概述PH梯度溶液的形成
在离子交换层析中,PH梯度溶液的形成是靠梯度混合仪实现的。例如,当使用阴离子 剂进行层析时,制备PH由高到低呈线性变化的梯度溶液的方法是,在梯度仪的混合室(这层析柱者)中装高PH溶液,而在另一室装低PH极限溶液,然后打开层析柱的下端出口,让洗脱液连续不断地流过柱体。这时从柱的上部到下部溶液的PH值是由高到低变化的。而在聚焦层析中,当洗脱液流进多缓冲交换剂时,由于交换剂带具有缓冲能力的电荷基团,故PH梯度溶液可以自动形成。例如,当柱中装阴离子交换剂PBE94(作固定相)时,先用起始缓冲液(配方见表了一2)平衡到PHg,再用含PH6的多缓冲剂物质(作流动相)的淋洗液通过柱体,这时多缓冲剂中酸性最强的组分与碱性阴离子交换对结合发生中和作用。随着淋洗液的不断加入,住内每点的PH值从高到低逐渐下降。照此处理J段时间,从层析柱顶部到底部就形成了PH6~9的梯度。聚焦层析柱中的PH梯度溶液是在淋洗过程中自动形成的,但是随着淋洗的进行,PH......阅读全文
概述PH梯度溶液的形成
在离子交换层析中,PH梯度溶液的形成是靠梯度混合仪实现的。例如,当使用阴离子 剂进行层析时,制备PH由高到低呈线性变化的梯度溶液的方法是,在梯度仪的混合室(这层析柱者)中装高PH溶液,而在另一室装低PH极限溶液,然后打开层析柱的下端出口,让洗脱液连续不断地流过柱体。这时从柱的上部到下部溶液的PH
等电聚焦电泳色谱仪pH梯度的形成过程
等电聚焦电泳色谱仪是在电泳介质中放入载体两性电解质,当通以直流电时,载体两性电解质形成一个由阳极到阴极逐步增加的pH梯度,不同的蛋白质移动到其相当的等电点位置上,聚焦于一个狭窄区带中而达到分离。载体两性电解质是一系列脂肪族多氨基多羧酸同系物和异构体组成的混合物,具有很多既不相同又十分接近的相互连接的
等电聚焦电泳色谱仪固相pH梯度的形成
等电聚焦电泳色谱仪固相pH梯度的介质是Immobilines试剂,不是两性分子,在凝胶聚合时便形成pH梯度,不随环境电场条件的改变而改变。Immobilines试剂的分子式为CH2 = CH-CO-NH-R,其中R代表羧基或第三氨基,每个分子都有一个单一的酸性或碱性缓冲基团与丙烯酰胺单连。分子一端的
固相pH梯度等电聚焦实验——pH-梯度的测定
试剂、试剂盒丙烯酰胺单体贮液过硫酸铵贮液实验步骤由于固相 pH 梯度凝胶的导电性很低,不可能用表面电极测定凝胶表面的 pH。但对于宽范围的固相 pH 梯度可以用等电点蛋白标准来测定,方法同载体两性电解质等电聚焦。但目前还没有合适的市售蛋白标准可用于测定窄范围的固相 pH 梯度。灌制凝胶时,pH 梯度
PH梯度萃取法的原理
pH梯度萃取法的原理是由于溶剂系统pH变化改变了存在状态(游离型或解离型),从而改变了在溶剂系统中的分配系数。正是因为pH的差异而实现了各生物碱的分离,氯仿为亲脂性有机溶剂,总生物碱皆可溶解于氯仿,这里利用溶解度不能达到分离的效果。样品水溶液用pH3的有机溶剂提取,此时酸性物质多呈非解离状态,因而溶
ph梯度萃取法的步骤
ph梯度萃取法的步骤:分离碱性强弱不同的游离生物碱,可用pH由高至低的酸性缓冲溶液顺次萃取,使碱性由强到弱的生物碱分别萃取出来。据不同物质在不同PH下析出沉淀的原理来提纯所需物质。如混合黄酮苷元,由于结构中酚羟基的数目和位置不同,各自所呈酸性强弱不同,使溶于有机相,依次用5%碳酸氢钠,5%碳酸钠、4
梯度离心时为什么会形成蔗糖梯度?
