关于细胞融合实验的主要试剂的介绍

(1)胎牛血清或小牛血清 (2)培养基:细胞融合常用的培养液有DMEM、RPMI 1640 及无血清培养基等。DMEM有高糖(4500mg/L)及低糖(1000mg/L)之分。杂交瘤细胞在上述几种培养基中均能良好的生长与增殖 (3)HAT及HT培养液:HAT、HT(sigma)以五十分之一的比例加入培养基( DMEM或RPMI 1640) (4)聚乙二醇(PEG)溶液:称取一定量的PEG,高压蒸汽灭菌(8磅30分钟),待其冷至50℃左右,与等体积的RPMI1640混合,即为50%的PEG溶液,封口后4℃放置备用。用于细胞融合的PEG的分子量可在1000-6000之间,目前已有商品化的50%PEG溶液(美国 sigma 公司)可直接用于细胞融合......阅读全文

关于细胞融合实验的主要试剂的介绍

  (1)胎牛血清或小牛血清  (2)培养基:细胞融合常用的培养液有DMEM、RPMI 1640 及无血清培养基等。DMEM有高糖(4500mg/L)及低糖(1000mg/L)之分。杂交瘤细胞在上述几种培养基中均能良好的生长与增殖  (3)HAT及HT培养液:HAT、HT(sigma)以五十分之一的

细胞融合实验的主要试剂介绍

  (1)胎牛血清或小牛血清  (2)培养基:细胞融合常用的培养液有DMEM、RPMI 1640 及无血清培养基等。DMEM有高糖(4500mg/L)及低糖(1000mg/L)之分。杂交瘤细胞在上述几种培养基中均能良好的生长与增殖  (3)HAT及HT培养液:HAT、HT(sigma)以五十分之一的

关于细胞融合实验的步骤介绍

  1. DMEM或1640基础培养基、PEG溶液置于37℃水浴中预温;  2. 将Balb/c小鼠摘眼球处死后,浸入75%洒精;  3. 无菌取免疫小鼠的脾脏;  4. 脾脏用PBS洗涤后,放入无菌过滤的网筛,再把网筛放在盛有完全培养基的玻璃平皿中用研磨棒(或注射器针管)轻轻研磨或挤压,使其通过网

细胞融合实验的实验步骤介绍

  1. DMEM或1640基础培养基、PEG溶液置于37℃水浴中预温;  2. 将Balb/c小鼠摘眼球处死后,浸入75%洒精;  3. 无菌取免疫小鼠的脾脏;  4. 脾脏用PBS洗涤后,放入无菌过滤的网筛,再把网筛放在盛有完全培养基的玻璃平皿中用研磨棒(或注射器针管)轻轻研磨或挤压,使其通过网

关于细胞融合的过程介绍

  细胞膜有内外两层,细胞融合首先发生在外层,然后再到内层,由此就出现了两种融合通道,细胞体内物质通过这两种通道转移。病毒膜与目标细胞融合时,只出现一种融合通道,即导致融合的基因只能在病毒中找到,而在目标细胞中却找不到。但是,通过EFF-1发生的细胞融合则是一个双向融合过程,需要EFF-1出现在两个

关于细胞融合的基本介绍

  细胞融合(cell fusion),细胞遗传学名词,是在自发或人工诱导下,两个细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。基本过程包括细胞融合形成异核体(heterokaryon)、异核体通过细胞有丝分裂进行核融合、最终形成单核的杂种细胞。细胞融合可作为一种实验方法被广泛适用于单克隆抗体的制备,膜蛋白的

关于细胞融合的方法介绍

  同种细胞在培养时2个靠在一起的细胞自发合并,称自发融合;异种间的细胞必须经诱导剂处理才能融合,称诱发融合。  一、仙台病毒法融合  ①两种细胞在一起培养,加入病毒,在4℃条件下病毒附着在细胞  膜上。并使两细胞相互凝聚;  ②在37℃中,病毒与细胞膜发生反应,细胞膜受到破环,此时需  要Ca2+

细胞融合实验的设备材料介绍

  超净工作台、二氧化碳恒温培养箱、倒置生物显微镜、离心机、恒温水浴箱、冰箱、细胞混匀器、荧光显微镜或流式细胞仪等。培养器皿及其它:96孔、24孔培养板、培养瓶、离心管、平皿、保温杯、培养液过滤装置、不锈钢网及手术剪刀、镊子等。Balb/c小鼠。SP2/0细胞(骨髓瘤细胞)。

