关于微卫星标记的实验的步骤介绍
1. 客户收集标本(血液或组织等标本)并提取DNA。 2. 设计引物序列并扩增,琼脂糖电泳检测结果。 3. 合成荧光标记引物。 4. 进行PCR扩增,产物通过测序仪器电泳检测, 获得扩增片段大小。 5. 分析测序仪器读出的数据,给结果图谱。......阅读全文
放射免疫技术(RIA)标记抗原实验的原理和步骤
原理当抗原遇到相应的抗体便形成抗原抗体复合物(Ag+Ab↔Ag-Ab),当用放射性同位素标记抗原再与相应的抗体结合便形成标记抗原和抗体复合物。即:*Ag+Ab↔*Ag-Ab。当标记抗原和未标记抗原一起加入相应的抗体时则两种抗原产生相互的竞争,而生成有标记抗原和抗体复合物以及非标记抗原和抗体复合物。生
胶体金标记实验的操作方法与步骤
胶体金标记实验的实验过程主要包含以下步骤:胶体金标记蛋白的制备及其与胶体金之间的用量比例的确定、胶体金和蛋白的结合、胶体金标记蛋白的纯化与质量检测等。1、蛋白质的处理:胶体金标记蛋白的制备胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值,在接近蛋白质的等电点或偏碱的条件下,二者容易形成牢固的结合物。如果胶体金的p
关于火箭免疫电泳的实验操作步骤介绍
1、抗原、抗体浓度的选择 以分别固定抗原含量与抗体浓度的方法,选取最小抗原量与最低抗体浓度,在免疫电泳后能出现最清晰项端狭窄且尖的锥形沉淀峰,长达2~5cm者为标准。一般抗原用量为0.5~5微克,抗血清用量为5~10微升,稀释度于1:10~1:200之间进行选择。 2、预复琼脂玻板的制备
关于PI单染色法的实验步骤介绍
1、PI单染色法— 收集细胞{数目约(1~ 5)×106个/mL},500 ~ 1000 r/min离心5min,弃去培养液。 2、PI单染色法— 3ml PBS洗涤1次。 3、PI单染色法— 离心去PBS,加入冰预冷的70%的乙醇固定,4℃,1—2小时。 4、PI单染色法— 离心弃去固定
关于基因探针标记的方法介绍
探针的标记方式有放射性标记和非放射性标记。标记物质有放射性元素(如32P等)和非放射性物质(如生物素、地高辛等)。32P是最常用的核苷酸标记同位素,被标记的dNTP本身就带有磷酸基团,便于标记。特点是比活性高,可达9000Ci/mmol;发射的β射线能量高。用它标记的探针自显影时间短,灵敏度高。
荧光素标记抗体的操作步骤
FITC荧光素标记抗体的操作步骤 www.runwelltac.com当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时,主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键(thiocarbmide)结合,形成FITC-蛋白质结合物,即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖
切口平移法标记探针的步骤
(1)模板 DNA 的制备用限制性内切酶将载体上的外源 DNA 酶切并进行琼脂糖凝胶电泳回收纯化,琼脂糖残留可抑制切口平移反应,因此彻底清除琼脂糖至关重要。也可以用带有外源 DNA 克隆片段的重组载体为模板来切口平移制备探针。(2)切口平移标记将模板 DNA 水溶液、DNase Ⅰ、未标记的三磷酸单
简述酶标记抗体的方法步骤
1、HRP标记抗体的方法 酶与抗体交联的方法有许多种,根据酶的结构不同可采用不同的方法。对于制备HRP结合物,可用戊二醛二步法和过碘酸钠法。尤以简易过碘酸钠法更为常用。 戊二醛二步法 原理 戊二醛为一种双功能试剂,通过其醛基分别与酶和免疫球蛋白上的氨基共价结合,形成酶-戊二醛-免疫球蛋白
微卫星DNA的特点
⑴种类多、分布广,并按孟德尔共显性方式在人群中世代相传。在基因组中平均50kb就有一个重复序列,突变率低(< 0.04%)。⑵在人群中高度多态,其多态信息含量容量超过70%。其多态性表现为正常人群的不同个体某一基因位点重复序列的重复次数可不一样,同一个体的两个同源染色体上重复次数也可以不一样,即微卫
