关于微卫星标记的实验的步骤介绍
1. 客户收集标本(血液或组织等标本)并提取DNA。 2. 设计引物序列并扩增,琼脂糖电泳检测结果。 3. 合成荧光标记引物。 4. 进行PCR扩增,产物通过测序仪器电泳检测, 获得扩增片段大小。 5. 分析测序仪器读出的数据,给结果图谱。......阅读全文
核酸探针标记的实验过程
实验原理分子生物研究中,zui常用的探针即为双链DNA探针,它广泛应用于转基因植物拷贝数的鉴定、临床诊断等方面。双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可
核酸探针标记的实验过程
实验原理分子生物研究中,zui常用的探针即为双链DNA探针,它广泛应用于转基因植物拷贝数的鉴定、临床诊断等方面。双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将
核酸探针标记的实验过程
实验原理分子生物研究中,最常用的探针即为双链DNA探针,它广泛应用于转基因植物拷贝数的鉴定、临床诊断等方面。双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将
DNA探针的标记实验
探针标记法 实验方法原理 分子杂交是核酸链以碱基配对规则的一种结合方式,是核酸的重要理化特性。利用分子杂交这一特性来对特定核酸序列进行检测,必须将杂交链中的一
DNA探针的标记实验
核酸探针分子杂交是指具有一定同源性的两条核酸单链在一定条件下可按碱基互补原则形成双链,此杂交过程是高度特异的。核酸探针根据核酸的性质,可分为DNA和RNA探针;根据标记物不同,可分为放射性标记探针和非放射性标记探针两大类;根据是否存在互补链,可分为单链和双链探针;根据放射性标记物掺入情况,可分为均匀
DNA探针的标记实验
实验方法原理 分子杂交是核酸链以碱基配对规则的一种结合方式,是核酸的重要理化特性。利用分子杂交这一特性来对特定核酸序列进行检测,必须将杂交链中的一条用某种可以检测的进行标记,这条链就称为核酸探针。因此,核酸探针的制备是分子杂交技术的关键。放射性同位素标记是最早采用的也是目前最常用的核酸探针标记方法。
实验动物常用的标记法
常用的标记法有染色、耳缘剪孔、烙印、号牌等方法。二)烙印法用刺数钳在动物耳上刺上号码,然后用棉签蘸着溶在酒精中的黑墨在刺号上加以涂抹,烙印前最好对烙印部位预先用酒精消毒。(三)针刺法用七号或八号针头蘸取少量碳素墨水,在耳部、前后肢以及尾部等处刺入皮下,在受刺部位留有一黑色标记。该法适用于大小鼠、豚鼠
几种标记实验的特点
RAPD利用 10 个碱基的一个或几个随机引物非定点地扩增 DNA 片段,一般一个引物可扩增 6-12 条 DNA 片段,利用凝胶电泳分开扩增的片段,从而进行基因多态性研究。 RAPD 是一种能快速进行基因多态性研究的技术,并且由于不涉及印迹杂交、放射性自显影等技术,因此简便易行。SSR 真核生物的
关于探针标记的简述
探针是能与特异靶分子反应并带有供反应后检测的合适标记物的分子。利用核苷酸碱基顺序互补的原理,用特异的基因探针即识别特异碱基序列的有标记的一段单链DNA(或RNA)分子,与被测定的靶序列互补,以检测被测靶序列的技术叫核酸探针技术。探针制备就是将目的基因进行标记。特异性探针有三种形式——cDNA、R
实验动物标记实验
实验材料 兔子 小鼠试剂、试剂盒 3%~5%苦味酸 0.5%中性品红 2%硝酸银实验步骤 1. 染色法 适用于小动物,如兔子、大鼠、小鼠等。此方法是将化学药品涂在动物的被毛上,以不同颜色来区分动物。常用的化学药品有:3%~5%苦味酸溶液(黄色)、0.5%中性品红(红色)、2%硝酸银(咖啡色)
实验动物标记实验
实验材料兔子 小鼠试剂、试剂盒3%~5%苦味酸 0.5%中性品红 2%硝酸银实验步骤1. 染色法 适用于小动物,如兔子、大鼠、小鼠等。此方法是将化学药品涂在动物的被毛上,以不同颜色来区分动物。常用的化学药品有:3%~5%苦味酸溶液(黄色)、0.5%中性品红(红色)、2%硝酸银(咖啡色)。标记的原则是
