活细胞转录组测序:像看电影一样了解细胞的“前世今生”

在我们呱呱坠地之前,受精卵是如何发育成复杂个体的?为何正常的细胞会慢慢变成癌细胞? 细胞是生命的基本单位,了解它的过去、现在和未来不仅有助于我们了解正常发育的过程,也对理解疾病的产生和发展至关重要。然而,想要“看清”细胞的“前世今生”仍然存在显著的技术困难。 8月17日,现任中国科学院深圳先进技术研究院合成生物学研究所研究员(原瑞士洛桑联邦理工学院博士后)陈万泽以共同第一作者身份在国际顶级期刊Nature上发表长文,介绍了研究团队在国际首创的活细胞转录组测序技术(Live-seq),该技术首次让单细胞进行转录测序后,依然能保持细胞存活,首次实现了活细胞全基因表达的连续观测。 “该研究实现了使用Live-seq技术对同一个活细胞多次分离部分细胞质进行多次转录组测序的可行性,表明这一技术有望在将来用于构建单个活细胞的转录组系列变化动态。该研究为单细胞转录组测序提供了全新的研究策略,为我们理解生命过程的动态变化提供了强有力的......阅读全文

无需活细胞的蛋白合成新技术

  来自美国能源部橡树岭国家实验室(Oak Ridge National Laboratory)的研究人员研发出了一种无需细胞培养,人工合成蛋白质的新系统,这一研究成果公布在12月22日的Small杂志上。  这个生物反应器采用的是一种混合液,其中包含有大肠杆菌细胞提取物,一种绿色荧光蛋白DNA编码

美制成首个活细胞激光器

  美国马萨诸塞州综合医院研究人员成功利用表达了绿色荧光蛋白(GFP)的肾脏细胞产生了一种纳秒级的激光脉冲,首次用单个活细胞作为增益介质产生了激光。相关论文将于近日发表在《自然·光子学》杂志上。   产生激光通常要有3个要素,第一是光源,第二是受激产生激光的“增益介质”,第三是将所产生的光聚拢到一

活细胞培养法的作用介绍

  不仅可以检查细胞系(株)对药物的敏感性,而且还可作体内和体外敏感性的比较,同时也可观察到体外细胞不同药物所引起的形态结构和生理、代谢的变化,如铵盐和腺苷均可使细胞浆内形成空泡。脓绿素可增加细胞对氧的吸收,抑制细胞核的分裂,一定剂量的复方丹参能阻碍细胞贴壁,可影响人食管癌细胞对基质附着的作用,故有

活细胞中去糖基化的方法

  1、衣霉素在体内阻断N-连糖;  2、将内切神经氨酸酶注入发育中的视网膜提示了多唾液酸的特异性作用--将高纯度酶注入细胞内+恰当的对照;  3、将糖基修饰酶的cDNA在活细胞或动物中表达;  4、在培养环境中加入凝集素或抗体把特异的聚糖封闭掉。

无需活细胞的蛋白合成新技术

  来自美国能源部橡树岭国家实验室(Oak Ridge National Laboratory)的研究人员研发出了一种无需细胞培养,人工合成蛋白质的新系统,这一研究成果公布在12月22日的Small杂志上。  这个生物反应器采用的是一种混合液,其中包含有大肠杆菌细胞提取物,一种绿色荧光蛋白DNA编码

如何用台盼兰计数活细胞?

将样品适当稀释后,用稀释后的样品和0.4%的台盼兰溶液按1:1混合后,用移液枪点样到血球计数板,置于倒置显微镜下观察、计数,其中蓝色细胞是死细胞,因活细胞排斥台盼兰,不被染色。

关于活细胞培养法的优点

  ①能精确地控制材料、环境与药物对组织细胞的效能;  ②可从细胞水平上通过观察推算出对活组织的作用时间;  ③能区别药物对细胞的直接作用还是通过免疫系统、内分泌系统发挥间接作用;  ④药物用于临床前可不需用人体作试验,直接用人细胞作为实验对象,起到了从动物试验过度到人体临床试验的桥梁作用;  ⑤该

实时动态活细胞成像分析仪

  实时动态活细胞成像分析仪是一种用于药学领域的医学科研仪器,于2019年9月25日启用。  技术指标  IncuCyte Zoom HD/2CLR的相差光源和荧光光源均为LED光源,有高灵敏度CCD成像系统及高清晰度光学元件,10倍物镜的成像分辨率为1.22µm/像素,像素1392×1040,输出

活细胞成像用哪种显微镜

活细胞成像可以选择共聚焦显微镜,共聚焦与传统显微镜的原理差别在于照明方式不同:传统显微镜是一次性照明整个视野中的样品,因此可以用眼睛直接观察或者用CCD获取图像,没有时间延迟;而共聚焦显微镜是逐点成像,无法用CCD获取图像,只能用探测器收集每个象素点的信号,再通过软件重构图像,有一定的时间延迟。共聚