蔗糖溶液在超速离心的状态下,会形成一个连续的梯度。虽然它是溶液,但溶质毕竟是有重量的。你在生活中仔细观察的话,把墨水超速离心,也能看到一个连续的浓淡梯度,原理是差不多的。分子量越大,形成浓度梯度的离心转速就较小一些。除了蔗糖以外,还有氯化铯的浓度梯度,这些都是为了分离不同分子量的物质所存在的。
固相pH梯度等电聚焦电泳色谱仪概述
固相pH梯度等电聚焦电泳色谱仪比载体两性电解质pH梯度等电聚焦电泳色谱仪具有更高的分辨率,更大的上样量,其分辨率可达0.001pH,是目前分辨率zui高的电泳仪之一。一、工作原理:蛋白质分子按照自己的pI位置在固相pH梯度中迁移,达到自己的等电点时停止迁移。二、固相pH梯度的介质:固相pH梯度(IP
聚丙烯酰胺等电聚焦电泳色谱仪pH梯度的形成
聚丙烯酰胺等电聚焦电泳色谱仪是利用蛋白质具有不同等电点的特性,以聚丙烯酰胺为电泳支持物,在其中加入载体两性电解质(一种含有各种连续pI的小分子混合物)的电泳分离技术。载体两性电解质是一系列多氨基多羧基的混合物,pI = 3~11。在制备聚丙烯酰胺凝胶时,将其混溶其中。载体两性电解质在溶液中的行为可从
密度梯度的形成和收集
生物医学研究中,要求分离细胞、病毒、核酸和蛋白质等,往往来用速度区带离心或等密度离心方法。离心后,颗粒按不同大小、形状或密度,位于不同的层次。速度区带离心或等密度离心均需通过密度梯度进行。根据离心沉降理论,在离心力场中,各种颗粒的沉降速度。 其中梯度介质的密度。因此,梯度介质在离心时起分
一维固相pH梯度等电聚焦-(IEF-with-IPG)——IPG-IEF-pH-梯度的选择
实验材料胶条实验步骤对一新样品,常最先使用宽范围、线性PH3.5-10梯度 但对大多数样品,这样做会丧失 pH4-7 区域的分辦率,许多蛋白质的 pI 值在该区域。利用非线性 pH3.5-10 IPG IEF 胶在一定程度缓解这个问题。 PH3.5-10 非线性胶条在 pH4-7 区域的梯度要比 p
什么叫PH梯度萃取分离
PH梯度萃取分离就是根据不同物质在不同PH下析出沉淀的原理来提纯所需物质pH梯度萃取法是分离酸性、碱性、两性成分常用的手段。其原理是由于溶剂系统 pH变化改变了它们的存在状态(游离型或解离型),从而改变了它们在溶剂系统中的分配系数。如混合黄酮苷元,由于结构中酚羟基的数目和位置不同,各自所呈酸性强弱不
梯度PCR仪的概述
梯度PCR仪梯度PCR仪是由普通PCR仪衍生出的带梯度PCR功能的基因扩增仪。PCR反应能否成功,退火温度是关键,梯度PCR仪每个孔的温度可以在指定范围内按照梯度设置,根据结果,一步就可以摸索出zui适反应条件。一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(通常12种温度梯度)的称之为梯度PCR
梯度PCR仪的概述
PCR反应能否成功,退火温度是关键,梯度PCR仪每个孔的温度可以在指定范围内按照梯度设置,根据结果,一步就可以摸索出最适反应条件。一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(通常12种温度梯度)的称之为梯度PCR仪。因为被扩增的不同的DNA片段其最适合的退火温度不同,通过设置一系列的梯度退
梯度PCR仪的概述
梯度PCR仪梯度PCR仪是由普通PCR仪衍生出的带梯度PCR功能的基因扩增仪。PCR反应能否成功,退火温度是关键,梯度PCR仪每个孔的温度可以在指定范围内按照梯度设置,根据结果,一步就可以摸索出zui适反应条件。一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(通常12种温度梯度)的称之为梯度PCR
梯度形成器的主要用途
中文名称梯度形成器英文名称gradient former定 义用于形成浓度梯度、极性梯度或pH梯度等溶液的装置。常用于梯度洗脱层析。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
ph计测量溶液最适宜的ph范围
概念性错误.首先,可以肯定,PH计能准确测定PH在4以下的溶液,在PH值为0~14范围内都能准确测定.我们校谁PH计时,只要校三点,PH值为4.00,6.86,9.00(和具体温度有关系),只要这三点都校准了,测其它PH值也都准确的,因为它们都是呈线性的,线性相关非常好.(测PH值的原理,其实就是测
ph计测量溶液最适宜的ph范围
