外显子捕获的操作步骤
(1)基因组DNA经“霰弹法”切成小片段后，克隆在位于“外显子捕获序列”下游的克隆位点上。(2)将这些重组载体汇总后感染反转录病毒的专宿包装细胞系(ecotropicretroviral packaging cell line)——ψ2细胞系。ψ2细胞提供蛋白质产物使载体(自身不能合成病毒蛋白质)成为反转录病毒在细胞里增殖。当反转录病毒在细胞内转录时，如果插入片段中包含有功能的SA位点，则有可能发生RNA剪接反应而将IVS切除。(3)已剪接和未剪接的病毒RNA都包装在病毒子(virion)中，从细胞培养液中收集后用来感染兼宿反转录病毒包装细胞系(amphotropic retroviral packagingcell line)PA-317。这使反转录病毒再进行一轮复制，并产生能感染猴肾细胞系COS细胞的高效价病毒原种。这样做是由于上一轮克隆在病毒中的插入片段的剪接效率极低，而在第二轮复制时则大大提高了RNA剪接的机会。(4)从......阅读全文
外显子捕获的操作步骤
(1)基因组DNA经“霰弹法”切成小片段后，克隆在位于“外显子捕获序列”下游的克隆位点上。(2)将这些重组载体汇总后感染反转录病毒的专宿包装细胞系(ecotropicretroviral packaging cell line)——ψ2细胞系。ψ2细胞提供蛋白质产物使载体(自身不能合成病毒蛋白质)成
外显子捕获的操作步骤
(1)基因组DNA经“霰弹法”切成小片段后，克隆在位于“外显子捕获序列”下游的克隆位点上。(2)将这些重组载体汇总后感染反转录病毒的专宿包装细胞系(ecotropicretroviral packaging cell line)——ψ2细胞系。ψ2细胞提供蛋白质产物使载体(自身不能合成病毒蛋白质)成
关于外显子捕获的操作步骤介绍
(1)基因组DNA经“霰弹法”切成小片段后，克隆在位于“外显子捕获序列”下游的克隆位点上。 (2)将这些重组载体汇总后感染反转录病毒的专宿包装细胞系(ecotropicretroviral packaging cell line)——ψ2细胞系。ψ2细胞提供蛋白质产物使载体(自身不能合成病毒蛋
外显子的操作步骤介绍
⑴基因组DNA经“霰弹法”切成小片段后,克隆在位于“外显子捕捉序列”下游的克隆位点上。 ⑵将这些重组载体汇总后感染反转录病毒的专宿包装细胞系（ecotropicretroviralpackagingcellline）——ψ2细胞系。ψ2细胞提供蛋白质产物使载体（自身不能合成病毒蛋白质）成为反转
捕获法测定抗原的操作步骤
血清中针对某些抗原的特异性IgM常和特异性IgG同时存在，后者会干扰IgM抗体的测定。因此测定IgM抗体多用捕获法，先将所有血清IgM（包括异性IgM和非特异性IgM）固定在固相上，在去除IgG后再测定特异性IgM。操作步骤如下：⑴将抗人IgM抗体连接在固相载体上，形成固相抗人IgM。洗涤。⑵加入稀
外显子捕获与扩增
实验材料 大肠杆菌菌株 HB101 质粒 pSPL3 COS-7 细胞 载体 pBluescriptⅡ 大肠杆菌 DH5α
关于外显子捕获的简介
外显子捕获(exon trapping) 是构建一种载体，从其插入片段中识别和回收外显子序列，从而克隆目的基因。捕获外显子的载体pETV—SD是一种反转录病毒穿梭载体，即可在不同种生物中如大肠杆菌和酵母，细菌和哺乳动物细胞等进行复制的载体。因为凡是有内含子和外显子的基因在转录后都要经过RNA剪接
外显子捕获与扩增（三）
凝胶琼脂糖凝胶（1.5%m/V), 用 TBE 配制核酸与寡核苷酸寡核苷酸引物 [20 mmol/L,TE(pH8.0) 配制]分别提取自转染有对照载体和重组载体的 COS-7 细胞的 RNA(阶段 3)。培养基含 50ug/ml 氨苄青霉素的 LB 琼脂平板专用设备自动微量加样器所用的加样器尖头微
外显子捕获与扩增1
