细胞融合实验的主要试剂介绍

(1)胎牛血清或小牛血清 (2)培养基:细胞融合常用的培养液有DMEM、RPMI 1640 及无血清培养基等。DMEM有高糖(4500mg/L)及低糖(1000mg/L)之分。杂交瘤细胞在上述几种培养基中均能良好的生长与增殖 (3)HAT及HT培养液:HAT、HT(sigma)以五十分之一的比例加入培养基( DMEM或RPMI 1640) (4)聚乙二醇(PEG)溶液:称取一定量的PEG,高压蒸汽灭菌(8磅30分钟),待其冷至50℃左右,与等体积的RPMI1640混合,即为50%的PEG溶液,封口后4℃放置备用。用于细胞融合的PEG的分子量可在1000-6000之间,目前已有商品化的50%PEG溶液(美国 sigma 公司)可直接用于细胞融合......阅读全文

细胞融合实验的主要试剂介绍

  (1)胎牛血清或小牛血清  (2)培养基:细胞融合常用的培养液有DMEM、RPMI 1640 及无血清培养基等。DMEM有高糖(4500mg/L)及低糖(1000mg/L)之分。杂交瘤细胞在上述几种培养基中均能良好的生长与增殖  (3)HAT及HT培养液:HAT、HT(sigma)以五十分之一的

关于细胞融合实验的主要试剂的介绍

  (1)胎牛血清或小牛血清  (2)培养基:细胞融合常用的培养液有DMEM、RPMI 1640 及无血清培养基等。DMEM有高糖(4500mg/L)及低糖(1000mg/L)之分。杂交瘤细胞在上述几种培养基中均能良好的生长与增殖  (3)HAT及HT培养液:HAT、HT(sigma)以五十分之一的

细胞融合实验的实验步骤介绍

  1. DMEM或1640基础培养基、PEG溶液置于37℃水浴中预温;  2. 将Balb/c小鼠摘眼球处死后,浸入75%洒精;  3. 无菌取免疫小鼠的脾脏;  4. 脾脏用PBS洗涤后,放入无菌过滤的网筛,再把网筛放在盛有完全培养基的玻璃平皿中用研磨棒(或注射器针管)轻轻研磨或挤压,使其通过网

细胞融合实验的设备材料介绍

  超净工作台、二氧化碳恒温培养箱、倒置生物显微镜、离心机、恒温水浴箱、冰箱、细胞混匀器、荧光显微镜或流式细胞仪等。培养器皿及其它:96孔、24孔培养板、培养瓶、离心管、平皿、保温杯、培养液过滤装置、不锈钢网及手术剪刀、镊子等。Balb/c小鼠。SP2/0细胞(骨髓瘤细胞)。

关于细胞融合实验的步骤介绍

  1. DMEM或1640基础培养基、PEG溶液置于37℃水浴中预温;  2. 将Balb/c小鼠摘眼球处死后,浸入75%洒精;  3. 无菌取免疫小鼠的脾脏;  4. 脾脏用PBS洗涤后,放入无菌过滤的网筛,再把网筛放在盛有完全培养基的玻璃平皿中用研磨棒(或注射器针管)轻轻研磨或挤压,使其通过网

细胞融合实验

实验方法原理细胞融合的诱导物种类很多.常用的主要有灭活的仙台病毒(Sendai virus),聚乙二醇(Polyethyleneglycol,PEG)和电脉冲。目前应用zui广泛的是聚乙二醇,因为它易得、简便,且融合效果稳定。PEG的促融机制尚不完全清楚,它可能引起细胞膜中磷脂的酰键及极性基团发生结

细胞融合实验

实验概要掌握细胞融合原理、应用融合细胞的方法以及细胞融合率的计算。实验原理细胞融合(Cell  fusion),即在自然条件下或用人工方法(生物的、物理的、化学的)使两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的过程。人工诱导的细胞融合,在六十年代作为一门新兴技术而发展起来。由于它不仅能产生同种细胞融合,也

细胞融合实验的实验原理

  根据Burnet的抗体选择学说,一个B淋巴细胞只能产生一种针对它能够识别的特异性抗原决定簇的抗体。从一个祖先B细胞分裂繁殖而形成的纯细胞系称为克隆。来自克隆系的细胞基因是完全相同的,产生的抗体也完全相同。这种从一株克隆系产生的性质相同的均一抗体称为单克隆抗体。但这种具有分泌功能的B淋巴细胞难以在