平板划线法的实验操作步骤介绍
1.融化培养基:牛肉膏蛋白胨琼脂培养基放入水浴中加热至融化。 2.倒平板:待培养基冷却至50℃左右,按无菌操作法倒2只平板(每皿约15m1),平置,待凝固。 倒平板的方法:右手持盛培养基的试管或三角瓶置火焰旁边,用左手将试管塞或瓶塞轻轻地拨出,试管或瓶口保持对着火焰;然后用右手手掌边缘或小指
门冬酰胺的实验测定步骤介绍
配制:取硫酸3mL,缓缓注入适量水中,冷却至室温,加水稀释至1000mL,摇匀。 标定:取在270~300℃干燥至恒重的基准无水碳酸钠约0.15g,精密称定,加水50mL使溶解,加甲基红-溴甲酚绿混合指示液10滴,用本液滴定至溶液由绿色转变为紫红色时,煮沸2分钟,冷却至室温,继续滴定至溶液由绿
测定元素铝的实验相关步骤介绍
取本品约1.0g,精密称定,置200mL量瓶中,加稀盐酸10mL溶解后,加水稀释至刻度,摇匀,精密量取20mL,加氨试液中和至恰析出沉淀,再滴加稀盐酸至沉淀恰溶解为止,加醋酸-醋酸铵缓冲液(pH=6.0)20mL,再精密加乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)25mL,煮沸3~5分钟,放冷
分子标记——AFLP原理和操作步骤
一、原理AFLP也是通过限制性内切酶片段的不同长度检测DNA多态性的一种DNA分子标记技术。但AFLP是通过PCR反应先把酶切片段扩增,然后把扩增的酶切片段在高分辨率的顺序分析胶上进行电泳,多态性即以扩增片段的长度不同被检测出来。实验中酶切片段首先与含有与其共同粘末端的人工接头连接,连接后的粘末端顺
分子标记—AFLP原理和操作步骤
AFLP可用于:(1)构建遗传连锁图谱;(2)利用AFLP快速鉴别与目的基因紧密连锁的分子标记;(3)AFLP辅助的轮回选择育种;(4)研究基因表达与调控;(5)分类和进化研究;(6)甲基化研究等。实验方法原理AFLP是通过PCR反应先把酶切片段扩增,然后把扩增的酶切片段在高分辨率的顺序分析胶上进行
非标记抗体免疫电镜操作步骤
1.经典法(1)将被检病毒材料0.9ml,加1︰5~1︰10稀释的特异性免疫血清0.1ml充分混合。(2)置37℃作用1h或37℃1h后再置4℃过夜。(3)以17 000r/min~23 000r/min离心90min。(4)吸去上清,将离心管口倒置于滤纸上,吸去残留液体。(5)沉淀物中加少量H2
分子标记——AFLP原理和操作步骤
一、原理AFLP也是通过限制性内切酶片段的不同长度检测DNA多态性的一种DNA分子标记技术。但AFLP是通过PCR反应先把酶切片段扩增,然后把扩增的酶切片段在高分辨率的顺序分析胶上进行电泳,多态性即以扩增片段的长度不同被检测出来。实验中酶切片段首先与含有与其共同粘末端的人工接头连接,连接后的粘末端顺
分子标记—AFLP原理和操作步骤
实验方法原理 AFLP是通过PCR反应先把酶切片段扩增,然后把扩增的酶切片段在高分辨率的顺序分析胶上进行电泳,多态性即以扩增片段的长度不同被检测出来。实验中酶切片段首先与含有与其共同粘末端的人工接头连接,连接后的粘末端顺序和接头顺序就作为以后
关于酶联免疫吸附试验的标记方法介绍
酶联免疫吸附试验的标记方法,良好的酶结合物取决于两个条件:即高效价的抗体和高活性的酶。抗体的活性和纯度对制备标记抗体至关重要,因为特异性免疫反应随抗体活性和纯度的增加而增强。在酶标记过程中,抗体的活性有所降低,故需要纯度高、效价高及抗原亲和力强的抗体球蛋白,最好使用亲和层析提纯的抗体,可提高敏感
免疫标记技术常用的标记物介绍
常用的标记物有荧光素、酶、放射性核素及胶体金等。免疫标记技术具有快速、定性或定量甚至定位的特点,是应用最广泛的免疫学检测技术。 常用的免疫荧光素主要有: 1 .异硫氰酸荧光素 (FITC) ,最大吸收光谱为 490~495nm ,最大发射光谱为 520~530nm ,呈黄绿色荧光。 2 .
