体内耐药细胞株的建立实验
实验方法原理 细胞与低剂量的药物长期接触，引起细胞本身药物化学过程的改变，细胞膜上出现Pgp糖蛋白，使细胞逐渐对药物耐受，随着药物浓度的递增，其耐受程度逐渐加强。实验材料 小鼠瘤株试剂、试剂盒 肝素生理盐水仪器、耗材 离心机实验步骤 一、材料准备1. 动物选择：根据欲建立的耐药细胞株，选择合适的动物。在实验期间，一般选择同性别动物进行实验，动物体重的选择以雌性约17~21 g，雄性约18~22 g 为宜。2. 瘤株的选择：常见的瘤株均可，应依据研究目的、方向确定实验用瘤株，考虑到传代方便，且容易观察或检测，多选择腹水性肿瘤。二、实验步骤1. 所试药物的毒性测定（1）把小鼠随机分成5~8组，每组10~20只小鼠，每只动物每天给予定量的药物，每天1次，连续给药5天，然后观察30天。（2）记录30天内动物的死亡数。药物的剂量应能使动物的死亡率从0~100%。（3）计算LD10及95%的可信限，耐药株......阅读全文
体内耐药细胞株的建立实验
实验方法原理 细胞与低剂量的药物长期接触，引起细胞本身药物化学过程的改变，细胞膜上出现Pgp糖蛋白，使细胞逐渐对药物耐受，随着药物浓度的递增，其耐受程度逐渐加强。实验材料 小鼠瘤株试剂、试剂盒 肝素生理盐水仪器、耗材 离心机实验步骤 一、材料准备1. 动物选择：根据欲建立的耐药细胞株，选择合适的动
体内耐药细胞株的建立实验
体内耐药细胞株的建立实验是通过细胞与低剂量的药物长期接触，引起细胞本身生物化学过程的改变，细胞膜上出现Pgp（或P-170）糖蛋白，使细胞逐渐对药物耐受。实验方法原理细胞与低剂量的药物长期接触，引起细胞本身药物化学过程的改变，细胞膜上出现Pgp糖蛋白，使细胞逐渐对药物耐受，随着药物浓度的递增，其耐受
如何构建耐药细胞株？
肿瘤细胞对化疗药物产生耐药性是肿瘤治疗失败的重要因素之一，成为目前阻碍肿瘤治疗的绊脚石。因此，探索肿瘤细胞产生耐药的原因以及如何改善肿瘤细胞对化疗药物耐药仍是目前研究的热点和难点。肿瘤细胞耐药的产生是一个复杂的过程，它的机制广泛牵涉到药物代谢学、病理学、生理学等多个学科，这就决定了肿瘤细胞对化疗药物
人乳腺癌阿霉素耐药细胞株细胞特性
人乳腺癌阿霉素耐药细胞株细胞特性:1)组织来源于实验动物的眼球。2)细胞鉴定：广谱角蛋白(PCK)免疫荧光染色为阳性。3)经鉴定细胞纯度高于90%。4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。5)细胞生长方式：扁平的椭圆形、梭形或不规则形，不规则细胞，贴壁培养。运输和保存：视
人乳腺癌阿霉素耐药细胞株检测步骤
人乳腺癌阿霉素耐药细胞株检测步骤：1. 将凋亡细胞裂解后高速离心，其上清液中含有核小体2. 在微定量板上吸附组蛋白体3. 加上清夜使抗组蛋白抗体与核小体上的组蛋白结合4. 加辣过氧化物酶标记的抗DNA抗体使之与核小体上的DNA结合5. 加酶的底物，测光吸收制检测原理：细胞发生凋亡或坏
苍蝇体内竟发现耐药细菌，或许促进了耐药菌的传播
医院获得性感染非常常见，对已经因另一种疾病而虚弱的患者构成严重风险。虽然医院采取了一些措施来避免这类感染，但有一件事他们经常忽略：昆虫。 科学家们以前也研究过医院里的昆虫问题，但研究主要集中在能在医院里繁殖的昆虫上，比如蚂蚁和蟑螂。一项最新研究表明，我们应该更担心飞虫，因为研究人员发现困在英国
microRNA－芯片联合应用探究胃癌细胞株原发性耐药分子机制
microRNA 芯片与表达谱芯片的联合应用——探究胃癌细胞株的原发性耐药的分子机制 药物耐受是肿瘤治疗领域的一大难题，一般分为两种类型：其一为原发性耐药，即先前未经治疗的肿瘤细胞天生就对某种药物不敏感；其二是获得性耐药，指经过治疗的肿瘤细胞再次接受该药物治疗时变得不敏感。 目前，
研究显示母乳喂养可减少婴儿体内耐药细菌
据美国合众国际社10月20日报道，近日，来自芬兰赫尔辛基大学的研究团队在《自然•通讯》期刊上发表论文称，母乳喂养至少6个月可减少婴儿体内的耐抗生素细菌。 研究说，由于婴儿免疫系统薄弱，每年全球有超过20万新生儿因出现由于耐抗生素细菌导致的感染而死亡。研究团队发现，相比于母乳喂养时间较短或未接