关于细胞融合的应用价值介绍

  细胞融合不仅可用于基础研究,而且还有重要的应用价值,在植物育种方面已经成功的有萝卜+甘蓝、粉蓝烟草+郎氏烟草、番茄+马铃薯等等。细胞融合另一个重要应用就是制备单克隆抗体。单克隆抗体可以用作诊断试剂,治疗疾病和运载药物,具有准确,高效,简易,快速等优点。

关于细胞融合的发展简史介绍

  19世纪30年代,科学家们相继在肺结核,天花,水痘,麻疹等疾病患者的病理组织中观察到多核细胞。  19世纪70年代,科学家们在蛙的血细胞中也看到了多核细胞的现象,但是当时科学发展水平的限制,没有给予足够重视。  1962年,日本科学家发现日本血凝型病毒能引起艾氏腹水瘤细胞融合的现象。  1965

关于细胞融合的诱导物的介绍

  细胞融合的诱导物种类很多.常用的主要有生物法用灭活的仙台病毒(Sendai virus),化学法如用聚乙二醇(Polyethyleneglycol,PEG)和物理法如电脉冲,振动、离心、电激。目前应用最广泛的是聚乙二醇,因为它易得、简便,且融合效果稳定。PEG的促融机制尚不完全清楚,它可能引起细

细胞融合实验的实验原理

  根据Burnet的抗体选择学说,一个B淋巴细胞只能产生一种针对它能够识别的特异性抗原决定簇的抗体。从一个祖先B细胞分裂繁殖而形成的纯细胞系称为克隆。来自克隆系的细胞基因是完全相同的,产生的抗体也完全相同。这种从一株克隆系产生的性质相同的均一抗体称为单克隆抗体。但这种具有分泌功能的B淋巴细胞难以在

动物细胞融合的主要方法

动物细胞融合的主要方法病毒法;聚乙二醇法;电融合法。相关内容:诱导动物细胞融合的方法有:物理法(离心、振动)、化学法(聚乙二醇)、生物法(灭活的病毒)。诱导植物原生质体融合的方法可分为物理法和化学法。(1)植物体细胞杂交技术中,诱导原生质体融合的方法基本分为两类,物理法和化学法,物理法包括离心、振动

关于细胞融合技术的意义价值介绍

  细胞融合不仅可用于基础研究,而且还有重要的应用价值,在植物育种方面已经成功的有萝卜+甘蓝、粉蓝烟草+郎氏烟草、番茄+马铃薯等等。细胞融合另一个重要应用就是制备单克隆抗体。单克隆抗体可以用作诊断试剂,治疗疾病和运载药物,具有准确,高效,简易,快速等优点。  ⒈理论上说任何细胞,都有可能通过体细胞杂

细胞融合实验的实验原理简介

  根据Burnet的抗体选择学说,一个B淋巴细胞只能产生一种针对它能够识别的特异性抗原决定簇的抗体。从一个祖先B细胞分裂繁殖而形成的纯细胞系称为克隆。来自克隆系的细胞基因是完全相同的,产生的抗体也完全相同。这种从一株克隆系产生的性质相同的均一抗体称为单克隆抗体。但这种具有分泌功能的B淋巴细胞难以在

细胞融合实验

实验概要掌握细胞融合原理、应用融合细胞的方法以及细胞融合率的计算。实验原理细胞融合(Cell  fusion),即在自然条件下或用人工方法(生物的、物理的、化学的)使两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的过程。人工诱导的细胞融合,在六十年代作为一门新兴技术而发展起来。由于它不仅能产生同种细胞融合,也

细胞融合实验

实验方法原理细胞融合的诱导物种类很多.常用的主要有灭活的仙台病毒(Sendai virus),聚乙二醇(Polyethyleneglycol,PEG)和电脉冲。目前应用zui广泛的是聚乙二醇,因为它易得、简便,且融合效果稳定。PEG的促融机制尚不完全清楚,它可能引起细胞膜中磷脂的酰键及极性基团发生结

实验室试剂重水的主要作用

重水的主要用途是在核反应堆中做“减速剂”,减小中子速度,控制核裂变过程,也是冷却剂。重水和氘在研究化学和生理变化中是一种宝贵的示踪材料,例如,用稀重水灌溉树木,可以测知水在这些植物中每小时可运行十几米到几十米。测定饮过大量稀重水的人尿中的氘含量,知道水分子在人体中停留时间平均为14天。用氘代替普通氢