关于球磨机运转步骤的介绍
要想提高球磨机的产量不仅要从工艺因素、机械因素做起,同时也要保证对球磨机进行有效的管理和控制!管理的主要目的是防止带病运转状态的发生及消除,实现设备精细运转,以低电耗、球耗实现高质量、高台生产。 实现精细运转的步骤:合理的生产指标是指操作的目标,指标必须确定上下限范围;正确的操作参数是必须控制
关于whipple手术的手术步骤介绍
手术大体步骤: ①常用的切口有两种,一是右肋缘下的斜切口;另一常用的切口是右上腹部直切口。 ②剖腹探查。 ③将十二指肠第2段连同胰腺头部从腹膜后向前游离。 ④游离十二指肠和胰腺头部。 ⑤游离横结肠肝曲和横结肠的右端。 ⑥检查胰腺的改变及其与肿块的关系。 ⑦胃切除,按Hoffmeis
关于静脉穿刺的操作步骤介绍
以股静脉穿刺为例 1.病人取平卧位其穿刺下肢轻微外展外旋,在腹股沟韧带中心的内下方1.5~3.0cm,股动脉搏动内侧为穿刺点。 2.术者戴好帽子口罩立于病人一侧,消毒局部皮肤,戴无菌手套,铺无菌洞巾。于穿刺点处轻轻压迫皮肤及股静脉并稍加固定。 3.右手持注射器向左手示指中指固定的穿刺点刺入
关于手套箱的操作步骤介绍
打开包装箱,首先检查运输过程中真空手套箱上的各结合部位有无松动。如有松动请将相应的螺丝拧紧,然后可以试抽真空。 一、抽真空与充气的放法: 1、本产品分为主箱体和过渡室两部分。主箱体不能单独抽真空,过渡室则可以单独抽真空。[2] 2、先打开过渡室里面的门,然后关上所有手套接口压盖、阀门和过渡
关于甲状腺激素的合成步骤介绍
(1)碘在甲状腺的浓集:食物中的碘经肠道吸收后以无机碘化物形式进入血液,通过甲状腺上皮细胞膜上碘泵浓集,进入细胞内。此时的碘化物是无机碘。 (2)碘化物的氧化及酪氨酸的碘化:在过氧化酶的作用下,碘化物氧化成活性碘,并与酪氨酸结合成单碘酪氨酸(MIT)及二碘酪氨酸(DIT)。 (3)碘酪氨酸的
关于自然菌种选育的步骤介绍
自然选育的步骤主要是:采样,增长培养,培养分离和筛选等。采样筛选的菌种采集的对象以土壤为主,也可以是植物、腐败物品和某些水域等。土壤是微生物的汇集地,从土壤中几乎可以分离到任何所需的微生物,故土壤往往是首选的采集目标。微生物的营养需求和代谢类型与生长环境有很大关系。富集培养由于采集样品中各种微生
关于有丝分裂的方法步骤介绍
1、洋葱根尖的培养 (1)培养洋葱生根时,避免用新采收的洋葱,因它尚在休眠不易生根。如果必须用当年刚采收的新洋葱培养生根,则应设法打破它的休眠。常用的方法是用低浓度的赤霉素溶液浸泡洋葱底盘,这样可以促使其生根。培养过程中,注意每天至少换水一次,以防烂根。 (2)对于头年收下的洋葱,可以采用如
淡水中心“一种利用微卫星标记鉴定鲫鱼倍性方法”获授权
近日,由中国水产科学研究院淡水渔业研究中心唐永凯研究员等人发明的“一种利用微卫星标记鉴定鲫鱼倍性的方法”获得国家发明ZL授权,ZL号:ZL201810538737.7。 鲫鱼属鲤科,鲤亚科,鲫属,广泛分布在中国、日本、朝鲜半岛,后移植引种驯化到印度、北美和世界各地,适应能力极强,目前世界各地均
关于IMP的合成的反应步骤介绍
(1)5-磷酸核糖的活化:嘌呤核苷酸合成的起始物为α-D-核糖-5-磷酸,是磷酸戊糖途径代谢产物。嘌呤核苷酸生物合成的第一步是由磷酸戊糖焦磷酸激酶(ribose phosphate pyrophosphohinase)催化,与ATP反应生成5-磷酸核糖-α-焦磷酸(5-phosphorlbosy