微卫星DNA的特点
⑴种类多、分布广,并按孟德尔共显性方式在人群中世代相传。在基因组中平均50kb就有一个重复序列,突变率低(< 0.04%)。⑵在人群中高度多态,其多态信息含量容量超过70%。其多态性表现为正常人群的不同个体某一基因位点重复序列的重复次数可不一样,同一个体的两个同源染色体上重复次数也可以不一样,即微卫
微卫星DNA的特点
⑴种类多、分布广,并按孟德尔共显性方式在人群中世代相传。在基因组中平均50kb就有一个重复序列,突变率低(< 0.04%)。⑵在人群中高度多态,其多态信息含量容量超过70%。其多态性表现为正常人群的不同个体某一基因位点重复序列的重复次数可不一样,同一个体的两个同源染色体上重复次数也可以不一样,即微卫
细胞转染实验的步骤介绍
一、细胞传代 (1)试验准备:200ul/1mlTip头各一盒(以上物品均需高压灭菌),酒精棉球,废液缸,试管架,微量移液器,记号笔,培养皿,离心管。 (2)弃掉培养皿中的培养基,用1ml的PBS溶液洗涤两次。 (3)用Tip头加入1mlTrypsin液,消化1分钟(37。C,5%CO2)
关于大隐静瓣膜功能实验的检查步骤介绍
1.嘱托患者仰卧於检察床上,显露下肢。 2.抬高患肢,使浅静脉血液回流完全排空。 3.于腹股沟下扎缚止血带,或以拇指按压卵圆窝。压力大小应仅能阻断大隐静脉回流,不妨碍深静脉回流。 4.嘱患者起立,先观察检查肢,正常情况下,隐静脉由下方静脉回充,血流经微血管进入静脉系统,费时约35秒。35秒
关于金黄色葡萄球菌的实验步骤介绍
1、样品的采集 称取25g火腿肠,切碎搅匀(用灭菌研钵研磨),置于250ml 锥形瓶中,加入225ml 灭菌生理盐水,制成1:10样品混悬液,混匀后作用20分钟,随机取10ml 离心。 2、增菌及分离培养 ①增菌培养方法:吸取5ml上清液,接种于7.5%NaCl肉汤培养基内,置于(37±1
细胞融合实验的实验步骤介绍
1. DMEM或1640基础培养基、PEG溶液置于37℃水浴中预温; 2. 将Balb/c小鼠摘眼球处死后,浸入75%洒精; 3. 无菌取免疫小鼠的脾脏; 4. 脾脏用PBS洗涤后,放入无菌过滤的网筛,再把网筛放在盛有完全培养基的玻璃平皿中用研磨棒(或注射器针管)轻轻研磨或挤压,使其通过网
关于显性标记的基本内容介绍
分子标记中,显性和共显性,对等位基因而言,即指所扩增的PCR产物(DNA片段)。像RAPD、ISSR等显性标记,PCR产物无法确切确定,因而无法区分杂合体(heterozygosity),只能按有带无带进行分析,记录为0/1;而SSR等共显性标记,则能区分杂合体,即二倍体及多倍体染色体DNA上的
非标记抗体免疫电镜的操作步骤
1.经典法 (1)将被检病毒材料0.9ml,加1︰5~1︰10稀释的特异性免疫 血清0.1ml充分混合。(2)置37℃作用1h或37℃1h后再置4℃过夜。(3)以17 000r/min~23 000r/min离心90min。(4)吸去上清,将离心管口倒置于滤纸上,吸去残留液体。(5)沉淀物中加少量H
FITC荧光素标记抗体的操作步骤
当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时,主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键(thiocarbmide)结合,形成FITC-蛋白质结合物,即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖氨酸残基,一般zui多能结合15~20个,一个IgG分子可结合2~8个分子的FITC,其反应式如下:F
微卫星DNA的分布情况
微卫星DNA又称短串联重复序列(shorttandemrepeat,STR)或简单重复序列(simplesequencerepeats,SSR),广泛随机地分布于真核生物基因组中,在DNA序列中平均每6kb就可能出现一个,约占人基因组的10%,其基本构成单位(核心序列)为1-6bp,呈串联重复排列而
概述微卫星DNA的特点
