浙江大学来茂德教授权威杂志发表最新研究成果

浙江大学的研究人员发现,蛋白质mimecan和Thioredoxin Domain-Containing Protein 5(TXNDC5)在结肠直肠癌中的表达明显不同。研究论文的题目为“Differential Expression of Mimecan and Thioredoxin Domain-Containing Protein5 in Colorectal Adenoma and Cancer”,该文章将发表在10月的《实验生物学和医学》(Experimental Biology and Medicine)杂志上。 腺瘤是结肠直肠癌的主要前期损伤,而结肠直肠癌则是全世界最常见的一种癌症类型。对腺癌分子机制的阐述对结肠直肠癌早期诊断、预防和治疗至关重要。 由来茂德教授领导的研究组通过利用二维电泳和质谱分析方法发现,结肠直肠癌中有27个蛋白质的表达发生了变化。Western blot分析清楚地证实了结肠直肠腺瘤和......阅读全文

LacZ和trpE融合蛋白的表达及纯化实验

基本方法             实验材料 大肠杆菌 试剂、试剂盒

膜蛋白的表达

常用于重组膜蛋白的表达系统有真核表达系统、原核表达系统和近些年来发展的无细胞表达系统。其中以大肠杆菌(E.coli)为代表的原核表达系统因为操作简单、成本相对低廉、遗传背景清楚、方便同位素标记,以及有大量可利用的表达载体和宿主菌株等原因,是当下获取重组膜蛋白的最主要途径。对于一些膜蛋白而言,采用增加

SDSPAGE检测检测蛋白表达的实验操作步骤

一、材料与仪器    30%丙烯酰胺溶液;1.5mol/L Tris-HCl分离胶缓冲液,PH8.8;1.0mol/L Tris-HCl浓缩胶缓冲液,PH6.8;电泳缓冲液,PH8.3;10%SDS溶液;10%过硫酸铵溶液;样品处理液;染色液;脱色液;电泳玻璃板,电泳电源架,电泳槽,电泳仪 

SDSPAGE检测表达蛋白实验原理和操作步骤

1.目的 学习SDS-PAGE的基本操作,学会用SDS-PAGE检测蛋白。 2.原理 蛋白质在加热变性以后与SDS结合,带上负电荷,在电场的作用下,向正极移动,结果按分子量大小排列在胶板上,含量多的蛋白带纹粗。 3.器材 旋涡混合器,微量移液取样器,

无细胞表达系统——难度蛋白表达的福音

   1964年有两个人开创了体外蛋白表达的先河,这两个人的名字大家必定不会陌生—马太和尼伦伯格。因为他们的创新思维让人类破译了编码氨基酸的64种翻译密码子。从此,体外蛋白表达开始为科学界所关注,不过彼时这个系统蛋白表达量低、持续时间短、稳定性差,使其未能得到进一步发展。    到80年代中期Sp

关于蛋白表达系统—植物表达系统的介绍

  植物能够表达来自动物、细菌、病毒以及植物本身的蛋白质易于大规模培养和生产,且在基因表达与修饰及安全性方面有特别的优势,因此利用植物生产外源蛋白质的研究展现了极其诱人的前景。多种抗体、酶、激紊、血浆蛋白和疫苗等都已通过基因工程的手段在植物的叶、茎、根、果实、种子以及植物细胞和器官中得到表达,然而提

无细胞表达系统——难度蛋白表达的福音

1964年有两个人开创了体外蛋白表达的先河,这两个人的名字大家必定不会陌生—马太和尼伦伯格。因为他们的创新思维让人类破译了编码氨基酸的64种翻译密码子。从此,体外蛋白表达开始为科学界所关注,不过彼时这个系统蛋白表达量低、持续时间短、稳定性差,使其未能得到进一步发展。到80年代中期Spirin等对其进

关于蛋白表达系统—昆虫表达系统的介绍

  昆虫表达系统是一类应用广泛的真核表达系统,它具有同大多数高等真核生物相似的翻译后修饰加工以及转移外源蛋白的能力。昆虫杆状病毒表达系统是国内外十分推崇的真核表达系统。利用杆状病毒结构基因中多角体蛋白的强启动子构建的表达载体,可使很多真核目的基因得到有效甚至高水平的表达。它具有真核表达系统的翻译后加

杆状病毒系统蛋白质表达实验——重组蛋白大规模生产

实验材料草地夜蛾细胞(Sf 9)高滴度重组病毒仪器、耗材无血清昆虫细胞培养基1~10 L 旋转培养瓶10.16 cm 管索张力器多旋转瓶揽拌台27℃ 培养箱供气泵实验步骤1. 在悬浮培养液中培养 Sf 9 细胞,并使之适应无血清培养液(基本方案 1)。2. 准备旋转培养瓶,用于按比例扩增 Sf 9