活细胞成像和数据分析系统

  活细胞成像和数据分析系统是一种用于生物学领域的分析仪器,于2018年11月26日启用。  技术指标  光源:IncuCyte Zoom HD/2CLR的相差光源和荧光光源均为LED光源。 物镜倍数:IncuCyte Zoom HD/2CLR的物镜倍数是4倍或10倍或20倍,可由用户自行更换。 成

荧光染料CFSE活细胞标记的特点

荧光染料CFSE(CFDA-SE),是一种可对活细胞进行荧光标记的新型染料,可以标记活体细胞。其基本原理如下:CFSE能够轻易穿透细胞膜,在活细胞内与胞内蛋白共价结合,水解后释放出绿色荧光。在细胞分裂增殖过程中,它的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减,标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,因此其荧光强

活细胞中去糖基化的方法

活细胞中去糖基化的方法:1,衣霉素在体内阻断N-连糖; 2,将内切神经氨酸酶注入发育中的视网膜提示了多唾液酸的特异性作用--将高纯度酶注入细胞内+恰当的对照;3,将糖基修饰酶的cDNA在活细胞或动物中表达; 4,在培养环境中加入凝集素或抗体把特异的聚糖封闭掉。

如何用台盼兰计数活细胞?

用无血清培养基把细胞悬液稀释到200~2000个/毫升,在0.1毫升细胞悬液中加0.1毫升0.4%的台盼兰溶液。轻轻混匀,数分钟后,用血球计数板计数细胞。活细胞排斥台盼兰,因而染成蓝色细胞是死细胞。

活细胞间接免疫荧光法

一.实验器材:1.  器材:40孔塑料板、40孔板离心机、微量加样器、振荡器、盖玻片、荧光显微镜等2.  试剂:单抗隆抗体(单抗)、荧光标记抗鼠免疫球蛋白、PBS(pH7.2-7.4)、甘油、叠氮钠(NaN3)等二.方法(微量法)1.  将分离好的单个核细胞用PBS洗2次,1000rpm每次10分钟

四种活细胞提取技术概述

最新的贴壁活细胞提取技术——Cytosurge多功能单细胞显微操作系统FluidFM BOT 当今,对细胞内表达物的监控对于研究细胞分化、细胞衰老以及细胞病变、药物代谢等领域中发挥着越来越重要的作用。本文将对常用的几种活细胞提取技术进行概括为什么要进行活细胞提取?在传统的细胞提取技术中往往使用化学、

DAPI的属性介绍活细胞毒性

DAPI可用于固定细胞染色,但是因为活细胞染色对DAPI浓度有严格要求,它很少被用于活细胞染色。DAPI能快速进入活细胞中与DNA结合,因此DAPI对生物体而言,也被视为一种毒性物质与致癌物。然而在MSDS中它被标记为无毒。尽管DAPI没有显现出对E.coli的诱变性,它在机器制造商提供的信息上被认

细胞复苏后不活怎么回事

细胞复苏后不活怎么回事齐氏生物认为复苏细胞是否贴壁跟你冻存时的操作有直接关系。而且细胞的传代数越多,即细胞越老,越禁不起低温的折腾。复苏后,细胞有个休眠期,大约7-14天不等。只要不死,你就慢慢养着。突破了某个时间点,你会发现细胞又神奇的康复了。但要等到细胞状态良好,传2代以上再做实验。尤其是流式、

荧光染料CFSE活细胞标记的特点

荧光染料CFSE(CFDA-SE),是一种可对活细胞进行荧光标记的新型染料,可以标记活体细胞。其基本原理如下:CFSE能够轻易穿透细胞膜,在活细胞内与胞内蛋白共价结合,水解后释放出绿色荧光。在细胞分裂增殖过程中,它的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减,标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,因此其荧光强

《细胞》:单细胞测序助力基因重组图谱

  来自斯坦福大学医学院等处的研究人员发表了题为“Genome-wide Single-Cell Analysis of Recombination Activity and De Novo Mutation Rates in Human Sperm”的文章,首次公布了来自一个成人男子91个

3D“最小活细胞”模拟细胞内部运作

科技日报北京1月23日电 (记者张梦然)据最新一期《细胞》杂志报道,美国科学家建立了一个基因组被剥离到了最基本要素的“最小活细胞”,以及一个反映其行为的细胞计算机模型。通过改进和测试该模型,科学家们表示正在开发一个用于预测基因组、生命条件或活细胞物理特性的变化将如何改变其功能的系统。美国伊利诺伊大学