本方案以哺乳动物穿梭载体 pSPL3 为例，描述了外显子扩增的方法，内容分为以下五个阶段。阶段 1: 文库的构建; 阶段 2: 电穿孔法将文库转染 COS-7 细胞; 阶段 3:mRNA 的提取; 阶段 4: 反转录 PCR; 阶段 5: 克隆分析。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）上册，作者：
外显子捕获与扩增（二）
材料缓冲液与溶液按合适比例稀释贮存液。无二价阳离子的磷酸缓冲液（PBS）酶及缓冲液胰酶-EDTA 溶液核酸与寡核苷酸DNA用于转染的质粒 DNA 制备见本方案阶段 1, 步骤 10~12。用作对照的质粒载体（步骤 3)培养基含 10% 热灭活胎牛血清的 Dulbecco's modified
外显子捕获与扩增2
阶段 3:mRNA 的提取材料缓冲液与溶液按合适比例稀释贮存液。DEPC 处理水乙醇NaCl(5mol/L)酚酚：氯仿无二价阳离子的磷酸缓冲液（PBS)SDS(5%m/V)TMK 缓冲液10 mmol/LTris-HCl(pH7.5)10 mmol/LKCl1 mmol/LMgCl2Triton X
外显子捕获与扩增（一）
实验材料 大肠杆菌菌株 HB101 质粒 pSPL3COS-7 细胞载体 pBluescriptⅡ大肠杆菌 DH5α试剂、试剂盒 pSPL3 多克隆位点图谱限制性内切核酸酶PvuⅡT4DNA 连接酶LB 琼脂平板黏粒载体TESOC 培养基琼脂糖凝胶LB 肉汤培养基PBS胰酶-EDTA 溶液D
外显子捕获的概念和方法
外显子捕获(exon trapping) 是构建一种载体，从其插入片段中识别和回收外显子序列，从而克隆目的基因。捕获外显子的载体pETV—SD是一种反转录病毒穿梭载体，即可在不同种生物中如大肠杆菌和酵母，细菌和哺乳动物细胞等进行复制的载体。因为凡是有内含子和外显子的基因在转录后都要经过RNA剪接，这
概述外显子捕捉的操作步骤及原理
(1)基因组DNA经“霰弹法”切成小片段后,克隆在位于“外显子捕捉序列”下游的克隆位点上。 (2)将这些重组载体汇总后感染反转录病毒的专宿包装细胞系(ecotropicretroviral packaging cell line)——ψ2细胞系。ψ2细胞提供蛋白质产物使载体(自身不能合成病毒蛋
分子遗传学词汇外显子捕获
中文名称：外显子捕获外文名称：exon trapping定义：外显子捕获(exon trapping) 是构建一种载体，从其插入片段中识别和回收外显子序列，从而克隆目的基因。捕获外显子的载体pETV—SD是一种反转录病毒穿梭载体，即可在不同种生物中如大肠杆菌和酵母，细菌和哺乳动物细胞等进行复制的载体
外显子捕捉的操作步骤及其基本原理
⑴基因组DNA经“霰弹法”切成小片段后,克隆在位于“外显子捕捉序列”下游的克隆位点上。⑵将这些重组载体汇总后感染反转录病毒的专宿包装细胞系(ecotropicretroviralpackagingcellline)——ψ2细胞系。ψ2细胞提供蛋白质产物使载体(自身不能合成病毒蛋白质)成为反转录病毒在
捕获法酶联免疫吸附测定的原理和操作步骤
血清中针对某些抗原的特异性IgM常和特异性IgG同时存在，后者会干扰IgM抗体的测定。因此测定IgM抗体多用捕获法，先将所有血清IgM（包括异性IgM和非特异性IgM）固定在固相上，在去除IgG后再测定特异性IgM。操作步骤如下：⑴将抗人IgM抗体连接在固相载体上，形成固相抗人IgM。洗涤。⑵加入稀
安捷伦推出全新SureSelect人全外显子UTR捕获试剂
超乎寻常的效率;为次日测序准备好外显子样品 2012年11月8日，加利福尼亚州圣克拉拉市 ― 安捷伦科技公司(纽约证交所：A)11月8日宣布推出新一代靶向序列捕获测序产品 SureSelect 人全外显子 V5 以及 V5 + UTR。做为此项技术的发起机构，新型的全外显子捕获解决方案
NimbleGen大麦外显子组捕获快速定位多节矮秆突变基因
在农业生产中，性状相关的基因定位对于科学育种十分重要，传统的遗传重组定位具有指导意义和实用价值，但传统方法周期长、耗费大。随着二代测序的发展，DNA测序速度大大加快、成本大大降低，使得通过测序法进行的基因定位（mapping-by-sequencing）成为越来越多动植物研究的主要手段。对合适的样本
