ph梯度萃取可用于哪些成分
适用于：三类化合物做初步分离：蒽醌（例如：大黄）、黄酮（例如：槐角）和生物碱（例如：苦参）。当然，具体的pH梯度和萃取使用的溶剂需要选择一下。ph梯度萃取法是分离酸性、碱性、两性成分常用的手段。ph变化改变了它们的存在状态（游离型或解离型），从而改变了它们在溶剂系统中的分配系数。大体上有三类化合物使用上述方法做初步分离：蒽醌（例如：大黄）、黄酮（例如：槐角）和生物碱（例如：苦参）。......阅读全文
ph梯度萃取法的步骤
ph梯度萃取法的步骤：分离碱性强弱不同的游离生物碱，可用pH由高至低的酸性缓冲溶液顺次萃取，使碱性由强到弱的生物碱分别萃取出来。据不同物质在不同PH下析出沉淀的原理来提纯所需物质。如混合黄酮苷元，由于结构中酚羟基的数目和位置不同，各自所呈酸性强弱不同，使溶于有机相，依次用5％碳酸氢钠，5％碳酸钠、4
PH梯度萃取法的原理
pH梯度萃取法的原理是由于溶剂系统pH变化改变了存在状态（游离型或解离型），从而改变了在溶剂系统中的分配系数。正是因为pH的差异而实现了各生物碱的分离，氯仿为亲脂性有机溶剂，总生物碱皆可溶解于氯仿，这里利用溶解度不能达到分离的效果。样品水溶液用pH3的有机溶剂提取，此时酸性物质多呈非解离状态，因而溶
什么叫PH梯度萃取分离
PH梯度萃取分离就是根据不同物质在不同PH下析出沉淀的原理来提纯所需物质pH梯度萃取法是分离酸性、碱性、两性成分常用的手段。其原理是由于溶剂系统 pH变化改变了它们的存在状态（游离型或解离型），从而改变了它们在溶剂系统中的分配系数。如混合黄酮苷元，由于结构中酚羟基的数目和位置不同，各自所呈酸性强弱不
ph梯度萃取可用于哪些成分
适用于：三类化合物做初步分离：蒽醌（例如：大黄）、黄酮（例如：槐角）和生物碱（例如：苦参）。当然，具体的pH梯度和萃取使用的溶剂需要选择一下。ph梯度萃取法是分离酸性、碱性、两性成分常用的手段。ph变化改变了它们的存在状态（游离型或解离型），从而改变了它们在溶剂系统中的分配系数。大体上有三类化合物使
PH梯度萃取分离及柱色谱分离原理
pH梯度萃取法是分离酸性、碱性、两性成分常用的手段.其原理是由于溶剂系统 pH变化改变了它们的存在状态（游离型或解离型）,从而改变了它们在溶剂系统中的分配系数.如混合黄酮苷元,由于结构中酚羟基的数目和位置不同,...
固相pH梯度等电聚焦实验——pH－梯度的测定
试剂、试剂盒丙烯酰胺单体贮液过硫酸铵贮液实验步骤由于固相 pH 梯度凝胶的导电性很低，不可能用表面电极测定凝胶表面的 pH。但对于宽范围的固相 pH 梯度可以用等电点蛋白标准来测定，方法同载体两性电解质等电聚焦。但目前还没有合适的市售蛋白标准可用于测定窄范围的固相 pH 梯度。灌制凝胶时，pH 梯度
概述PH梯度溶液的形成
在离子交换层析中，PH梯度溶液的形成是靠梯度混合仪实现的。例如，当使用阴离子 剂进行层析时，制备PH由高到低呈线性变化的梯度溶液的方法是，在梯度仪的混合室（这层析柱者）中装高PH溶液，而在另一室装低PH极限溶液，然后打开层析柱的下端出口，让洗脱液连续不断地流过柱体。这时从柱的上部到下部溶液的PH
一维固相pH梯度等电聚焦－(IEF－with－IPG)——IPG－IEF－pH－梯度的选择
实验材料胶条实验步骤对一新样品，常最先使用宽范围、线性PH3.5-10梯度 但对大多数样品，这样做会丧失 pH4-7 区域的分辦率，许多蛋白质的 pI 值在该区域。利用非线性 pH3.5-10 IPG IEF 胶在一定程度缓解这个问题。 PH3.5-10 非线性胶条在 pH4-7 区域的梯度要比 p
如何使用ph梯度萃取法提取分离大黄中蒽醌类化合物
实验原理：大黄为泻下、清热解毒、活血化瘀中药，有“推陈致新”的作用。品种繁多，质优者为蓼科植物掌叶大黄（Rheum Palmatum L.）。药用大黄（Rheum officinale Baill）和唐古特大黄（R·tang uticum Maxim ex Reg）的根。大黄中具有泻下作用的成分是几