杆状病毒系统蛋白质表达实验——重组蛋白的代谢标记

实验方法原理由于重组蛋白表达的时候,宿主蛋白质的合成基本终止,因此体内代谢标记是检测重组蛋白的敏感方法。所有的标记氨基酸都掺入到晚期病毒特异的蛋白质(包括目的蛋白)的合成。35S 标记的甲硫氨酸和半胱氨酸是常用的放射标记的氨基酸。为了获得更好的结果,在标记之前细胞内的这两种氨基酸应当被清除:将细胞在

重组蛋白表达系统

  选择合适的蛋白表达系统是重组蛋白成功表达的关键。需要考虑以下方面的因素,包括:目标蛋白性质、用途、蛋白质产量和成本。此外,许多蛋白质表达项目也存在着风险,尤其是大蛋白、膜蛋白、核蛋白和具有大量翻译后修饰的蛋白质。   目前卡梅德生物可以提供几种表达系统可供客户选择,不同的系统有不同的特性和应用

重组蛋白表达系统

  选择合适的蛋白表达系统是重组蛋白成功表达的关键。需要考虑以下方面的因素,包括:目标蛋白性质、用途、蛋白质产量和成本。此外,许多蛋白质表达项目也存在着风险,尤其是大蛋白、膜蛋白、核蛋白和具有大量翻译后修饰的蛋白质。   目前卡梅德生物可以提供几种表达系统可供客户选择,不同的系统有不同的特性和应用

蛋白的表达与纯化

蛋白表达纯化已经是非常经典简单的实验了,没有LSS说的那么吓人。说说我的蛋白表达纯化以及下面的单抗制作工作总体设计概要吧:1首先要知道你要纯化蛋白的编码DNA序列,查阅相关文献,看目的基因在那些细胞或者组织中高表达,进而设计该基因的引物,扩增出目的DNA片段的ARF。这一布叫目的基因片段的获取2构建

重组蛋白表达系统

选择合适的蛋白表达系统是重组蛋白成功表达的关键。需要考虑以下方面的因素,包括:目标蛋白性质、用途、蛋白质产量和成本。此外,许多蛋白质表达项目也存在着风险,尤其是大蛋白、膜蛋白、核蛋白和具有大量翻译后修饰的蛋白质。目前卡梅德生物可以提供几种表达系统可供客户选择,不同的系统有不同的特性和应用。在这里,我

蛋白的表达与纯化

蛋白表达纯化已经是非常经典简单的实验了,没有LSS说的那么吓人。说说我的蛋白表达纯化以及下面的单抗制作工作总体设计概要吧:1首先要知道你要纯化蛋白的编码DNA序列,查阅相关文献,看目的基因在那些细胞或者组织中高表达,进而设计该基因的引物,扩增出目的DNA片段的ARF。这一布叫目的基因片段的获取2构建

浙大教授以本科生教学为主最高可享长江学者待遇

  近日,浙江大学“求是特聘教学岗”首批聘任的6位教授到岗。在未来4年聘期内,这些以给本科生教书为主业的教授将享受与长江学者及学校最高层次的“求是特聘教授”相同的待遇。  去年下半年浙大出台《浙江大学加强高水平教育教学工作办法》,该《办法》指出,受聘为“求是特聘教学岗”的教师在聘期内必须把

包涵体表达的蛋白的复性包涵体表达的蛋白的复性

蛋白的复性是一个世界性的难题,没有通用的方法,甚至没有靠得住的规律,只能试。可以参考以下文章。该文出处已经忘了,如果有人知道原创作者或网上出处,请补充。包涵体表达的蛋白的复性包涵体表达的蛋白的复性包涵体:包涵体是指细菌表达的蛋白在细胞内凝集,形成无活性的固体颗粒。包涵体的组成与特性:一般含有50%以

包涵体表达的蛋白的复性包涵体表达的蛋白的复性

蛋白的复性是一个世界性的难题,没有通用的方法,甚至没有靠得住的规律,只能试。可以参考以下文章。该文出处已经忘了,如果有人知道原创作者或网上出处,请补充。包涵体表达的蛋白的复性包涵体表达的蛋白的复性包涵体:包涵体是指细菌表达的蛋白在细胞内凝集,形成无活性的固体颗粒。包涵体的组成与特性:一般含有50%以