⑴种类多、分布广,并按孟德尔共显性方式在人群中世代相传。在基因组中平均50kb就有一个重复序列,突变率低(< 0.04%)。 ⑵在人群中高度多态,其多态信息含量容量超过70%。其多态性表现为正常人群的不同个体某一基因位点重复序列的重复次数可不一样,同一个体的两个同源染色体上重复次数也可以不一样
原代培养的实验步骤介绍
1.取材:将孕鼠拉颈椎处死,投入75%酒精浸泡数秒消毒,提出孕鼠控掉酒精,放置于蜡盘中用大头针固定。用手术器械逐层分离皮肤和肌肉组织,打开腹腔。注意不同的解剖层次使用不同的消毒器械。最后取出双角子宫置于无菌平皿内。 2.用Hanks液洗涤3次,剪开子宫取出胚胎。除去子宫、血液和筋膜等组织。
水迷宫实验的方法步骤介绍
做水迷宫实验的正确姿势Richard G. Morris于1981年和1984年连续发表的两篇文献使水迷宫实验名动天下,三十多年来已然成为学习记忆研究中不可或缺的评价实验。前文中小白鼠BB-8依次经历了实验的四个阶段,本文我们就认真介绍一下水迷宫实验的攻略。既然是攻略,那实验目的啊实验原理啊什么
蒸馏法的实验操作步骤介绍
加料 将待蒸馏液通过玻璃漏斗小心倒入蒸馏瓶中,要注意不使液体从支管流出。加入几粒助沸物,安好温度计。再一次检查仪器的各部分连接是否紧密和妥善。 加热 用水冷凝管时,先由冷凝管下口缓缓通入冷水,自上口流出引至水槽中,然后开始加热。加热时可以看见蒸馏瓶中的液体逐渐沸腾,蒸气逐渐上升。温度计的读
关于核酸杂交的步骤介绍
(1)制备样品:首先需要从待检测组织样品提取DNA或RNA。DNA应先用限制性内切酶消化以产生特定长度的片段,然后通过凝胶电泳将消化产物按分子大小进行分离。一般来说DNA分子有其独特的限制性内切酶图谱,所以经酶切消化和电泳分离后可在凝胶上形成特定的区带。再将含有DNA片段的凝胶进行变性处理后,直
关于Southern杂交的步骤介绍
1.将标记的DNA探针置沸水浴10min,迅速置冰上冷却1-2min,使DNA变性。 2.从水浴中取出含有滤膜和预杂交液的塑料袋,剪开一角,将变性的DNA探针加到预杂交液中。 3.尽可能除取袋中的空气,封住袋口,滞留在袋中的气泡要尽可能地少,为避免同位素污染水浴,将封好的杂交袋再封入另一个未
关于乳浊液的制备步骤介绍
乳浊液的制备要根据不同的乳化对象来选择适当的乳化剂品种和适当的条件,如果选择恰当,一般情况下只用3%已足够,因为食品乳化剂的临界胶束浓度都很低。但是,如果选择不当,即使用百分之几十也得不到稳定的乳浊液。乳浊液的制备是经验性很强的工作,要将某种未知物进行乳化分散是相当困难的。乳浊液的制备应主要掌握
关于酶标记法的基本信息介绍
酶标记法:酶与抗体交联,常用戊二醛法和过碘酸盐氧化法。郭春祥建立的HRP标记抗体的改良过碘酸钠法简单易行,标记效果好,特别适用于实验室的小批量制备。其标记程序为:将5μg HRP溶于0.5ml蒸馏水中,加入新鲜配制的0.06 mol/L的过碘酸钠(NaIO4)水溶液0.5ml,混匀置4℃冰箱30
关于寡核苷酸探针的标记介绍
为了确定探针是否与相应的基因组DNA杂交,有必要对探针加以标记,以便在结合部位获得可识别的信号,通常采用放射性同位素32P标记探针的某种核苷酸α磷酸基。但近年来已发展了一些用非同位素如生物素-亲合素系统 、地高辛配体等作为标记物的方法。非同位素标记的优点是保存时间较长,而且避免了同位素的污染。
活细胞的标记步骤以及注意事项
活细胞的标记步骤以及注意事项是什么耐心看完下文你就会有了答案。用蒸馏水配制贮存液,4摄氏度避光保存。标记时用蒸馏水稀释100倍。2.吸去细胞培养基。3.用PBS(+)冲洗细胞3次。4.将细胞于Hoechst标记液中室温下孵育10一30分钟。S.吸去标记液,并用PBS(+)冲洗3次,然后固定盖玻片:注
关于定硫仪的实验步骤的简述
实验步骤 (1)开电源开关,仪器将控制炉体自动升温。 (2)打开定硫仪气泵开关,检查是否漏气。再将气体流量调节到1000mL/min左右。打开搅拌器开关,看转速是否合适。 (3)待炉温升到1050℃时,打开电解开关,按[2/电解]键,观察电解电压是否大于35mv,如小于35mv需做废样平衡