固相萃取萃取方式、盐浓度和pH
萃取方式、盐浓度和pH：SPME的操作方式有两种，一种为顶空萃取方式，另一种为浸入萃取方式，实验中采取何种萃取方式主要取决于样品组分是否存在蒸气压，没有蒸气压的组分只能采用浸入方式来萃取。在萃取前于样品中添加无机盐可以降低极性有机化合物的溶解度，产生盐析，提高分配系数，从而达到增加萃取头固定相对分析
固相pH梯度等电聚焦实验
制胶 等电聚焦 pH 梯度的测定 检测 实验方法原理 固相 pH 梯度凝胶是由固相 pH 梯度介质（丙烯酰胺衍生物）共价结合到聚
固相pH梯度等电聚焦实验
实验方法原理 固相 pH 梯度凝胶是由固相 pH 梯度介质（丙烯酰胺衍生物）共价结合到聚丙烯酰胺凝胶中并形成 pH 梯度，所以制胶过程比载体两性电解质凝胶复杂。灌胶的方法与常规聚丙烯酰胺梯度凝胶和 SDS 梯度凝胶相似。高质量的凝胶介质和固相 pH 梯度介质，聚合过程以及漂洗对固相 pH
固相萃取前调节ph
近年来分析检测技术有了很大的飞跃，但样品前处理依然是科研工作者必须面对的挑战。 固相萃取（Solid Phase Extraction，简称SPE）是一种从二十世纪七十年代中期开始发展起来，用途广泛而且越来越受欢迎的样品前处理技术。根据吸附剂填料及吸附机理的不同，主要分为正相、反相、离子交换和
固相pH梯度等电聚焦实验——检测
试剂、试剂盒丙烯酰胺单体贮液过硫酸铵贮液实验步骤1. 各种染色方法在所述的染色方法，包括各种考马斯亮蓝方法、银染色、荧光探针法、放射自显影、免疫固定等均适用于固相 pH 梯度等电聚焦后的检测。作者实验室进行转铁蛋白的考马斯亮蓝 R-250 染色时，脱色困难。用 G-250 染色时，脱色同样困难。为了
固相化－pH－梯度双向凝胶电泳实验
方案4 双向凝胶电泳脑脊液蛋白样品的制备实验实验方法原理可用乙醇沉淀人类脑脊液以浓缩其中的蛋白质和除去盐分，否则这些物质会干扰第一向 IEF。实验材料人类脑脊液试剂、试剂盒乙醇NaOH增溶溶液β-巯基乙醇仪器、耗材离心管冷冻离心机超声波仪实验步骤1.在室温下解冻脑脊液样品。当样品解冻后，旋紧试管盖，
固相化－pH－梯度双向凝胶电泳实验
方案1 双向凝胶电泳鼠肝蛋白质提取物的制备实验 方案2 双向凝胶电泳真核生物细胞裂解物的制备实验 方案3 双向凝胶电泳大肠杆菌裂解液的制备实验 方案4 双向凝胶电泳脑脊液蛋白样品的制备实验 方案5 第一向：蛋白质的等电聚焦电泳实验
固相化－pH－梯度双向凝胶电泳实验
实验方法原理 肝与其他动物组织一样，可制备用作双向电泳的材料。离心之后，溶于合适的溶液中即可。不需要浓缩蛋白质或去除干扰物质等额外步骤。所用抽提溶液包括脲、硫脲和酰胺烷基硫代甜采碱去垢剂ASB-14，它们配合使用可最大量地溶解蛋白质。实验材料 鼠肝试剂、试剂盒 二硫苏糖醇（DTT)抽提溶液苯甲基硫酰
在微流控芯片中实现可控PH梯度
这里报道一种以软光刻(soft-lithography)为主要手段的微加工技术制备PH值梯度微流芯片的方法. 此种PH梯度芯片具有容易加工、可根据需要快速得到不同范围的PH值梯度、精度可控制、IEF与分离结合为一体、IEF所需电压低、PH值梯度不随时间改变等优点. PH值梯度微流芯片的制作过程如下:
固相pH梯度等电聚焦实验——制胶
实验方法原理固相 pH 梯度凝胶是由固相 pH 梯度介质（丙烯酰胺衍生物）共价结合到聚丙烯酰胺凝胶中并形成 pH 梯度，所以制胶过程比载体两性电解质凝胶复杂。灌胶的方法与常规聚丙烯酰胺梯度凝胶和 SDS 梯度凝胶相似。高质量的凝胶介质和固相 pH 梯度介质，聚合过程以及漂洗对固相 pH 梯度凝胶是非
简述固相萃取中的PH影响
西蒙-奥德里奇生物与化学制品有限公司总部位于德意志联邦共和国巴伐利亚首府慕尼黑，创办于1988年，是一家世界著名的生物与化学制品研发制造商。旗下产品Simon Aldrich固相萃取柱在业界获得广泛好评。固相萃取柱的使用有许多需要注意的问题。用在固相萃取中的溶液有很大pH范围的溶液有。硅胶
