关于细胞融合实验的步骤介绍
1. DMEM或1640基础培养基、PEG溶液置于37℃水浴中预温； 2. 将Balb/c小鼠摘眼球处死后，浸入75%洒精； 3. 无菌取免疫小鼠的脾脏； 4. 脾脏用PBS洗涤后，放入无菌过滤的网筛，再把网筛放在盛有完全培养基的玻璃平皿中用研磨棒（或注射器针管）轻轻研磨或挤压，使其通过网筛； 5. 将培养皿中的细胞悬液吸出，放入离心管中，1200rpm/min，离心5min； 6. 收集2×10^7个生长良好的SP2/0细胞，与1×10^8个脾脏细胞混合于透明塑料离心管中； 7. 用RPMI1640洗涤混合细胞两遍，1000rpm离心8min后，弃尽上清并用手指弹击管底，使两种细胞充分混匀成糊状； 8. 将塑料管置于37℃保温杯中，吸取1ml经37℃预温的50%的PEG溶液，将吸管轻轻插入细胞底部，在1min内匀速加完，且边加边轻轻搅拌； 9. 在水浴中静置90s，再加入40ml 37℃预温的DMEM基础培......阅读全文
关于细胞融合实验的步骤介绍
1. DMEM或1640基础培养基、PEG溶液置于37℃水浴中预温； 2. 将Balb/c小鼠摘眼球处死后，浸入75%洒精； 3. 无菌取免疫小鼠的脾脏； 4. 脾脏用PBS洗涤后，放入无菌过滤的网筛，再把网筛放在盛有完全培养基的玻璃平皿中用研磨棒（或注射器针管）轻轻研磨或挤压，使其通过网
细胞融合实验的实验步骤介绍
1. DMEM或1640基础培养基、PEG溶液置于37℃水浴中预温； 2. 将Balb/c小鼠摘眼球处死后，浸入75%洒精； 3. 无菌取免疫小鼠的脾脏； 4. 脾脏用PBS洗涤后，放入无菌过滤的网筛，再把网筛放在盛有完全培养基的玻璃平皿中用研磨棒（或注射器针管）轻轻研磨或挤压，使其通过网
关于细胞融合实验的主要试剂的介绍
（1）胎牛血清或小牛血清 （2）培养基：细胞融合常用的培养液有DMEM、RPMI 1640 及无血清培养基等。DMEM有高糖（4500mg／L）及低糖（1000mg／L）之分。杂交瘤细胞在上述几种培养基中均能良好的生长与增殖 （3）HAT及HT培养液：HAT、HT（sigma）以五十分之一的
关于细胞融合的过程介绍
细胞膜有内外两层，细胞融合首先发生在外层，然后再到内层，由此就出现了两种融合通道，细胞体内物质通过这两种通道转移。病毒膜与目标细胞融合时，只出现一种融合通道，即导致融合的基因只能在病毒中找到，而在目标细胞中却找不到。但是，通过EFF-1发生的细胞融合则是一个双向融合过程，需要EFF-1出现在两个
关于细胞融合的基本介绍
细胞融合(cell fusion)，细胞遗传学名词，是在自发或人工诱导下，两个细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。基本过程包括细胞融合形成异核体(heterokaryon)、异核体通过细胞有丝分裂进行核融合、最终形成单核的杂种细胞。细胞融合可作为一种实验方法被广泛适用于单克隆抗体的制备，膜蛋白的
关于细胞融合的方法介绍
同种细胞在培养时2个靠在一起的细胞自发合并，称自发融合；异种间的细胞必须经诱导剂处理才能融合，称诱发融合。 一、仙台病毒法融合 ①两种细胞在一起培养，加入病毒，在4℃条件下病毒附着在细胞 膜上。并使两细胞相互凝聚； ②在37℃中，病毒与细胞膜发生反应，细胞膜受到破环，此时需 要Ca2+
细胞融合的具体步骤
（1）细胞准备。分贴壁和悬浮细胞两种，前者可直接将两亲本细胞混合培养，后者需制成一定浓度的细胞悬浮液。（2）细胞融合。加促融因子于将行融合的细胞之中，诱导融合。（3）杂种细胞选择。利用选择性培养基等，使亲本细胞死亡，而让杂种细胞存活。（4）杂种细胞克隆。对选出的杂种细胞进行克隆（选择与纯化），经过培
细胞融合实验的设备材料介绍
超净工作台、二氧化碳恒温培养箱、倒置生物显微镜、离心机、恒温水浴箱、冰箱、细胞混匀器、荧光显微镜或流式细胞仪等。培养器皿及其它：96孔、24孔培养板、培养瓶、离心管、平皿、保温杯、培养液过滤装置、不锈钢网及手术剪刀、镊子等。Balb/c小鼠。SP2/0细胞（骨髓瘤细胞）。
