扩增实验室的pcr验收要准备哪些工作
临床基因扩增实验室的pcr验收要准备哪些工作摘要:为规范临床基因扩增检验实验室管理,保证临床基因扩增检验质量,使临床诊断和治疗更为科学、合理,特制定本办法。关键词:PCR 实验室临床基因扩增检验实验室管理暂行办法第一章 总 则第一条 为规范临床基因扩增检验实验室管理,保证临床基因扩增检验质量,使临床
临床基因扩增实验室的pcr验收要准备哪些工作
临床基因扩增实验室的pcr验收要准备哪些工作摘要:为规范临床基因扩增检验实验室管理,保证临床基因扩增检验质量,使临床诊断和治疗更为科学、合理,特制定本办法。关键词:PCR 实验室临床基因扩增检验实验室管理暂行办法第一章 总 则第一条 为规范临床基因扩增检验实验室管理,保证临床基因扩增检验质量,使临床
临床基因扩增检验实验室标本扩增产物分析区的污染防治
下述操作在本区内进行:扩增片段的测定。 核酸扩增后产物的分析方法多种多样,如膜上或微孔板上探针杂交方法(同位素标记或非同位素标记)、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、Southern转移、核酸测序方法等。目前国内的商品试剂盒绝大部分均采用非同位素标记的微孔板上探针杂交方法,即PCR-ELIS
基因扩增检验的实验室规范(一)
为使基因扩增检验技术有效地应用于临床,更好地为疾病的预防、诊断和治疗服务,保证检验质量,特制定本规范。一、临床基因扩增检验实验室的规范化设置及其管理临床基因扩增检验实验室的规范化设置详见《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》(卫医发[2002]10号文)附件《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》。为
建立PCR实验室的基本条件
临床基因扩增实验室采用PCR技术用于临床基因诊断,由于PCR技术对所检测的核酸模板进行大量扩增,容易出现实验室污染导致临床检测标本假阳性结果;另外由于PCR技术要求高、影响因素多(特别是RNA标本),实验过程处理不当易导致核酸模板无扩增现象,导致临床标本假阴性结果。因此临床基因扩增检验实验室技术验收
分子生物学标准化现状
基因技术可给人类巨大的利益,但也给医学、伦理、法律和经济带来巨大冲击。基因检验滥用造成了资源浪费及不必要的医疗纠纷,基因隐私导致用人和保险歧视,但限制基因检验又对基因检验技术的发展造成负面影响。 美国卫生部(DHHS)为解决对基因检验安全和有效性的评估及了解有无必要进行更多的监督和管理。于19
临床基因扩增检验实验室标本制备区的污染防治
下述操作在该区进行:临床标本的保存,核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定RNA时cDNA的合成。要正确使用加样器。由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致的污染,所以应避免在本区内不必要的走动。可通过在本区内设立正压条件避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。为避免样本间的交叉污染,加入
PCR基因扩增实验
[实验目的]通过本实验学习PCR反应的基本原理与实验技术。[实验原理]多聚酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)的原理类似于DNA的天然复制过程。在待扩增的DNA片段两侧和与其两侧互补的两个寡核苷酸引物,经变性、退火和延伸若干个循环后,DNA扩增2n倍。1.变性:加
PCR基因扩增1
一、实验原理 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)是一种体外核酸扩增系统,其原理类似DNA分子的天然复制过程,是将在待扩增的DNA片段和与其两侧互补的两个寡聚核苷酸引物,经变性、退火和延伸若干个循环后,DNA扩增 2n 倍。该技术已成为分子生物学中
PCR基因扩增原理
基因扩增技术(PCR)聚合酶链反应(polymerase chain reaction简称PCR)又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法,是基因扩增技术的一次重大革新。可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍,从而大大提高对DNA分子的分析和检测能力,能检测单分子DNA或对每1
PCR基因扩增2
(4)引物的熔点温度(Tm值)要适当。Tm值与引物的碱基组成和长度有关;PCR引物的GC/AT应与要扩增的模板DNA相当或略高些。一般熔点温度以大于55℃为宜。(5)引物的3,末端必须与模板严格互补,而5,末端的要求可灵活些。(6)目前在引物选择中已广泛应用计算机软件,从EMBL或Genebank中
基因扩增检验的实验室规范(二)
(三)扩增区下述工作在本区内进行:DNA或cDNA扩增。此外,已制备的DNA模板和合成的cDNA(来自样本制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。在巢式PCR测定中,通常在第一轮扩增后必须打开反应管,因此巢式扩增有较高的污染危险性,第二次加样必须在本区
目的基因的PCR扩增
实验概要进行目的基因的PCR扩增实验原理PCR(聚合酶链式反应)是一种选择性体外扩增DNA或RNA的方法。它包括3个基本步骤:⑴变性:目的双链DNA片段在94℃下解链;⑵退火:两种寡核苷酸引物在适当温度(50℃左右)下与模板上的目的序列通过氢键配对;⑶延伸:在Taq DNA聚合酶合成DNA的最适
实验室规范化管理
1.1实验室规范化管理基本要求 ⑪ 建立严格的实验室管理制度,明确责任和要求,防止操作人员违规操作; ⑫ 保持实验室环境整洁,注意操作细节,避免由于操作人员失误给实验室带来沾污。经常彻底地清洁实验室及其设备,严禁用扫帚扫地,尽量不用电风扇,避免扬尘和过分潮湿; ⑬ 工作人员进入操作间应更换衣、帽和鞋