关于卢卡斯试剂的实验方法介绍

  在3支大试管中分别加上述改进方法配制的试剂各1ml,然后在各试管中分别加人正丁醇、仲丁醇、叔丁醇各 5 滴,振荡。放在温水浴中加热,观察试管内溶液变浑浊的时间 。叔丁醇加人卢卡斯试剂后振荡,2min内即变浑浊, 静置后分层。仲醇加人卢卡斯试剂后,在温水浴中加热数分钟后,振荡试管静置,溶液慢慢出现

细胞融合的介绍

  细胞融合(cell fusion),细胞遗传学名词,是在自发或人工诱导下,两个细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。基本过程包括细胞融合形成异核体(heterokaryon)、异核体通过细胞有丝分裂进行核融合、最终形成单核的杂种细胞。细胞融合可作为一种实验方法被广泛适用于单克隆抗体的制备,膜蛋白的

细胞融合仪的主要技术参数

  交流电场参数  方波成串脉冲电压:峰一峰值 0-48V(0-±24V),连续可调。  方波成串脉部频率:30KHZ-3MHZSK可调  直流电场参数  方波融合脉冲电压:0-600V连续可调(电极间距)1.0mm时场强可达6000V/cm.  方波融合脉冲幅度:1us-5ms分十档可任选  随机

细胞融合技术的实验操作

人、鼠细胞融合实验分三步进行∶首先用荧光染料标记抗体∶将小鼠的抗体与发绿色荧光的荧光素(fluorescin)结合,人的抗体与发红色荧光的罗丹明(rhodamine)结合;第二步是将小鼠细胞和人细胞在灭活的仙台病毒的诱导下进行融合;最后一步将标记的抗体加入到融合的人、鼠细胞中,让这些标记抗体同融合细

简述细胞融合的实验操作

  人、鼠细胞融合实验分三步进行∶首先用荧光染料标记抗体∶将小鼠的抗体与发绿色荧光的荧光素(fluorescin)结合,人的抗体与发红色荧光的罗丹明(rhodamine)结合;第二步是将小鼠细胞和人细胞在灭活的仙台病毒的诱导下进行融合;最后一步将标记的抗体加入到融合的人、鼠细胞中,让这些标记抗体同融

体细胞融合实验

实验材料 细胞试剂、试剂盒 PEG-1000仪器、耗材 培养基实验步骤 1. 以适当的培养基培养细胞至接近汇合成片的密度(80% 汇合率)。2. 吸干 60 mm 规格平皿或 T-25 培养瓶中的培养基,加 2 ml 50% PEG-1000,轻轻转动 1 分钟让该粘稠液体覆盖所有细胞。3. 往培养

体细胞融合实验

单层培养细胞的融合 悬浮培养细胞的融合             实验材料 细胞 试剂、试

体细胞融合实验

单层培养细胞的融合 悬浮培养细胞的融合             实验材料 细胞 试剂、试

细胞融合仪的介绍

细胞融合仪的介绍细胞融合(cell fusion),细胞遗传学名词,是在自发或人工诱导下,两个不同基因型的细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。基本过程包括细胞融合形成异核体(heterokaryon)、异核体通过细胞有丝分裂进行核融合、最终形成单核的杂种细胞。细胞融合可作为一种实验方法被广泛适用于单

细胞融合的基本介绍

细胞融合(cell fusion),细胞遗传学名词,是在自发或人工诱导下,两个细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。基本过程包括细胞融合形成异核体(heterokaryon)、异核体通过细胞有丝分裂进行核融合、最终形成单核的杂种细胞。细胞融合可作为一种实验方法被广泛适用于单克隆抗体的制备,膜蛋白的研究

细胞融合的方法介绍

细胞融合的方法动物细胞杂交或细胞融合  将两个不同种的亲本细胞A和B,以灭活的仙台病毒或聚乙二醇(PEG)为融合诱导剂,使A和B两细胞融合成为一个具两个遗传性不同核的异核体(如遗传性相同的核融合在一起叫同核体)。随后异核体经有丝分裂成为两个具有A和B两亲本的杂种融合核。AB杂种经多次分裂,B亲本的染

细胞融合仪的介绍

  细胞融合(cell fusion),细胞遗传学名词,是在自发或人工诱导下,两个不同基因型的细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。基本过程包括细胞融合形成异核体(heterokaryon)、异核体通过细胞有丝分裂进行核融合、zui终形成单核的杂种细胞。细胞融合可作为一种实验方法被广泛适用于单克隆抗体