噪音计操作步骤及操作步骤
噪音计-操作步骤 1、打开噪音计携带箱，取出噪音计，套上传感器。 2、将噪音计置于A状态，检测电池，然后校准噪音计。 3、对照常见的环境声级大小表，调节仪器的测量量程。 4、测量：可以用快（测量声压级变化较大的环境的瞬时值）、慢（测量声压级变化不大的环境中的平均值）、脉冲（测量脉冲声源）
安捷伦推出首款商业化测序外显子靶向序列捕获试剂盒
安捷伦科技针对模式生物，推出世界首款 商业化下一代测序外显子靶向序列捕获试剂盒 2011 年 1 月 19 日，北京——安捷伦科技公司（纽约证交所：A）今日推出 ，这是全球首款可用于模式生物外显子靶向序列捕获的商业化系统，用以简化下一代测序实验。 日本 RIKEN
球磨机的运转步骤及操作步骤
运转步骤 要想提高球磨机的产量不仅要从工艺因素、机械因素做起，同时也要保证对球磨机进行有效的管理和控制！管理的主要目的是防止带病运转状态的发生及消除，实现设备精细运转，以低电耗、球耗实现高质量、高台生产。 实现精细运转的步骤：合理的生产指标是指操作的目标，指标必须确定上下限范围；正确的操作参
球磨机的操作步骤
1、在开启设备之前，我们首先需要检查一下各机械零件之间的润滑情况，在确定所有准备工作已经完善之后，先启动球磨机的排出装置、球磨机总电源、最后启动进料装置。 2、在物料进入箱体之内，首先需要检查一下安装在箱体内的钢板球体是否设置好了，数量是否合适。 3、开启球磨机之后，必须先要对其进行空箱试转
球磨机的操作步骤
1、在开启设备之前，我们首先需要检查一下各机械零件之间的润滑情况，在确定所有准备工作已经完善之后，先启动球磨机的排出装置、球磨机总电源、最后启动进料装置。 2、在物料进入箱体之内，首先需要检查一下安装在箱体内的钢板球体是否设置好了，数量是否合适。 3、开启球磨机之后，必须先要对其进行空箱试转，
测厚仪的操作步骤
上电→设置测量参数→进入测试界面→放置待测薄膜→启动测量→测量结束→打印输出 测量结果→试验结束 注：本测量仪有记忆功能，若下次测量参数与上次相同，可直接进入测量，无须再进行参数设置。
滴定的操作步骤
1、滴定管主要是由酸式滴定管还有碱式滴定管组成的，将滴定管洗净后，在管内装满水，关紧旋钮后直立，检查它是否漏水。2、然后需要用滴定液对滴定管进行润滑和清洗，清洗以后将滴定液装管内的零刻度以上。3、还要检查滴定管内有没有气泡，要是有的话就要调节滴定开关，将气泡放出来，读出最初滴定液的体积。4、最后还要
单克隆抗体捕获步骤工艺开发的快速入门（一）
在单克隆抗体纯化中，为了获得所需高质量的抗体，一般使用两步或三步层析步骤。通常，用于三步工艺的层析介质为Protein A→阳离子交换→阴离子交换；用于两步工艺的层析介质为Protein A→Capto adhere（多模式离子交换）。所有的单克隆抗体（Mabs）都有一些相似的特性，所以可以
单克隆抗体捕获步骤工艺开发的快速入门（二）
基本的简化工艺开发 上样准备-样品在上样到MabSelect SuRe层析柱前必须经过过滤。至少必须使用无菌过滤器；另外，在无菌过滤前可以使用吸附深度过滤器。在细胞培养物收获后，应该尽快完成运行。在细胞培养物运行前需要被保存的情况，应该经过无菌过滤并保存在4℃，或者冷冻保存（如可能）。 Run #0
ELISA操作步骤
酶联免疫吸附实验材料，试剂，溶液1．酶标板，100μltip头，1ml Ep管，湿盒2．包被稀释液（0.05mol/L碳酸钠-碳酸氢钠buffer,pH 9.6）碳酸钠0.15g,碳酸氢钠0.29g,叠氮钠0.02g,加双蒸水至100ml,调至pH 9.63. 封闭液(5%小牛血清/PBS溶液)小牛
xrd操作步骤
样品准备：样品在实验前应磨成平滑去氧化的表面，并用酒精清洗，若用样品是粉末，均匀平铺粘在胶布上。设备的操作步骤如下：1.开实验室电源，包括实验室总电源，三相电源，仪器电源及冷却循环水电源等。2.打开控制软件：打开计算机，打开桌面的“XG Operation” , 进入“XG control RINT