简述固相萃取中的PH影响
用在固相萃取中的溶液有很大pH范围的溶液有。硅胶作为基体原料，如高压液相色谱柱，通常稳定的pH范围是2-7.5。当pH高于和低于这个范围，键合相就会水解和从硅胶上断链下来，或者硅胶本身就溶解了。然而，在固相萃取中，常常溶液只与吸附剂接触较短的时间。实际上固相萃取管都是一次性使用，允许任何pH溶液以
固相化－pH－梯度双向凝胶电泳实验1
方案1 双向凝胶电泳鼠肝蛋白质提取物的制备实验实验方法原理肝与其他动物组织一样，可制备用作双向电泳的材料。离心之后，溶于合适的溶液中即可。不需要浓缩蛋白质或去除干扰物质等额外步骤。所用抽提溶液包括脲、硫脲和酰胺烷基硫代甜采碱去垢剂ASB-14，它们配合使用可最大量地溶解蛋白质。实验材料鼠肝试剂、试剂
固相化－pH－梯度双向凝胶电泳实验2
方案2 双向凝胶电泳真核生物细胞裂解物的制备实验实验方法原理在生物医学研究中，培养的哺乳动物细胞是被广泛使用的材料。本方案中介绍的方法已经成功用于许多人类克隆的癌细胞系和纤维原细胞系（Ji,etal，1994,1997)。虽然多数细胞蛋白质能用此方法提取，但是一些 DNA 结合蛋白可能会丢失。如果研
固相化－pH－梯度双向凝胶电泳实验3
方案3 双向凝胶电泳大肠杆菌裂解液的制备实验实验方法原理细菌裂解液含大量核酸，在进行双向凝胶电泳之前，需先对核酸进行处理。可通过超声波处理包含脲和 CHAPS 的细菌提取液。当脲存在时，核酸酶（Benzonase) 是有活性的，但是其活性依赖于 Mg2+。核酸酶处理后加入 EDTA 以抑制金属蛋白酶
固相化－pH－梯度双向凝胶电泳实验5
方案5 第一向：蛋白质的等电聚焦电泳实验实验方法原理这里所描述的分离蛋白质的两种方法都是基于蛋白质所带净电荷的多少，使用固相化的 pH 梯度凝胶进行的 IEF 技术。这些方法作为双向凝胶分离的第一向，除了利用传统的水平电泳仪进行 IPG 凝胶的等电聚焦外（方案 5 方法 A)，还能在自带的电泳槽里使
固相化－pH－梯度双向凝胶电泳实验6
方案6 垂直 SDS 平板凝胶的制备：均一凝胶的灌制实验实验方法原理蛋白质通过 IEF 进行分离之后，可进行第二向电泳，即 SDS-PAGE。本方案详细介绍了灌制均一 SDS-PAGE 凝胶的方法。均一凝胶（具完全相同的%T和％c) 对特殊分子量范围的蛋白质有较好的分离效果，因其灌制方法简单而被普遍
固相化－pH－梯度双向凝胶电泳实验7
方案7 垂直SDS 平板凝胶制备：同时灌制多梯度凝胶实验实验方法原理对于分离宽分子量范围的蛋白质，梯度 SDS-PAGE 凝胶可提供最佳分析方法，产生更清晰的蛋白质点。通过减少凝胶中孔的尺寸，可使扩散减少。但是，梯度凝胶重复性较差，所以通常用多凝胶灌制装置来同时灌制，制作一套凝胶来进行同一系列的实验
固相化－pH－梯度双向凝胶电泳实验8
方案8 第二向：蛋白质的 SDS-PAGE 实验实验方法原理在第一向 IEF 和 IPG 胶条平衡之后，需进行第二向 SDS-PAGE。SDS-PAGE 是基于蛋白质分子量的不同而将其分离的。这种分离系统可从多家供应商处获得，在许多蛋白质化学实验室中也普遍使用。这里介绍放置 IPG 胶条的方法以及第
固相化－pH－梯度双向凝胶电泳实验10
方案11 银氨染色实验方法原理银染聚丙烯酰胺凝胶首先由 Switzer 等引进（1979)，已迅速成为一种最普遍使用的高灵敏度蛋白质染色方法。因存在背景高、重复性不好及银镜等问题，多年来对此方法的改进较多。目前，Rabilloud 等（1994b）在文献中发现 100 多种不同的方案，但所有这些方案
固相化－pH－梯度双向凝胶电泳实验13
方案13 用 GelCode 磷蛋白染色试剂盒对磷蛋白进行染色实验实验材料含蛋白质样品的凝胶试剂、试剂盒乙酸钼酸铵溶液含硝酸的钼酸铵溶液甲基绿溶液NaOH磺基水杨酸溶液含氯化钙的磺基水杨酸溶液仪器、耗材带有盖子的玻璃或塑料平皿烘箱往复式或定轨式摇床实验步骤1.将凝胶放入盛有 50 ml 水的平皿中，