动物细胞融合的主要方法

动物细胞融合的主要方法病毒法;聚乙二醇法;电融合法。相关内容:诱导动物细胞融合的方法有:物理法(离心、振动)、化学法(聚乙二醇)、生物法(灭活的病毒)。诱导植物原生质体融合的方法可分为物理法和化学法。(1)植物体细胞杂交技术中,诱导原生质体融合的方法基本分为两类,物理法和化学法,物理法包括离心、振动

细胞融合实验的实验原理简介

  根据Burnet的抗体选择学说,一个B淋巴细胞只能产生一种针对它能够识别的特异性抗原决定簇的抗体。从一个祖先B细胞分裂繁殖而形成的纯细胞系称为克隆。来自克隆系的细胞基因是完全相同的,产生的抗体也完全相同。这种从一株克隆系产生的性质相同的均一抗体称为单克隆抗体。但这种具有分泌功能的B淋巴细胞难以在

体细胞融合实验

实验材料 细胞试剂、试剂盒 PEG-1000仪器、耗材 培养基实验步骤 1. 以适当的培养基培养细胞至接近汇合成片的密度(80% 汇合率)。2. 吸干 60 mm 规格平皿或 T-25 培养瓶中的培养基,加 2 ml 50% PEG-1000,轻轻转动 1 分钟让该粘稠液体覆盖所有细胞。3. 往培养

体细胞融合实验

单层培养细胞的融合 悬浮培养细胞的融合             实验材料 细胞 试剂、试

体细胞融合实验

单层培养细胞的融合 悬浮培养细胞的融合             实验材料 细胞 试剂、试

实验室试剂重水的主要作用

重水的主要用途是在核反应堆中做“减速剂”,减小中子速度,控制核裂变过程,也是冷却剂。重水和氘在研究化学和生理变化中是一种宝贵的示踪材料,例如,用稀重水灌溉树木,可以测知水在这些植物中每小时可运行十几米到几十米。测定饮过大量稀重水的人尿中的氘含量,知道水分子在人体中停留时间平均为14天。用氘代替普通氢

细胞融合仪的主要技术参数

  交流电场参数  方波成串脉冲电压:峰一峰值 0-48V(0-±24V),连续可调。  方波成串脉部频率:30KHZ-3MHZSK可调  直流电场参数  方波融合脉冲电压:0-600V连续可调(电极间距)1.0mm时场强可达6000V/cm.  方波融合脉冲幅度:1us-5ms分十档可任选  随机

细胞融合的介绍

  细胞融合(cell fusion),细胞遗传学名词,是在自发或人工诱导下,两个细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。基本过程包括细胞融合形成异核体(heterokaryon)、异核体通过细胞有丝分裂进行核融合、最终形成单核的杂种细胞。细胞融合可作为一种实验方法被广泛适用于单克隆抗体的制备,膜蛋白的

简述细胞融合的实验操作

  人、鼠细胞融合实验分三步进行∶首先用荧光染料标记抗体∶将小鼠的抗体与发绿色荧光的荧光素(fluorescin)结合,人的抗体与发红色荧光的罗丹明(rhodamine)结合;第二步是将小鼠细胞和人细胞在灭活的仙台病毒的诱导下进行融合;最后一步将标记的抗体加入到融合的人、鼠细胞中,让这些标记抗体同融

细胞融合技术的实验操作

人、鼠细胞融合实验分三步进行∶首先用荧光染料标记抗体∶将小鼠的抗体与发绿色荧光的荧光素(fluorescin)结合,人的抗体与发红色荧光的罗丹明(rhodamine)结合;第二步是将小鼠细胞和人细胞在灭活的仙台病毒的诱导下进行融合;最后一步将标记的抗体加入到融合的人、鼠细胞中,让这些标记抗体同融合细

细胞融合主要方法和操作步骤

两个或两个以上的细胞合并成一个双核或多核细胞的现象称为细胞融合,也称细胞杂交,在自然情况下的受精过程即属这种现象。诱导细胞融合的主要方法有:病毒诱导融合,化学融合剂诱导融合和电融合。1. 病毒诱导融合:有许多种类的病毒能介导细胞融合,最常用的是灭活的仙台病毒(HVJ),为RNA病毒。病毒诱导细胞