Nature:痢疾变形虫通过蚕食活细胞杀死细胞

  痢疾内变形虫(Entamoeba histolytica),也叫溶组织内阿米巴,主要寄生于结肠内,引起阿米巴痢疾或阿米巴结肠炎。痢疾阿米巴也是根足虫纲中最重要的致病种类,在一定条件下,并可扩延至肝、肺、脑、泌尿生殖系和其他部位,形成溃疡和脓肿。痢疾变形虫是一种单细胞生物,大小大约为一个尘螨的

单细胞“纳米生物间谍”技术能进入活细胞取样

  据物理学家组织网近日报道,美国加利福尼亚大学圣克鲁兹分校(UCSC)研究人员开发出一种机器人式的“纳米生物间谍”系统,能从单个活细胞内提取出微量样本,进行RNA或DNA测序,而不会杀死细胞。研究人员表示,这种单细胞“纳米生物间谍”技术是一种了解活细胞内部动态过程的有力工具。相关论文发表在最近出版

活细胞评价细胞周期抑制剂——ImageXpress®-Micro

前言监测对细胞周期变化的影响对于肿瘤的发展及药物研发有着重要的作用。例如,已知抑制有丝分裂的化合物大都用来减缓肿瘤细胞的生长。活细胞高内涵的筛选已被验证可以区分细胞的每个周期。此技术结合BacMam转染系统,可使细胞表达两种细胞周期相关荧光融合蛋白。延时监测实验持续2-3天,细胞置于ImageXpr

单细胞RNA测序发现新的免疫细胞

  最近在《Nature Immunology》发表的一项新研究,详细检测了一组新发现的免疫细胞(被称为ILC)。通过对单个扁桃体细胞的基因表达进行分析,瑞典卡罗林斯卡学院的科学家们,发现了三个以前未知的ILC子群,并揭示了关于“这些细胞在人体中如何发挥功能”的更多信息。  先天淋巴细胞(ILC)是

PNAS:单细胞测序绘制大脑的细胞图谱

  斯坦福大学的著名学者Stephen Quake及其同事本周在《美国科学院院刊》(PNAS)上发表文章,介绍了人类脑细胞的单细胞转录组测序研究成果。  研究小组对近500个成人或胎儿脑细胞进行了单细胞RNA测序。利用这种方法,他们能够鉴定出大脑中所有主要的细胞类型,并确定神经元的亚型。他们还观察了

Namocell单细胞分离仪应用——单细胞测序

2018年11月,Namocell与CZ-Biohub(Chan Zuckerburg Biohub)合作,在单细胞测序领域做出了新的尝试。CZ-Biohub利用Namocell单细胞分离仪分选出目的B细胞,并且将其进行单细胞测序,为抗体新药的发现迈出了重要一步。单细胞RNA测序(scRNA-s

活细胞与死细胞在细胞膜通透性的差异

  活细胞的细胞膜是一种选择性膜,对细胞起保护和屏障作用,只允许物质选择性的通过;而细胞死亡之后,细胞膜受损,通透性增加,常用的以台盼蓝鉴别细胞死活的方法就是利用了这一性质。台盼蓝,又称锥蓝,是一种阴离子型染料,不能透过完整的细胞膜。所以经台盼蓝染色后只能使死细胞着色,而活细胞不被着色,甲基蓝有类似

细胞形态观察(电镜检测)活率测定(亚细胞结构分离)

一、实验内容1、细胞电子显微镜检测2、细胞活率测定3、亚细胞结构的分离与鉴定 二、实验设计 前一天细胞传代: 1. (电镜)中午每班传细胞入含小盖片培养瓶3瓶 晚上1瓶正常、2瓶损伤 次日损伤2瓶中,其中1瓶损伤恢复 2. (活率)中午每组

活细胞荧光染色后细胞形态变圆是什么原因

不固定直接染色,细胞就会变圆,因为染色液的渗透压和细胞质不一样可以选择用CFSE染色后,铺板。过夜,等细胞重新贴壁后,再用PI染色,你应该是要看双染的效果,这个比较合适。用荧光显微镜观察的时候可以先观测拍照再固定,避免甲醇影响了细胞状态让它贴的不牢,或者不固定直接拍照,PI染色效果一个小时影响不大。

传感器大作用-电子胶囊“活细胞”

  分析测试百科网讯 近日,美国研究人员发现一种可以经基因改造的活细胞来制作微型传感器,制成胶囊后用于探查胃肠道疾病的科技成果。 图片来源网络   麻省理工学院研究人员首先用基因工程改造大肠杆菌的一种无害菌株,使它遇到血液中的亚铁血红素时发光;再将数以百万计这种菌株填入特制传感器中,覆以