人白血病耐药细胞株传代培养及注意事项
人白血病耐药细胞株安全性：所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。收到细胞后，在倒置镜下zui好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。具体步骤如下：(一)如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放
体内谷胱甘肽动态平衡与肝癌耐药研究方面取得进展
肿瘤耐药是导致肿瘤治疗效果差、预后不良的重要因素，是肿瘤治疗中亟待解决的严峻问题之一。造成肿瘤耐药的机制较为复杂，研究表明，肿瘤组织中高水平的还原性谷胱甘肽（GSH）是造成抗肿瘤药物耐药的重要原因。 科研人员在研究中发现，谷胱甘肽可以通过中和化疗产生的氧化应激，修复DNA损伤，参与化疗药物的外
细胞株的概念
通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株（Cell Strain）。
细胞株的保存
1. 紫外消毒30min后关闭紫外灯，开启超净台正常工作状态，用酒精消毒操作者的双手。2. 将所需的培养基，胰酶确保瓶身干净后放于工作台面内，点燃酒精灯，将培养基和胰酶瓶口用酒精棉球擦拭后，再将瓶口对准在酒精灯上消毒2-3次，旋开瓶盖后再次分别消毒瓶口和瓶盖，分别放于酒精灯的两侧。特别是将培养基瓶放
如何保存细胞株？
1. 紫外消毒30min后关闭紫外灯，开启超净台正常工作状态，用酒精消毒操作者的双手。 2. 将所需的培养基，胰酶确保瓶身干净后放于工作台面内，点燃酒精灯，将培养基和胰酶瓶口用酒精棉球擦拭后，再将瓶口对准在酒精灯上消毒2-3次，旋开瓶盖后再次分别消毒瓶口和瓶盖，分别放于酒精灯的两侧。
细胞株的概念
细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。原代培养物经首次传代成功后即为细胞系(cell line)， 由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代，或传代次数有限， 可称为有限细胞系(finite cel
稳定细胞株构建
稳转细胞系（稳定表达细胞株）指在细胞中持续稳定表达特定基因或干扰特定基因表达。稳转细胞株的目的基因质粒DNA整合到细胞染色体上，使细胞长期稳定表达该基因。稳转细胞株包括多克隆稳转细胞株和单克隆稳转细胞株。慢病毒感染目的细胞后，通过抗性基因筛选得到的细胞株是多个细胞克隆的组合。单克隆细胞株是从多克隆细
细胞株的保存方法
1. 紫外消毒30min后关闭紫外灯，开启超净台正常工作状态，用酒精消毒操作者的双手。2. 将所需的培养基，胰酶确保瓶身干净后放于工作台面内，点燃酒精灯，将培养基和胰酶瓶口用酒精棉球擦拭后，再将瓶口对准在酒精灯上消毒2-3次，旋开瓶盖后再次分别消毒瓶口和瓶盖，分别放于酒精灯的两侧。特别是将培养基瓶放
泰素帝的药理毒理
在体内试验中，对小鼠的结肠癌、乳腺癌、肺癌、卵巢肿瘤移植物等有效。对顺铂、足叶乙苷、5Fu、或紫杉醇耐药的细胞株，本品不产生交叉耐药。
抗肿瘤药物研究及新药筛选（四）
三、抗肿瘤药物筛选及评价 以国立肿瘤研究所（Nationai Cancel Institute NCI)为代表的美国抗肿瘤药物筛选模式经历了三个发展阶段。• 1955-1985年，以动物移植性肿瘤为基本模型，以动物生命延长率和瘤重抑制率为药物活性的基本评价指标，此阶段是以化合物为本位的体内筛选方
什么是多耐药、泛耐药和全耐药？
“多耐药”是multi-drug resistant的中文翻译，简称“MDR”，指细菌对3类或3类以上的常用抗菌药同时耐药，有时也叫多重耐药。目前临床常见病原菌几乎都是多耐药菌。“泛耐药”是extensively drug resistant的中文翻译，简称“XDR”，指细菌对常用抗菌药几乎全部（除
细胞株的基本信息