细胞融合实验的主要试剂介绍
（1）胎牛血清或小牛血清 （2）培养基：细胞融合常用的培养液有DMEM、RPMI 1640 及无血清培养基等。DMEM有高糖（4500mg／L）及低糖（1000mg／L）之分。杂交瘤细胞在上述几种培养基中均能良好的生长与增殖 （3）HAT及HT培养液：HAT、HT（sigma）以五十分之一的
关于蓝瓶子实验的实验步骤介绍
1 、锥形瓶中加50mL水，1.5克葡萄糖，逐滴滴入8～10滴0.1%亚甲基蓝，振荡至溶液呈蓝色。 2 、加入2mL30%NaOH溶液，振荡并静置锥形瓶，观察并记录现象。再振荡锥形瓶至溶液变蓝，又静置锥形瓶，连续记录两次振荡周期（NaOH的用量不能太多）。 3 、将溶液分装在两个小试管中，1
关于细胞融合的应用价值介绍
细胞融合不仅可用于基础研究，而且还有重要的应用价值，在植物育种方面已经成功的有萝卜+甘蓝、粉蓝烟草+郎氏烟草、番茄+马铃薯等等。细胞融合另一个重要应用就是制备单克隆抗体。单克隆抗体可以用作诊断试剂，治疗疾病和运载药物，具有准确，高效，简易，快速等优点。
关于细胞融合的发展简史介绍
19世纪30年代，科学家们相继在肺结核，天花，水痘，麻疹等疾病患者的病理组织中观察到多核细胞。 19世纪70年代，科学家们在蛙的血细胞中也看到了多核细胞的现象，但是当时科学发展水平的限制，没有给予足够重视。 1962年，日本科学家发现日本血凝型病毒能引起艾氏腹水瘤细胞融合的现象。 1965
细胞融合实验
实验方法原理细胞融合的诱导物种类很多．常用的主要有灭活的仙台病毒(Sendai virus)，聚乙二醇(Polyethyleneglycol，PEG)和电脉冲。目前应用zui广泛的是聚乙二醇，因为它易得、简便，且融合效果稳定。PEG的促融机制尚不完全清楚，它可能引起细胞膜中磷脂的酰键及极性基团发生结
细胞融合实验
实验概要掌握细胞融合原理、应用融合细胞的方法以及细胞融合率的计算。实验原理细胞融合(Cell fusion)，即在自然条件下或用人工方法(生物的、物理的、化学的)使两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的过程。人工诱导的细胞融合，在六十年代作为一门新兴技术而发展起来。由于它不仅能产生同种细胞融合，也
细胞融合实验的实验原理
根据Burnet的抗体选择学说，一个B淋巴细胞只能产生一种针对它能够识别的特异性抗原决定簇的抗体。从一个祖先B细胞分裂繁殖而形成的纯细胞系称为克隆。来自克隆系的细胞基因是完全相同的，产生的抗体也完全相同。这种从一株克隆系产生的性质相同的均一抗体称为单克隆抗体。但这种具有分泌功能的B淋巴细胞难以在
关于细胞融合的诱导物的介绍
细胞融合的诱导物种类很多．常用的主要有生物法用灭活的仙台病毒(Sendai virus），化学法如用聚乙二醇(Polyethyleneglycol，PEG）和物理法如电脉冲，振动、离心、电激。目前应用最广泛的是聚乙二醇，因为它易得、简便，且融合效果稳定。PEG的促融机制尚不完全清楚，它可能引起细
关于微卫星标记的实验的步骤介绍
1. 客户收集标本(血液或组织等标本)并提取DNA。 2. 设计引物序列并扩增,琼脂糖电泳检测结果。 3. 合成荧光标记引物。 4. 进行PCR扩增,产物通过测序仪器电泳检测, 获得扩增片段大小。 5. 分析测序仪器读出的数据,给结果图谱。
关于细胞融合技术的意义价值介绍
细胞融合不仅可用于基础研究，而且还有重要的应用价值，在植物育种方面已经成功的有萝卜+甘蓝、粉蓝烟草+郎氏烟草、番茄+马铃薯等等。细胞融合另一个重要应用就是制备单克隆抗体。单克隆抗体可以用作诊断试剂，治疗疾病和运载药物，具有准确，高效，简易，快速等优点。 ⒈理论上说任何细胞，都有可能通过体细胞杂
细胞融合实验的实验原理简介