动物细胞融合实验

一、实验目的细胞融合是指两个或两个以上的细胞合并成为一个细胞的过程。在自然情况下,体内和体外培养的细胞均能发生自发融合现象。人工方法诱导细胞融合开始于50年,现在这项技术已成为研究细胞遗传、细胞免疫,肿瘤及细胞工程的重要手段。通过实验,了解细胞融合的原理,掌握细胞融合的基本方法。二、实验原理在诱导物

动物细胞融合实验

细胞融合是指两个或两个以上的细胞合并成为一个细胞的过程。在自然情况下,体内和体外培养的细胞均能发生自发融合现象。人工方法诱导细胞融合开始于50 年,现在这项技术已成为研究细胞遗传、细胞免疫,肿瘤及细胞工程的重要手段。在诱导物(如仙台病毒,聚乙二醇)作用下,相互融合的细胞发生凝集,随后在质膜接

细胞融合的方法介绍

细胞融合的方法有物理法,如电融合、激光融合,化学融合法和生物融合法,如灭活的仙台病毒,此处例举化学融合法中的一种即聚乙二醇融合法。

细胞融合仪的介绍

  细胞融合(cell fusion),细胞遗传学名词,是在自发或人工诱导下,两个不同基因型的细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。基本过程包括细胞融合形成异核体(heterokaryon)、异核体通过细胞有丝分裂进行核融合、zui终形成单核的杂种细胞。细胞融合可作为一种实验方法被广泛适用于单克隆抗体

细胞融合的方法介绍

细胞融合的方法动物细胞杂交或细胞融合  将两个不同种的亲本细胞A和B,以灭活的仙台病毒或聚乙二醇(PEG)为融合诱导剂,使A和B两细胞融合成为一个具两个遗传性不同核的异核体(如遗传性相同的核融合在一起叫同核体)。随后异核体经有丝分裂成为两个具有A和B两亲本的杂种融合核。AB杂种经多次分裂,B亲本的染

细胞融合的过程介绍

融合的方法很多,常用的有转动法和离心法。融合时脾细胞和骨髓瘤细胞的比例为1:1至10:1不等。3:1或5:1最为常用。1.试剂与材料(1)供融合用的脾细胞及骨髓瘤细胞。(2)1640培养液100ml。(3)完全1640液100ml。(4)2.5%FCS-1640液50ml。(5)HAT培养液100m

细胞融合仪的介绍

细胞融合仪的介绍细胞融合(cell fusion),细胞遗传学名词,是在自发或人工诱导下,两个不同基因型的细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。基本过程包括细胞融合形成异核体(heterokaryon)、异核体通过细胞有丝分裂进行核融合、最终形成单核的杂种细胞。细胞融合可作为一种实验方法被广泛适用于单

细胞融合仪的介绍

   细胞融合(cell fusion),细胞遗传学名词,是在自发或人工诱导下,两个不同基因型的细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。基本过程包括细胞融合形成异核体(heterokaryon)、异核体通过细胞有丝分裂进行核融合、zui终形成单核的杂种细胞。细胞融合可作为一种实验方法被广泛适用于单克隆抗

细胞融合的基本介绍

细胞融合(cell fusion),细胞遗传学名词,是在自发或人工诱导下,两个细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。基本过程包括细胞融合形成异核体(heterokaryon)、异核体通过细胞有丝分裂进行核融合、最终形成单核的杂种细胞。细胞融合可作为一种实验方法被广泛适用于单克隆抗体的制备,膜蛋白的研究

细胞融合的实验操作方法

(以人鼠细胞杂交为例)人、鼠细胞融合实验分三步进行∶首先用荧光染料标记抗体∶将小鼠的抗体与发绿色荧光的荧光素(fluorescin)结合,人的抗体与发红色荧光的罗丹明(rhodamine)结合;第二步是将小鼠细胞和人细胞在灭活的仙台病毒的诱导下进行融合;最后一步将标记的抗体加入到融合的人、鼠细胞中,

细胞融合实验的注意事项

  1、整个制备过程需严格无菌及温度控制。  2、细胞传代培养时注意适时更换培养液。  3、SP2/0细胞与脾细胞比例需严格控制,这决定了融合率。  4、融合细胞因细胞膜受损而特别脆弱,操作过程需温和小心。  5、融合剂PEG的加入时间需准确把握,避免融合失败。