细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。原代培养物经首次传代成功后即为细胞系(cell line)，由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代，或传代次数有限，可称为有限细胞系(finite cell li
细胞株的概念和特性
通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株（Cell Strain）。
稳定转染细胞株的构建
1. 2 稳定转染细胞株的构建原理：稳定转染，就是转染的质粒DNA整合到宿主细胞染色体上，使宿主细胞可长期表达目的基因及蛋白。需要在瞬时转染基础上对靶细胞进行筛选或者应用高转染效率的病毒，根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物进行细胞传代，从而得到可稳定表达目的基因的细胞系。应用：
细胞株的传代与培养
培养细胞株传代根据不同细胞采取不同的方法。贴壁生长细胞如COS-7、CHO等用消化法传代；部分贴壁生长的细胞如PC12用直接吹打即可传代。 一、用品 (1) 0.25％胰蛋白酶，全培养液 (2) 滴管，离心管，培养瓶(皿)，培养瓶盖，注射器，计数6 二、步骤 (1) 贴壁细胞的消化法
稳定表达细胞株的建立
1、将转染后的细胞按照一定的比例接种到6孔板中（一般选用1：10和1：100两个梯度），分别采用1200mg/ml，1000mg/ml和800mg/ml的G418进行筛选；以转染携带EGFP质粒载体的细胞作为阳性对照，以未转染质粒载体的细胞作为阴性对照；2、每3～4天换液一次；3、筛选20～30天，
细胞株的保存方法介绍
1. 紫外消毒30min后关闭紫外灯，开启超净台正常工作状态，用酒精消毒操作者的双手。2. 将所需的培养基，胰酶确保瓶身干净后放于工作台面内，点燃酒精灯，将培养基和胰酶瓶口用酒精棉球擦拭后，再将瓶口对准在酒精灯上消毒2-3次，旋开瓶盖后再次分别消毒瓶口和瓶盖，分别放于酒精灯的两侧。特别是将培养基
细胞株是如何构建的？
1，什么是瞬时转染和稳定转染？瞬时转染：外源片段的表达时间短暂。这主要是因为外源导入的裸露的载体整合入基因组的几率非常低，所以以染色体外(episomal)形式存在，不能随细胞分裂而一同复制导致后拷贝数被稀释导致的。而且考虑到细胞分裂会稀释质粒的量，所以起初转染的质粒拷贝数极高。这就导致瞬时转染呈现
分析细胞株培养技术重点
细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。国内资深的细胞株是通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质或标志的培养细胞。下面纪宁技术员就为您分享细胞株培养技术的几大要点，赶紧拿起小本本记好了！一、取材细胞
稳转细胞株构建原理
稳转株即稳定表达细胞株，指的是基于某一细胞系构建的持续过表达或干扰某特定基因的细胞系。稳定细胞系建立的原理将外源DNA/shRNA克隆到带有某种抗性基因的载体上，重组载体被转染至宿主细胞并整合到其染色体中，并能随细胞分裂稳定传递下去，用载体中所含抗性基因进行筛选。常用的真核表达载体抗性筛选标志物有新
泰素帝的药理药动学介绍
1、泰素帝的药理毒理： 在体内试验中，对小鼠的结肠癌、乳腺癌、肺癌、卵巢肿瘤移植物等有效。对顺铂、足叶乙苷、5Fu、或紫杉醇耐药的细胞株，本品不产生交叉耐药。 2、泰素帝的药 动 学： 按剂量100mg/m2静滴本品约1～2h，体内平均分布容积为113L，t1/2α为4min，t1/2β
收到细胞株该如何处理？
收到细胞，第一时间要镜检：观察细胞形态是否正常，对于贴壁细胞则要注意看贴壁情况是否很好，观察细胞密度，有疑议及时咨提供细胞的技术人员。由于运输的时间或者温度的变化，很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里生长的状态和平时会有点不一样，主要是贴壁牢固问题。比如293T，平时贴壁就不是很牢，在装