根据Burnet的抗体选择学说，一个B淋巴细胞只能产生一种针对它能够识别的特异性抗原决定簇的抗体。从一个祖先B细胞分裂繁殖而形成的纯细胞系称为克隆。来自克隆系的细胞基因是完全相同的，产生的抗体也完全相同。这种从一株克隆系产生的性质相同的均一抗体称为单克隆抗体。但这种具有分泌功能的B淋巴细胞难以在
细胞融合主要方法和操作步骤
两个或两个以上的细胞合并成一个双核或多核细胞的现象称为细胞融合，也称细胞杂交，在自然情况下的受精过程即属这种现象。诱导细胞融合的主要方法有：病毒诱导融合，化学融合剂诱导融合和电融合。1. 病毒诱导融合：有许多种类的病毒能介导细胞融合，最常用的是灭活的仙台病毒（HVJ），为RNA病毒。病毒诱导细胞
关于口腔上皮细胞的实验步骤介绍
（一）操作过程 用绸布擦净载玻片，滴一滴生理盐水于载玻片中央。用消毒牙签的钝端，在漱净的口腔任意一侧的颊部，轻轻刮几下，把牙签上附有口腔壁碎屑的一端，放在载玻片上的氯化钠溶液中涂几下，盖上盖玻片。在盖玻片的一侧加染液1～2滴（任一染液均可），用滤纸从盖玻片的另一侧吸引染液，使染液浸润到标本的全
关于明胶酶谱法的实验步骤介绍
1、明胶酶谱法实验步骤：取对数期的癌细胞在的无血清培养基DMEM中培养24h。 2、明胶酶谱法实验步骤：次日收集上清液，将上清液移入离心管中 2000rpm 离心10min，-70℃储存备用。 3、明胶酶谱法实验步骤：根据细胞计数调整各组细胞培养上清液中的蛋白浓度（或者测定蛋白浓度调整使所上
体细胞融合实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 PEG-1000仪器、耗材 培养基实验步骤 1. 以适当的培养基培养细胞至接近汇合成片的密度（80% 汇合率）。2. 吸干 60 mm 规格平皿或 T-25 培养瓶中的培养基，加 2 ml 50% PEG-1000，轻轻转动 1 分钟让该粘稠液体覆盖所有细胞。3. 往培养
体细胞融合实验
单层培养细胞的融合 悬浮培养细胞的融合 实验材料 细胞 试剂、试
体细胞融合实验
单层培养细胞的融合 悬浮培养细胞的融合 实验材料 细胞 试剂、试
细胞融合的介绍
细胞融合(cell fusion)，细胞遗传学名词，是在自发或人工诱导下，两个细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。基本过程包括细胞融合形成异核体(heterokaryon)、异核体通过细胞有丝分裂进行核融合、最终形成单核的杂种细胞。细胞融合可作为一种实验方法被广泛适用于单克隆抗体的制备，膜蛋白的
细胞融合技术的实验操作
人、鼠细胞融合实验分三步进行∶首先用荧光染料标记抗体∶将小鼠的抗体与发绿色荧光的荧光素（fluorescin）结合，人的抗体与发红色荧光的罗丹明（rhodamine）结合；第二步是将小鼠细胞和人细胞在灭活的仙台病毒的诱导下进行融合；最后一步将标记的抗体加入到融合的人、鼠细胞中，让这些标记抗体同融合细
简述细胞融合的实验操作
人、鼠细胞融合实验分三步进行∶首先用荧光染料标记抗体∶将小鼠的抗体与发绿色荧光的荧光素（fluorescin）结合，人的抗体与发红色荧光的罗丹明（rhodamine）结合；第二步是将小鼠细胞和人细胞在灭活的仙台病毒的诱导下进行融合；最后一步将标记的抗体加入到融合的人、鼠细胞中，让这些标记抗体同融
关于PI单染色法的实验步骤介绍
1、PI单染色法— 收集细胞{数目约（1~ 5）×106个/mL}，500 ~ 1000 r/min离心5min，弃去培养液。 2、PI单染色法— 3ml PBS洗涤1次。 3、PI单染色法— 离心去PBS，加入冰预冷的70%的乙醇固定，4℃，1—2小时。 4、PI单染色法— 离心弃去固定
关于火箭免疫电泳的实验操作步骤介绍
1、抗原、抗体浓度的选择 以分别固定抗原含量与抗体浓度的方法，选取最小抗原量与最低抗体浓度，在免疫电泳后能出现最清晰项端狭窄且尖的锥形沉淀峰，长达2～5cm者为标准。一般抗原用量为0.5～5微克，抗血清用量为5～10微升，稀释度于1：10～1：200之间进行选择。 2、预复琼脂玻板的制备