蛋白质在哺乳动物细胞中表达实验

实验方法原理 实验材料 载体(如 CDM 8)实验步骤 1. 将目的基因亚克隆至合适的载体中得到所需的重组 DNA 。用小量法(5 ml 培养液)或用 CsCl/溴化乙锭离心法纯化重组 DNA。2. 在转染的前一天,将 COS-7 细胞以约 20% 汇片的数量种入含 DMEM-2 CS 培养基的 1

蛋白质在哺乳动物细胞中表达实验

基本方案 用COS细胞瞬时表达             实验方法原理 实验材料 载体(如 CD

蛋白质在哺乳动物细胞中表达实验

实验材料载体(如 CDM 8)实验步骤1. 将目的基因亚克隆至合适的载体中得到所需的重组 DNA 。用小量法(5 ml 培养液)或用 CsCl/溴化乙锭离心法纯化重组 DNA。2. 在转染的前一天,将 COS-7 细胞以约 20% 汇片的数量种入含 DMEM-2 CS 培养基的 100 mm 培养皿

教育部公布47个重点实验室主任名单

  为保证实验室持续稳定发展,规范和加强对重点实验室领导班子聘任管理,经有关高校公开招聘和推荐,教育部科技司聘任了“河口海岸学”等国家重点实验室以及“神经科学”等教育部重点实验室主任和学术委员会主任,名单如下:国家重点实验室主任和学术委员会主任聘任名单序号实验室名称依托单位实验室主任学术委

教育部聘任部分重点实验室主任和学术委员会主任

  为保证实验室持续稳定发展,规范和加强对重点实验室领导班子聘任管理,经有关高校公开招聘和推荐,教育部科技司聘任了“河口海岸学”等国家重点实验室以及“神经科学”等教育部重点实验室主任和学术委员会主任,名单如下:    国家重点实验室主任和学术委员会主任聘任名单 序号实验室名称依托单位实验室

浙江大学最新文章:乳腺癌生物学检测指标

  科学通报,中国科学C辑:生命科学,这两份期刊均是由中国科学院和国家自然科学基金委员会共同主办的,我国学术期刊中的知名品牌,被国内外各主要检索系统收录,如国内的《中国科学论文与引文数据库》(CSTPCD)、《中国科学引文数据库》(CSCD)等;美国的SCI、CA、EI,英国的SA,日本的《科技文献

生物学术语表达序列标签的定义

表达序列标签从互补DNA(cDNA)分子所测得部分序列的短段DNA(通常300~500bp)。从cDNA文库所得到的许多表达序列标签集合组成表达序列标签数据库,代表在一定的发育时期或特定的环境条件下,特定的组织细胞基因表达的序列。可用于验证基因在特定组织中的表达,推导全长cDNA序列,或作为标签标志

生物学术语表达序列标签的方法

EST作为表达基因所在区域的分子标签因编码DNA序列高度保守而具有自身的特殊性质,与来自非表达序列的标记(如AFLP、RAPD、SSR 等)相比更可能穿越家系与种的限制,因此EST标记在亲缘关系较远的物种间比较基因组连锁图和比较质量性状信息是特别有用。同样,对于一个DNA序列缺乏的目标物种,来源于其

共表达分析挖掘lncRNA的生物学功能

lncRNA研究是目前生命科学领域的研究热点,但是,目前对于lncRNA的功能理解还处于初级阶段。据不完全统计,目前已知功能的lncRNA不超过1000条。因此,怎么在现有基础上去挖掘lncRNA的生物学功能呢?针对lncRNA和mRNA的共表达研究,为我们理解lncRNA在疾病中的生物学功能提供了

共表达分析挖掘lncRNA的生物学功能

  lncRNA研究是目前生命科学领域的研究热点,但是,目前对于lncRNA的功能理解还处于初级阶段。据不完全统计,目前已知功能的lncRNA不超过1000条。因此,怎么在现有基础上去挖掘lncRNA的生物学功能呢?针对lncRNA和mRNA的共表达研究,为我们理解lncRNA在疾病中的生物学功能提

共表达分析挖掘lncRNA的生物学功能

  lncRNA研究是目前生命科学领域的研究热点,但是,目前对于lncRNA的功能理解还处于初级阶段。据不完全统计,目前已知功能的lncRNA不超过1000条。因此,怎么在现有基础上去挖掘lncRNA的生物学功能呢?针对lncRNA和mRNA的共表达研究,为我们理解lncRNA在疾病中的生物学功能提

生物学术语表达序列标签的原理

EST是从一个随机选择的cDNA克隆进行5’端和3’端单一次测序获得的短的cDNA部分序列,代表一个完整基因的一小部分,在数据库中其长度一般从20到7000bp不等,平均长度为360±120bp 。EST来源于一定环境下一个组织总mRNA所构建的cDNA文库,因此EST也能说明该组织中各基因的表达水