概念性错误.首先,可以肯定,PH计能准确测定PH在4以下的溶液,在PH值为0~14范围内都能准确测定.我们校谁PH计时,只要校三点,PH值为4.00,6.86,9.00(和具体温度有关系),只要这三点都校准了,测其它PH值也都准确的,因为它们都是呈线性的,线性相关非常好.(测PH值的原理,其实就是测
ph计测量溶液最适宜的ph范围
概念性错误.首先,可以肯定,PH计能准确测定PH在4以下的溶液,在PH值为0~14范围内都能准确测定.我们校谁PH计时,只要校三点,PH值为4.00,6.86,9.00(和具体温度有关系),只要这三点都校准了,测其它PH值也都准确的,因为它们都是呈线性的,线性相关非常好.(测PH值的原理,其实就是测
ph梯度萃取可用于哪些成分
适用于:三类化合物做初步分离:蒽醌(例如:大黄)、黄酮(例如:槐角)和生物碱(例如:苦参)。当然,具体的pH梯度和萃取使用的溶剂需要选择一下。ph梯度萃取法是分离酸性、碱性、两性成分常用的手段。ph变化改变了它们的存在状态(游离型或解离型),从而改变了它们在溶剂系统中的分配系数。大体上有三类化合物使
用PH计测定溶液PH时,应用什么标准溶液定位
可以用市售的pH计标定标准缓冲溶液,一般一套三种,pH分别为4.0、7.0和10.0。一般4.0的可以用邻苯二甲酸氢钾体系配制。7.0的用磷酸二氢钾-磷酸氢二钠体系配制。10.0的用碳酸钠-碳酸氢钠体系配制。可以根据需要的缓冲容量确定浓度。
pH-缓冲溶液的配制
0.05mol/kg 四草酸氢钾溶液:称取经(54±3)℃烘(4~5)h 并在干燥器中冷却后的四草酸氢钾 12.61g,用水溶解后转入 1000mL 容量瓶中,在恒温槽(25±0.2)℃下稀释至刻度。0.05mol/kg 邻苯二甲酸氢钾溶液:称取经(110~120)℃烘 2h 并在干燥器中冷却后的邻
pH标准缓冲溶液
pH标准缓冲溶液Standard pH Buffer Solutions pH标准缓冲溶液 Standard pH Buffer Solutions名称(Name) 配 制 (Compounding way) 不同温度时的pH值(pH in different temperatures) 0℃ 5℃
对于PH计,pH缓冲溶液的主要作用
⑴pH测量前标定校准pH计。 ⑵用以检定pH计的准确性,例如用pH6.86和pH4.00标定pH计后,将pH电极插入pH9.18溶液中,检查仪器显示值和标准溶液的pHs值是否一致。 ⑶在一般精度测量时检查pH计是否需要重新标定。pH计标定并使用后也许会产生漂移或变化,因此在测试前将电极插入与被测
常见溶液PH值测试与PH电极的选择
本文将着重揭示PH测定中遇到的问题,并介绍电极经过发展后能解决这些问题的特性。大多数情况下,普通电极不能测定的样品PH值现在都可由某些的PH电极来完成。标准PH值的测定实验室测定一般由常规复合PH电极来完成。 通常需具备下列条件: 测定范围在PH2和PH12间,温度在10℃及50℃间、离子浓度0.5
常见溶液PH值测试与PH电极的选择
本文将着重揭示PH测定中遇到的问题,并介绍电极经过发展后能解决这些问题的特性。大多数情况下,普通电极不能测定的样品PH值现在都可由某些专用的PH电极来完成。 标准PH值的测定 实验室测定一般由常规复合PH电极来完成。 通常需具备下列条件: 测定范围在PH2和PH12间
PH计PH计标准缓冲溶液的配置
标准缓冲溶液的配置:三种pH= 4.0 、6.86、 9.18的缓冲液可以直接购买配置,这样比较准。取出标准缓冲溶液邻苯二甲酸氢钾PH=4.00剪开封口,将试剂倒入250ml容量瓶中,加入无二氧化碳蒸馏水,搅拌溶液直至瓶内试剂全部溶解即可。混合磷酸盐pH=6.86及硼砂pH=9.18的配置方法同上所
固相pH梯度等电聚焦实验
实验方法原理 固相 pH 梯度凝胶是由固相 pH 梯度介质(丙烯酰胺衍生物)共价结合到聚丙烯酰胺凝胶中并形成 pH 梯度,所以制胶过程比载体两性电解质凝胶复杂。灌胶的方法与常规聚丙烯酰胺梯度凝胶和 SDS 梯度凝胶相似。高质量的凝胶介质和固相 pH 梯度介质,聚合过程以及漂洗对固相 pH
固相pH梯度等电聚焦实验
制胶 等电聚焦 pH 梯度的测定 检测 实验方法原理 固相 pH 梯度凝胶是由固相 pH 梯度介质(丙烯酰胺衍生物)共价结合到聚
土壤溶液的pH值检测
土壤pH值测量方法的选择是一个经常争论的问题。一般来说,可在下列三种方法中选择一种。(1)细泥糊状物pH值:将足够量的蒸馏水加到土壤样品中搅成很细的糊状物,放置5分钟插入,经过15~20秒后读取仪器示值。注意在两次测量之间要充分洗涤电极。(2)土壤与水1:1悬浮液pH值:将20克土壤样品置于50毫